張振玲(編譯)
(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院動物工程系,江蘇 徐州 221006)
Ractopamine, 中 文 譯 為 雷托帕明,又名萊克多巴胺,簡稱RAC,是一種β 腎上腺素激動劑,國外被作為育肥豬飼料添加劑以提高其增重,同時增加瘦肉沉 積(Rickard et al., 2017; Rikard-Bell et al., 2009)。巴西、美國和加拿大等國養(yǎng)殖的豬通常在育肥階段后期使用RAC 添加劑。歐盟與中國特別禁止用RAC 作為飼料添加劑喂豬。禁用RAC 在豬日糧中添加使用的主要原因之一,是它對動物行為有負(fù)面的影響。最近的研究表明,用RAC 喂養(yǎng)的豬可能表現(xiàn)出人工處置困難(James et al., 2013; Puls et al., 2015);同時,用RAC 喂養(yǎng)的豬的代謝變化也預(yù)示著豬的興奮性和攻擊性都發(fā)生了變化(Athayde et al., 2013;James et al., 2013)。豬的攻擊性及人工處置困難可能反過來導(dǎo)致胴體質(zhì)量差(D’Eath et al., 2010),并導(dǎo)致其摔倒和死豬的發(fā)生率增加(Zurbrigg et al., 2017)。 盡 管 對 促性腺激素釋放因子(GnRH)的免疫最初是作為公豬手術(shù)去勢的一種替代方法,但是近年來已經(jīng)成為一種可以提高重體型母豬生長性能的手段(通過抑制母豬的生殖活動)或替代辦法(Bohrer et al., 2014;Rodrigues et al., 2016 ;Van den Broeke et al., 2016)。盡管免疫去勢對于豬的福利、人工處置和動物行為的影響已經(jīng)有所報(bào)道(Andersson et al., 2012;Guay et al., 2013),但直到目前為止,這一問題還沒有在免疫母豬身上得到重視。此外,Poletto(2010 A) 報(bào) 道 稱, 添 加RAC 飼養(yǎng)的母豬表現(xiàn)出行為變化,表現(xiàn)為對同圈內(nèi)伙伴攻擊行為的增加。鑒于最近出現(xiàn)的將IM 作為飼養(yǎng)母豬達(dá)到較重屠宰重量的一種手段,評估其行為結(jié)果值得人們關(guān)注,無論IM 是否與RAC 聯(lián)合使用。因此,假設(shè)添加RAC 喂養(yǎng)的母豬可能對飼養(yǎng)管理員或其同圈伙伴都更具有攻擊性,IM 則可能會抑制這些負(fù)面作用或影響。為檢驗(yàn)這一假設(shè),我們在試驗(yàn)豬圈中觀察描述了母豬的日常行為(24 h)及其與觀察者的相互作用。
所有涉及動物的程序和分析都已得到米納斯吉拉斯聯(lián)邦大學(xué)(Federal University of Minas Gerais)動物保護(hù)和使用委員會的審查和批準(zhǔn)(COEA/UFMG,第243/2015 號)。
根據(jù)體重(59.25 ~68.25 kg)選擇72 頭雜交母豬(Dan Bred DB-90/Naima x Choice P-76), 并 分 配到生長育肥舍內(nèi)的36 個圈內(nèi)(每圈2 頭)。選擇的供試豬平均體重為63.50±0.40 kg,在生長育肥舍內(nèi)一直飼養(yǎng)到屠宰結(jié)束(約25 周齡)。在試驗(yàn)期間(15—25 周),所有的供試母豬都可以自由獲得飼料和飲水,且日糧均滿足或超過其最低營養(yǎng)要求(Rostagno et al. 2011)。育肥舍內(nèi)豬圈成兩列排列,中間用金屬柵格隔開,圈內(nèi)有半板條地板(1.75×1.75 m),每頭母豬初始可用地板面積為1.53 m2。每圈均配備1 個四槽口給料器和1 個飲水頭。1個數(shù)據(jù)記錄器(型號174-H,Testo,意大利米拉諾)安裝在育肥舍中間(在母豬背部高度的水平),可以連續(xù)測量溫度和濕度。試驗(yàn)處理按免疫類別(非免疫(N)、免疫(I))和添加RAC 水平(0,10 mg/kg)組成2×2 因子排列,每個處理組18頭豬(N0,N10,I0,I10)。
