邱良武 何建輝 保文莉 郭偉昌

(昆明醫(yī)科大學(xué) 1體育部，云南 昆明 650500；2公共衛(wèi)生學(xué)院)

硒是一種與人及其他哺乳動(dòng)物生理密切相關(guān)的微量元素，其主要功能是抗氧化、參與免疫反應(yīng)、抗腫瘤作用、防治克山病和大骨節(jié)病。硒對(duì)人體健康的影響體現(xiàn)在缺硒會(huì)引起異常反應(yīng)而高濃度硒又引起中毒，只有適宜劑量的硒對(duì)人體才具有營(yíng)養(yǎng)作用〔1〕。臟器質(zhì)量和臟器系數(shù)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的重要基礎(chǔ)數(shù)據(jù)〔2〕。血常規(guī)、血液生化指標(biāo)的測(cè)定是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化的重要內(nèi)容，也是病理學(xué)、生理學(xué)、藥物毒理學(xué)和醫(yī)學(xué)診斷等的常用指標(biāo)〔3,4〕。骨髓巨核細(xì)胞和有核細(xì)胞數(shù)量檢查是觀察骨髓造血功能的重要檢查項(xiàng)目之一。老年小鼠隨著生理功能下降，組織器官容易產(chǎn)生一些退行性病變。本文擬分析老年小鼠進(jìn)行有氧運(yùn)動(dòng)并補(bǔ)充適宜劑量的硒對(duì)臟器系數(shù)、血生化和骨髓涂片的影響，為運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練和營(yíng)養(yǎng)防治骨質(zhì)疏松提供借鑒。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料 昆明種雄性老年小鼠24只，4月齡，體重37～43 g，由昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。鼠料由昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。飲用水為自來水，硒來自美麗康保健品有限公司生產(chǎn)的澳天力牌富硒酵母片。

1.2有氧運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的確定 由預(yù)實(shí)驗(yàn)確定。在預(yù)實(shí)驗(yàn)中，小鼠在相近條件下平均游泳力竭時(shí)間為129 min，最短時(shí)間為94 min，因此將有氧運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度定為每次80 min。

1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和實(shí)驗(yàn)方案 全部小鼠進(jìn)行10 min適應(yīng)性游泳后，隨機(jī)分為有氧運(yùn)動(dòng)組(A組)、有氧運(yùn)動(dòng)+補(bǔ)硒組(B組)、對(duì)照組(C組)，各8只。各組在18～24℃的常溫下飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)。C組：自然環(huán)境喂養(yǎng)，不施加任何處理因素。B組和A組：在長(zhǎng)52 cm，寬37 cm，高22 cm的水箱里進(jìn)行有氧游泳運(yùn)動(dòng)，5次/w，每次80 min。實(shí)驗(yàn)水深18 cm，水溫22℃。B組在飲水中加入低劑量硒，濃度為2%。

1.4血液標(biāo)本的采集 實(shí)驗(yàn)8 w后，禁食12 h，眼眶采血1.0～1.5 ml，分別注入肝素鈉抗凝管和無抗凝管中，送昆明呈貢區(qū)人民醫(yī)院檢測(cè)。

1.5臟器采集及測(cè)定 采血后頸椎脫臼處死，稱重后解剖。分離出腦、心、肺、脾、左右腎、胸腺、頜下腺、左右睪丸、脂肪等主要器官組織，用吸水紙吸干表面水分，剔除臟器表面脂肪、筋膜后用電子天平精確稱重。

1.6取小鼠胸骨骨髓，制成涂片送檢 Wright-Giemsa復(fù)合染色，光鏡檢查，使用油鏡，放大1 000倍，進(jìn)行骨髓涂片分類計(jì)數(shù)。在油鏡下，每個(gè)標(biāo)本一共計(jì)數(shù)500個(gè)有核細(xì)胞，對(duì)每個(gè)細(xì)胞仔細(xì)觀察分類，然后計(jì)算出每組各種細(xì)胞所占的百分率。

1.7統(tǒng)計(jì)分析 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析及t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.13組主要臟器系數(shù)比較 A、B組脾臟系數(shù)、胸腺系數(shù)和腦系數(shù)與C組有顯著差異(P<0.05，P<0.01)。見表1。

