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        大豆卵磷脂作為冷凍保護劑對澳洲白綿羊精液品質的效果試驗

        2019-03-21 05:59:56陳廣仁王曉平潘曉榮
        中獸醫(yī)學雜志 2019年1期
        關鍵詞:頂體射精保護劑

        陳廣仁,王曉平,潘曉榮,袁 勇,李 巖

        (甘肅省畜牧業(yè)產業(yè)管理局,甘肅 蘭州 730030)

        1 材料與方法

        1.1 試驗動物的飼養(yǎng)管理

        6只雄性澳洲白綿羊,平均月齡21.4±4.1,平均體重80.2±2.5 kg。單欄飼養(yǎng),自由飲水。早8點晚6點,定量投料,粗飼料含苜蓿30%、全株玉米青貯40%、大麥秸稈30%;精料含豆粕14%、菜粕8%、DDGS 12%、麩皮5%、玉米55%、種羊用預混料15%、食鹽1%,總蛋白17.36%。在訓練采精前15 d開始每天增加胡蘿卜500 g/只,采精期間每羊每天補充2枚雞蛋。利用假陰道法在有發(fā)情母羊的情況下訓練采精。

        1.2 公羊體重與陰囊周長的測定

        訓練公羊采精后,即采精實驗期間,當天稱重;同時利用皮卷尺在陰囊最大直徑處測量陰囊周長,重復三次測量,取平均值。

        1.3 精液采集與冷凍保存

        采集精液后,將5微升精液于潔凈載玻片上,顯微鏡下觀察,精子密度≥20億、精子活力≥70%,并且精子畸形率≤20%的精液才能夠冷凍保存。先將每只羊的精液平均分為2份,分別用含大豆卵磷脂BioXcell和含卵黃Optidyl將精液進行兩部分冷凍。

        1.4 精液品質檢測

        1.4.1 精子活力檢測

        取出冷凍后的精子,于37℃水中 30 s。取 5 μL精液滴加于 Leja玻片腔室中,置于精液輔助分析儀下分析精液運動參數。

        1.4.2 精子頂體完整率和DNA完整性分析

        利用精子頂體染色試劑盒PSA-FITC進行精子頂體完整率檢測,利用精子染色體擴散實驗進行DNA完整性分析。

        1.4.3 統(tǒng)計分析

        對同一只公羊采精8次,對每一次的精液質量進行檢測,取平均值;每只羊的精液冷凍實驗至少3次,解凍后的常規(guī)質量和頂體完整率、DNA完整率等分析。采用 SPSS 21.0軟件中的One-Way AVNOVA對結果進行差異顯著性分析,分析結果用平均值±標準差表示。

        2 結果

        2.1 公羊體重與陰囊周長的測定結果

        由于種公羊的體重在一定范圍內與陰囊的大小呈正相關,而陰囊大小直接關系到每次射精的總精子數量。對澳洲白綿羊進行評定,發(fā)現(xiàn)公羊體重與陰囊周長之間相關系數R2=0.98(圖1),而陰囊周長與每次射精精子總數之間的相關系數 R2=0.99(圖 2)。

        圖1

        圖2

        表1

        2.2 種公羊鮮精品質評定

        通過表1可以看出澳洲白種公羊每次射精量約 1.0 mL,精液密度約為 19~32×108 個/mL,精子活力最低為73%,最高為81%,頂體完整率都在71%~76%之間,而精子DNA完整率在68%~74%之間。同時發(fā)現(xiàn)所有種公羊每次采取的精液外觀都為乳白色,略帶腥味。

        2.3 兩種冷凍保護劑的效果比較

        從表2可以發(fā)現(xiàn)含有大豆卵磷脂分冷凍保護劑BioXcell在頂體完整率、DNA完整率以及精子直線速度方面現(xiàn)在高于卵黃冷凍保護劑Optidyl;而在精子活力、曲線速度以及評價路徑速度方面兩種冷凍保護劑無顯著性差異。

        表2

        3 討論

        綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)引進甘肅河西走廊地區(qū)的澳洲白種公羊鮮精質量指標分別為:精液量0.93±0.4 mL、精子密度 25.5±4.1 億/mL、精子活力0.78±0.09、 頂體完整率 0.73±0.04、DNA 完整率0.72±0.05。同時發(fā)現(xiàn)公羊體重與陰囊周長成正比例關系(R2=0.98),陰囊周長與每次射精量呈正相關(R2=0.99)。用含大豆軟磷脂 BioXcell對澳洲白種公羊精液進行冷凍保存,在頂體完整率和DNA完整率方面顯著優(yōu)于含卵黃Optidyl。

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