2.1.1 試驗(yàn)準(zhǔn)備與處理
在 第15 周 時,36 頭 母 豬 第1 次 注 射 疫 苗(Vivax?, Zoetis An imal Health, S?o Paulo, 巴 西 圣 保羅),第2 次注射是在4 周后(即第19 周)。該疫苗的化學(xué)組成為每毫升含GnRH 類白喉類毒素綴合物抗原0.2 mg,鹽酸二乙基氨基乙基右旋糖酐(diethylaminoethyldextran hydrochloride)150 mg 作 為佐劑(Zoetis, S?o Paulo,巴西圣保羅)。根據(jù)疫苗制造商的建議,在耳后皮下注射進(jìn)行免疫(2 mL)。未免疫母豬按照上述相同的程序注射生理鹽水。在試驗(yàn)的最后1 個月(21—25 周),所有的母豬每天都接受成熟公豬的挑逗。每個處理的母豬4 頭組被帶到公豬圈,并接觸公豬20 min。為了排除任何公豬方面的因素影響,每組母豬均隨機(jī)地出現(xiàn)在每只公豬面前相同的次數(shù)。有一位觀察人員站在豬圈前的過道上,阻止任何攻擊性行為和爬跨行為發(fā)生。在21 周齡時,每一個免疫組(共2 組)與非免疫組(共2 組)的18 只母豬在屠宰前28 d 內(nèi),一組日糧中添加RAC(10 mg/kg)添加劑,另一組則不添加。母豬飼喂相同的玉米-大豆日糧,從第15 周至第21 周,添加RAC 添加劑的日糧中的氨基酸含量要調(diào)整以基本滿足或超過最低要求(Rostagno et al., 2011)。
試 驗(yàn) 最 后1 周,24 h 的 時 限內(nèi)觀察完所有的試驗(yàn)豬圈。表1 描述了所使用的基本方法,觀察人員由兩名人員組成,兩名觀察員穿過位于豬圈舍側(cè)邊的兩個過道,持續(xù)24 h 記錄每12 min 內(nèi)表達(dá)一次某特定行為的母豬的數(shù)量。
表1 是對行為的定義。收集數(shù)據(jù)為單個行為的計(jì)數(shù),并在分析之前轉(zhuǎn)換為百分比。
表1 對豬只行為的定義
行為觀察在10:00 開始,大約在觀察開始前的1 h,觀察人員就在圈欄旁走動,以使試驗(yàn)?zāi)肛i習(xí)慣或適應(yīng),從而防止任何因人們觀察過程而導(dǎo)致的母豬行為表達(dá)的改變。記錄每頭試驗(yàn)?zāi)肛i的行為,每個圈的數(shù)據(jù)平均后再轉(zhuǎn)換為每小時每個行為的百分比。
在試驗(yàn)最后1 周,即24-25周,通過一項(xiàng)恐懼測試評估了母豬與人們互動的內(nèi)在能力,這項(xiàng)測試由Gonyou and Stricklin 于1998 年修訂,2013 年由Guay 等人采納使用。試驗(yàn)圈舍鄰近的試驗(yàn)豬圈用于評估IM 和RAC 對人豬相互作用的交互作用,如圖1 所示。距離入口門對面的墻一米遠(yuǎn)畫線(紅色虛線),以測試小母豬(每次1 組4 頭(藍(lán)色)越過紅線并接近觀察者(綠色)所花的時間。
圖1 用于評估人豬互作的測試豬圈示意圖
所有供試母豬都分成組,每組4 頭(4 個不同處理),進(jìn)行恐懼測試。一位非飼養(yǎng)管理者的觀察者站在豬圈一側(cè),在離這個位置1 m 遠(yuǎn)的地板上畫一條線。另一位站在圈欄外的觀察者記錄了母豬穿越圈欄向人走去的時間。每組母豬與觀察者的相互作用時間限定為3 min,相互作用的等級為0 ~5(0 =無相互作用,1 =嗅觀察者的衣服,2 =用鼻子輕觸觀察者,3 =用鼻子主動接觸觀察者,4 =非攻擊性地輕咬,5 =豬攻擊性地扭擰觀察者的衣服)。所有行為程序均由同一組人員進(jìn)行。
使用R 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(R 軟件 3.4.1 版,2017),具體過程略。
