袁春暉，李春雨，李紅麗，趙紅娜，王文紅，孟慶旭，張中學(xué)

聚乙二醇干擾素-α（peg-IFN-α)為抗病毒治療常用的一線藥物，具有療效確切、停藥后復(fù)發(fā)率低的特點[1-3]。但既往研究[4]發(fā)現(xiàn)，Peg-IFN的治療療效可能會受到環(huán)境、病毒基因型和宿主等因素的影響。新近國外研究[5]報道稱，IL28基因型會影響α-干擾素聯(lián)合利巴韋林治療慢性丙型肝炎患者的應(yīng)答效果，但關(guān)于IL28B基因多態(tài)性是否會影響α-干擾素治療CHB患者療效的研究還較少。本研究應(yīng)用Peg-IFNα治療了HBeAg陽性的CHB患者，并分析了IL28B基因位點單核甘酸多態(tài)性（SNP）對治療療效的影響，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2014年8月～2016年10月我院收治的的HBeAg陽性CHB患者143例，男性107例，女性36例；年齡為26～62歲，平均年齡為(30.7±6.9)歲。均符合《慢性乙型肝炎防治指南》[6]的診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）初次接受抗病毒治療者；（2）經(jīng)檢測為 HBV DNA≥500 IU/ml者；（3）血清 HBeAg和HBsAg陽性，抗-HBe陰性者；（4）經(jīng)肝組織學(xué)檢查肝纖維化分期超過S2期和炎癥活動度分級超過G2級者；（5）血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）升高超過2倍正常值上限（ULN）者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）肝硬化或肝癌患者；（2）血清總膽紅素（TBIL)水平超過2倍正常值上限者；（3）近半年內(nèi)接受過抗病毒治療者；（4）合并可能影響治療結(jié)果的系統(tǒng)性疾病者；（5）妊娠或計劃妊娠或哺乳者。本研究已獲醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，受試者簽署知情同意書。

1.2 治療方法 給予Peg-IFNα-2a（派羅欣，上海羅氏制藥有限公司）180 μg皮下注射，1次/w，連續(xù)治療24 w。在治療24 w末，檢測血清HBV DNA＜500 IU/ml、發(fā)生 HBeAg 血清學(xué)轉(zhuǎn)換、ALT＜1.0 ULN者，即完全應(yīng)答者，則停止治療，進入12個月的隨訪期。在治療24 w末，未達(dá)到完全應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)者，但血清HBV DNA水平或HBeAg滴度下降，則繼續(xù)給予Peg-IFNα-2a治療，每3個月檢測1次，直至達(dá)到完全應(yīng)答者停藥或總療程達(dá)到144 w，停止治療，進入12個月的隨訪期。

1.3 評價標(biāo)準(zhǔn) 血清 HBV DNA＜500IU/ml、HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換、ALT＜1.0 ULN，即為完全應(yīng)答。

1.4 檢測方法 采用實時熒光定量PCR法檢測血清HBV DNA，并行HBV基因分型（上海江萊生物科技有限公司）；采用MALD-TOF系統(tǒng)中的iPLEX試劑盒檢測血清IL28B基因上游SNP位點rsl2979860、rs8099917和rsl2980275（Sequencing公司）。

1.5 肝穿刺活組織檢查 所有患者治療前，采用Bard Magnum肝穿刺活組織檢查針切割法行肝穿刺活檢。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 22.00統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料以（±s）表示，采用 t檢驗，等級資料采用秩和檢驗，計數(shù)資料采用卡方檢驗，采用二分類Logistic回歸分析影響應(yīng)答的因素。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本情況 本研究未有1例失訪或退出者，共143例CHB患者接受治療，其中完全應(yīng)答58例（40.6%），其中，在治療24 w末，應(yīng)答52例（36.4%）；繼續(xù)給予Peg-IFNα-2a治療6個月后，2例（1.4%）患者出現(xiàn)完全應(yīng)答，再繼續(xù)治療12個月后，4例（2.8%）患者出現(xiàn)完全應(yīng)答。無應(yīng)答85例（59.4%）。

2.2 應(yīng)答與無應(yīng)答患者基線資料的比較 在治療結(jié)束時，應(yīng)答組患者基線血清ALT水平顯著高于無應(yīng)答組，血清HBV DNA載量顯著低于無應(yīng)答者（P＜0.05），應(yīng)答組HBV B型分布比例顯著高于無應(yīng)答組（P＜0.05，表 1）。