表1 3組主要臟器系數(shù)比較

與C組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；下表同

2.23組血生化比較 與C組比較，A、B組總蛋白(TP)、白球比(A/G)、肌酸激酶(CK)和尿素氮(BUN)/肌酐(CREA)(B/C)、CREA、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU)、BUN、堿性磷酸酶(ALP)和鉀(K)有顯著差異(P<0.05，P<0.01)。見表2。

表2 3組血生化指標(biāo)比較

GLB.球蛋白；TBIL.總膽紅素；AST.谷草轉(zhuǎn)氨酶；ALT.谷丙轉(zhuǎn)氨酶；TC.總膽固醇；TG.三酰甘油

2.33組骨髓涂片統(tǒng)計(jì)結(jié)果 A、B組與C組粒系細(xì)胞、紅系細(xì)胞、粒紅比值、漿系細(xì)胞比例有顯著差異(P<0.05，P<0.01)。見表3。髓片總體特征：A組、B組、C組髓片有核細(xì)胞增生活躍。其中A組紅系細(xì)胞減少，B組和C組紅系細(xì)胞又有增加。各組淋巴系細(xì)胞及單核細(xì)胞比例也無明顯差別。成纖維細(xì)胞等非造血細(xì)胞無明顯改變，骨髓小粒造血細(xì)胞正常。

表3 3組骨髓涂片結(jié)果

3 討 論

脾和胸腺是重要的免疫器官，其中，胸腺屬于中樞免疫器官，產(chǎn)生的胸腺肽是一種蛋白質(zhì)和多肽激素，能刺激T淋巴細(xì)胞的成熟，平衡和調(diào)節(jié)免疫功能，是一種與機(jī)體的細(xì)胞免疫有密切關(guān)系的激素；脾臟只是接受免疫細(xì)胞的組織，屬于外周免疫器官，其免疫功能要小于胸腺。個(gè)體成熟后，胸腺逐漸萎縮，胸腺素分泌急劇減少或缺失，可以理解為由于胸腺逐漸萎縮，為提高免疫功能，進(jìn)而脾臟代償性增大，是免疫功能下降的現(xiàn)象。郭建軍等〔5〕發(fā)現(xiàn)硒營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)或長(zhǎng)期訓(xùn)練對(duì)小鼠脾細(xì)胞數(shù)有明顯影響，認(rèn)為硒營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)或長(zhǎng)期訓(xùn)練對(duì)小鼠免疫功能影響不是通過脾細(xì)胞數(shù)的變化，而是通過影響其功能實(shí)現(xiàn)的。本研究和郭建軍等〔5〕的研究不完全一樣，提示硒營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)結(jié)合有氧運(yùn)動(dòng)也通過脾細(xì)胞數(shù)的變化影響小鼠免疫功能。

有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)TP、ALB、A/G、CK、B/C、GLU、BUN和K等物質(zhì)產(chǎn)生影響，但通過補(bǔ)硒，其作用有進(jìn)一步加強(qiáng)。值得一提的是，ALP是骨形成標(biāo)志物，是在成骨細(xì)胞分化增殖階段產(chǎn)生分泌的一種酶，是最常用的評(píng)價(jià)骨形成和骨轉(zhuǎn)換的指標(biāo)〔6〕。日本厚生省針對(duì)學(xué)生近視和脊柱彎曲的狀況，明確規(guī)定中小學(xué)生配餐中必須有魔芋食品，魔芋也被聯(lián)合國(guó)衛(wèi)生組織確定為十大保健食品之一〔7〕，因魔芋富含微量元素硒。此外，運(yùn)動(dòng)鍛煉促進(jìn)骨密度增加已經(jīng)得到證實(shí)。骨髓巨核細(xì)胞和有核細(xì)胞數(shù)量檢查是觀察骨髓造血功能的重要檢查項(xiàng)目之一，補(bǔ)硒結(jié)合有氧運(yùn)動(dòng)可以通過提升ALP含量和骨髓造血功能來改善骨骼新陳代謝，提高骨密度，對(duì)預(yù)防老年骨質(zhì)疏松有一定的幫助。

不足之處是本研究沒有涉及單純補(bǔ)硒的作用，有可能有氧運(yùn)動(dòng)與補(bǔ)硒之間存在交互作用，即運(yùn)動(dòng)增加或減少硒的吸收，或者補(bǔ)硒增加或減少有氧運(yùn)動(dòng)的能力。