24 h 內(nèi),無論試驗(yàn)組還是非試驗(yàn)組均明顯出現(xiàn)兩個攝食行為高峰期(即早上5~7時(7.90%, F(3.84)=8.74;P <0.001)和晚上5 ~9 時(9.20%, F(3.84)=8.74;P <0.001)),中 午從11 時至下午1 時攝食行為下降(0.20%,F(xiàn)(3.84)=8.74;P <0.001)。飲水行為方面,母豬從凌晨1 時到凌晨5 時和晚上7 時至夜間12 時分別 增 加4.30% 和2.80%)(F(3.84)=5.76;P <0.001),在上午8 ~9 時和上午11 時至下午2 時這兩個時間段不飲水(F(3.84)=5.76;P <0.001)。一天中大部分的時間,從早上8時至下午4 時躺臥行為更頻繁(96.60%,F(xiàn)(3.84)=6.41;P <0.001),晚上6 至7 時有所降低(74.40%,F(xiàn)(3.84)==6.41;P <0.001)。共觀察到6 次爭斗行為,其中4 次發(fā)生在I0 組母豬(凌晨1 時至凌晨3 時),2 次發(fā)生在I10 組母豬(晚上6 至7時)。站立行為在白天沒有顯示任何最大和最小頻率的可識別模式,在整個觀察期內(nèi)均未觀察到爬跨行為。
表2 顯 示 了 在24 h 內(nèi)IM、RAC 和時間在行為性狀上相互作用的評估結(jié)果。
免疫母豬站立時間比未免疫組顯 著 減 少32.40%(F(4.26)=6.66;P <0.05)。非 免 疫 母 豬 在24 h 內(nèi)沒有表現(xiàn)出任何攻擊性的嘗試,免疫母豬幾乎無攻擊性行為(0.07%,F(xiàn)(4.26)=1.80;P >0.05)。 添 加RAC 不影響母豬的行為(P >0.05)。IM 與RAC 無交互作用,IM、RAC與時間無交互作用(P >0.05)。
表3 給出了人與豬間的相互作用數(shù)據(jù)。RAC 對任何評價參數(shù)均無影響(P >0.05)。
雖然對GnRH 免疫不影響母豬對處于圈內(nèi)的人的攻擊性(P >0.05),但免疫母豬接近人所花的時間極明顯較 少, 為33.7 s(F(4.96)=50.58;P <0.001),其非免疫母豬首次接近觀察者時間為62.7 s(F(4.96)=25.28;P <0.001)。
表2 24 h 內(nèi)四個處理母豬的特定行為的平均時間百分比
表3 不同處理的人-豬交互作用
這次研究的主要目的是評價育肥母豬對GnRH(IM) 免疫的行為反應(yīng),并探討IM 和RAC 對這些參數(shù)的可能的交互作用。近年來一些學(xué)者研究了IM 和RAC 對豬行為和人豬相互作用的單獨(dú)和交互作用(Guay et al., 2013;Needham et al., 2017;Rocha et al., 2013)。然而,這些研究主要針對的是閹割公豬。考慮到IM 作為飼養(yǎng)母豬手段以達(dá)到更高屠宰重量的一種有價值的手段或方法,評介其對母豬行為影響的結(jié)果(無論是否與RAC 聯(lián)用)值得關(guān)注。這是首次針對上市重型母豬的IM方面的研究。
有幾項(xiàng)研究闡述了IM 對公豬行為的影響。免疫去勢的公豬每天表現(xiàn)出的行為模式與物理閹割去勢的公豬類似(Guay et al.,2013)。盡管行為上有相似之處,但免疫組在育肥圈里與人互動時會更好奇,而且在屠宰場摔倒和死豬的發(fā)生率也會降低。未免疫母豬對同圈伙伴的攻擊性增強(qiáng)(Poletto et al.,2010a)。添加RAC 母豬的攻擊性變小。這種行為變化可能是由于母豬缺乏血清素激活信號以及RAC 對多巴胺等調(diào)節(jié)系統(tǒng)的間接作用所致。從行為角度看,IM 和RAC 之間的相互作用似乎是相反的,這一點(diǎn)正 如Rocha et al.,(2013)所 證 明的那樣,即在免疫去勢的公豬中,RAC 處理對一般行為產(chǎn)生不利影響(Rocha et al., 2013)。
結(jié)果表明,與未免疫去勢的母豬相比,免疫去勢母豬站立時間較短,而添加RAC 組及各處理間的交互作用均未達(dá)到顯著性水平。較小群體(成對)和相對較大空間(1.75×1.75 m,每圈)里的母豬躺臥行為不受各處理的影響。這次的研究結(jié)果與其他有關(guān)動物在添加RAC 時更加活躍和警覺的研究結(jié)果相矛盾(Marchant-Forde et al., 2003; Poletto et al., 2010b),部分原因可能是緣于不同的舍飼條件(這次研究中舍飼條件較好,比較寬敞)。此外,對照定時飼喂時的坐姿方式,可以看出在喂食時段附近母豬花費(fèi)更多的時間用于坐姿,這可能意味著在喂食時的應(yīng)激壓力更大。這一結(jié)果值得進(jìn)一步關(guān)注。