表1 應(yīng)答與無應(yīng)答患者基線資料（%±s）比較

表1 應(yīng)答與無應(yīng)答患者基線資料（%±s）比較

例數(shù) 男性 年齡（歲） ALT（IU/L） HBV DNA（lg IU/ml） HBV B型 HBV C型應(yīng)答 58 41（70.7） 29.7±6.3 383.8±176.5 6.8±1.5 35（60.3） 23（39.36）無應(yīng)答 85 60（70.6） 31.2±6.5 184.9±127.4 7.3±1.2 34（40.0） 51（60.00）x2/t值 ＜0.001 1.353 7.823 2.195 5.715 5.643 P值 0.990 0.178 0.001 0.030 0.017 0.016

2.3 IL28B基因分型多態(tài)性情況 在143例CHB患者中，IL28B基因位點多態(tài)性情況見表2。

2.4 應(yīng)答與無應(yīng)答CHB患者IL28B基因SNP位點分布比較 應(yīng)答組IL28B基因rsl2979860 CC基因型顯著高于 TT或 CT型（P＜0.05），rs8099917 TT基因型顯著高于 GT型（P＜0.05），rsl2980275 AA基因型顯著高于 AG型（P＜0.05，表 3）。

表2 143例CHB患者IL28B基因多態(tài)性分布情況（%）

表3 應(yīng)答與未應(yīng)答CHB患者IL28B基因SNP位點分布（%）比較

2.5 二分類Logistic多因素回歸分析影響應(yīng)答的因素情況 對血清ALT水平、HBV DNA載量、年齡、性別、病毒基因型和IL28B基因多態(tài)性等基本資料進行校正后，采用多因素二分類Logistic回歸分析影響應(yīng)答的因素，結(jié)果顯示IL28B基因rsl2979860位點與完全應(yīng)答存在顯著相關(guān)（P＜0.05），可作為Peg-IFNα治療CHB患者應(yīng)答的獨立預(yù)測指標(biāo)（表 4）。

表4 二分類Logistic多因素回歸分析影響應(yīng)答的因素

3 討論

既往研究[7-10]證實，性別、病毒基因型、血清ALT水平、HBV DNA水平均可能影響INF-α治療CHB患者應(yīng)答率。本研究結(jié)果表明應(yīng)答組病毒基因型、ALT水平、HBV DNA水平與無應(yīng)答組存在顯著性差異。近期國內(nèi)研究[11-14]發(fā)現(xiàn)，IL28B基因多態(tài)性與慢性丙型肝炎患者接受INF-α聯(lián)合利巴韋林治療后病毒學(xué)應(yīng)答密切相關(guān)。一項薈萃分析[15]還證實，IL28B基因編碼INF-λ3，可通過信號通路發(fā)揮抗病毒作用。

本研究結(jié)果表明，治療結(jié)束后病毒學(xué)應(yīng)答率在40.6%。國內(nèi)研究[16]結(jié)果也表明單獨使用IFNα治療的總有效率在30%～40%之間。同時，本研究結(jié)果也表明，rsl2980275主要基因型為AA型，rsl2979860主要基因型為CC型，rs8099917基因型為TT型。研究表明，rs1297 9860等位基因和rs8099917 SNP能預(yù)測抗病毒應(yīng)答[17]。在rs12979860 TT等位基因攜帶者和rs8099 917 TT基因型攜帶者，抗病毒治療后SVR為55%，而攜帶rs8099917 TG或GG基因型患者SVR則為40%。國內(nèi)對HBeAg陽性CHB患者的研究發(fā)現(xiàn)，攜帶野生純合基因型rsl2979860 CC位點和rsl2980275 AA位點患者血清HBeAg轉(zhuǎn)換率更高，提示血IL28B基因的3個位點rsl2979860、rs8099917和rsl2980275檢查很重要，且與IFNα治療后高病毒學(xué)應(yīng)答率密切相關(guān)。國外學(xué)者的研究也表明，IL28B基因多態(tài)性能夠有效預(yù)測IFNα的抗病毒治療效果，說明IL28B的rsl2979860位點可以作為臨床預(yù)測Peg-IFNα治療效果的獨立預(yù)測指標(biāo)。同時，本研究結(jié)果還表明，HBV基因型與IFNα的療效有關(guān)。國內(nèi)研究表明：IL28 B基因與PEG-IFNα/利巴韋林治療慢性HCV感染患者的病毒學(xué)應(yīng)答反應(yīng)具有密切相關(guān)，其中IL28 B基因rs8099 917和rs12979860基因多態(tài)位點可作為治療應(yīng)答的獨立預(yù)測因子?；蚨鄳B(tài)性甚至還可以解釋不同HCV基因型患者應(yīng)答率之間的差異。國外研究結(jié)果也表明，應(yīng)用IFNα治療后HBV A基因型患者HBeAg血清轉(zhuǎn)換率為47%，B型為44%，C型為28%，D型為25%，即HBV A、B基因型感染者應(yīng)用IFNα的治療效果優(yōu)于C、D型，提示HBV B基因型CHB患者接受Peg-IFNα治療的效果更佳。