免疫去勢母豬和免疫去勢公豬的飼料攝入量通常增加,特別是在第2 次免疫注射之后(Daza et al., 2014;Dunshea et al., 2013; Elsbernd et al., 2017; Puls et al., 2014)。在飼料攝入量方面,研究小組以前的行為評估數(shù)據(jù)(Rodrigues et al., 2016)并沒有顯示出進(jìn)食次數(shù)的增加(可能當(dāng)時豬進(jìn)食時面臨較低的應(yīng)激壓力)。
因?yàn)橹苯咏佑|性成熟的公豬,可能會引發(fā)母豬生殖活動增強(qiáng)的跡象(Eastham and Cole, 1987), 預(yù)計(jì)未免疫去勢母豬在圈內(nèi),可能會表現(xiàn)出更多次類似爬跨行為的過分親近行為(Dial et al., 1983)。在這方面,Rodrigues et al. (2016) 研究結(jié)果表明未免疫去勢母豬的生殖行為活動(生殖道發(fā)育和發(fā)情)高于免疫去勢母豬。這次研究24 h 的評估期可能不足以檢測到育肥階段母豬的爬跨行為。
正 如Forkman et al.(2007) 所討論的那樣,人-豬交互作用測試的要點(diǎn)是通過運(yùn)動反應(yīng)等評分,來評估動物的易運(yùn)輸性和反應(yīng)能力。此外,在這次研究中所用的混群豬的試驗(yàn)非常重要,因?yàn)榛旌先后w內(nèi)的等級特征和社會凝聚力可能會對反應(yīng)產(chǎn)生影響(Forkman et al., 2007)。考 慮 到 這個實(shí)驗(yàn)站的小母豬的圈很小,決定使用測試圈。當(dāng)小母豬被引導(dǎo)到測試圈時,免疫去勢母豬花費(fèi)較少的時間來接近觀察者并與觀察者進(jìn)行互動。有證據(jù)表明豬害怕人對豬的生產(chǎn)力以及動物福利都有不利的影響(Coleman et al., 2000;Day et al., 2002;Hemsworth et al., 1989;Janczak et al., 2003)。 結(jié) 合 這 次研究結(jié)果,未免疫去勢小母豬比免疫去勢的小母豬表現(xiàn)出更高的恐懼傾向。此外,在標(biāo)準(zhǔn)豬圈內(nèi)人(飼養(yǎng)人員)豬間的高頻次的身體接觸與肉質(zhì)呈顯著正相關(guān)(Hemsworth et al., 2002)。 在 這 次研究中,不同處理對母豬和觀察者之間的相互作用無影響。對于IM,在第2 次免疫注射后,豬對圈欄內(nèi)的同伴及飼養(yǎng)員的攻擊性都 降 低(Baumgartner et al., 2010;Bradford and Mellencamp, 2013)。觀察者不習(xí)慣于處理試驗(yàn)?zāi)肛i,可能是人豬交互作用試驗(yàn)效果差的原因。RAC 對人豬相互作用的影響研究結(jié)果是相互矛盾的。如Peterson et al. (2015)的研究結(jié)果表明日糧中添加5mg/kg RAC 的豬,對于人的反應(yīng)相似,而James et al.(2013)觀察到在日糧中添加20 mg/kg RAC 的動物往往在較激烈處理時更容易受到應(yīng)激壓力。
綜上所述,這次的研究結(jié)果是IM 能在不影響母豬與人的互動的情況下,提高母豬的好奇心,而RAC對母豬的行為影響有限。因此,鑒于母豬的行為以及與人的交互作用,IM 似乎并不有損于動物福利。
參考文獻(xiàn)略。
(原文:ALVES RODRIGUES L, DE ALMEIDA F R C L, ALVES FERREIRA F N, et al. Assessment of ractopamine supplementation and immunization against GnRH effects on behavioral traits and human-pig interaction in heavy weight market gilts[J]. Applied Animal Behaviour Science, 2018, 207:20-25.)