孫松明

摘 要：本實(shí)驗(yàn)對頭孢氨芐絡(luò)合回收工藝進(jìn)行研究。檢測方法：采用Ultimate LP-C18（250 mm×4.6 mm，5μm），0.02mol/L磷酸二氫鈉（用磷酸調(diào)pH值至3.0）-乙腈-甲醇（80∶10∶10），檢測波長為260nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。該工藝路線操作簡便，純度高，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。

關(guān)鍵詞：頭孢氨芐；回收；研究

頭孢氨芐（Cefalexin），其化學(xué)名為（6R，7R）-3-甲基-7-[（R）-2-苯乙酰氨基]-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4，2，0]辛-2-烯-2-甲酸一水化合物，能抑制細(xì)胞壁的合成，使細(xì)胞內(nèi)容物膨脹至破裂溶解，殺死細(xì)菌。頭孢氨芐為廣譜抗菌素類藥，主用于革蘭氏陽性菌和陰性菌感染，如：流行性感冒，出血性敗血癥、壞死桿菌病、慢性萎縮性喉炎、急性呼吸道感染、小兒化膿性腦膜炎、無神嗜睡、行走拐跛、耳部變藍(lán)等。本文對頭孢氨芐合成工藝進(jìn)行研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器：FA2004電子分析天平（上海衡平儀器儀表廠）；QT-EXP0智能自動(dòng)液相色譜分離層析儀（上海琪特分析儀器有限公司）；FT-IR 66OO傅里葉變換紅外光譜儀（蘇州TianRay儀器股份有限公司）；AB/5AB全自動(dòng)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)容器清洗機(jī)（上海邦安檢測工程有限公司）；F12-ED 標(biāo)準(zhǔn)型加熱制冷循環(huán)器（優(yōu)萊博技術(shù)（北京）有限公司）；watersZQ2000 atersZQ2000單四極桿質(zhì)譜儀（北京雷泰儀器有限公司）；HJ-6A型數(shù)顯恒溫多頭磁力攪拌器（上海左樂儀器有限公司）；ZDJ-2D多功能全自動(dòng)滴定儀（北京先驅(qū)威鋒技術(shù)開發(fā)公司）；DOA-P504-BN隔膜式真空泵（北京成萌偉業(yè)科技有限公司）；RE-85Z旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海五相儀器儀表有限公司）；PHS-25臺式酸度計(jì)（常州杰博森儀器有限公司）；BTT小型陣列式紫外可見分光光度計(jì)（必達(dá)泰克光電科技（上海）有限公司）；1810-C石英自動(dòng)三重純水蒸餾器（常州市金壇友聯(lián)儀器研究所）；Cascada IX 實(shí)驗(yàn)室超純水系統(tǒng)（頗爾過濾器（北京）有限公司）。

1.2 色譜柱：Ultimate LP-C18（250 mm×4.6 mm，5μm）。

1.3 試藥：乙醇（濟(jì)南云翔化工有限公司）、三乙胺（上海金錦樂實(shí)業(yè)有限公司）、磷酸二氫鈉（南通潤豐石油化工有限公司）、乙腈（南通潤豐石油化工有限公司）、甲醇（南通潤豐石油化工有限公司）、磷酸（南通潤豐石油化工有限公司）。

1.4 色譜條件

1.4.1 流動(dòng)相的選擇

根據(jù)參考文獻(xiàn)，分別考察0.02mol/L磷酸二氫鈉（用磷酸調(diào)pH值至3.0）-乙腈-甲醇（80∶10∶10）， 甲基叔丁基醚-異丙醇-二乙胺（60∶40∶0.1），0.02mol/L磷酸二氫鈉（用磷酸調(diào)pH值至3.0）-乙腈-甲醇（70∶20∶10）， 不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以0.02mol/L磷酸二氫鈉（用磷酸調(diào)pH值至3.0）-乙腈-甲醇（80∶10∶10）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.02mol/L磷酸二氫鈉（用磷酸調(diào)pH值至3.0）-乙腈-甲醇（80∶10∶10）為流動(dòng)相[1-5]。色譜柱為Ultimate LP-C18（250 mm×4.6 mm，5μm）；0.02mol/L磷酸二氫鈉（用磷酸調(diào)pH值至3.0）-乙腈-甲醇（80∶10∶10）為流動(dòng)相；檢測波長為260nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：30℃。理論板數(shù)按頭孢氨芐峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

將濃度為60μg·mL-1的對照品溶液分別稀釋為1、2、3、4、5、6倍，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。試驗(yàn)表明，頭孢氨芐在60～10μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2 方法

2.1 工藝設(shè)計(jì)

在磁力攪拌下向頭孢氨芐結(jié)晶母液加入絡(luò)合劑，分別考察溫度、PH值對反應(yīng)的影響。

2.2 頭孢氨芐的絡(luò)合溫度的優(yōu)化

分別采用15攝氏度、17攝氏度、19攝氏度、21攝氏度進(jìn)行試驗(yàn)。采用15攝氏度試驗(yàn)頭孢氨芐絡(luò)合率為90.2%，采用17攝氏度試驗(yàn)頭孢氨芐絡(luò)合率為91.6%，采用19攝氏度試驗(yàn)頭孢氨芐收率為96.2%，采用21攝氏度試驗(yàn)頭孢氨芐絡(luò)合率為95.3%，試驗(yàn)結(jié)果表明采用19攝氏度時(shí)頭孢氨芐絡(luò)合率最高，所以將試驗(yàn)溫度設(shè)為19攝氏度。

2.2 頭孢氨芐的絡(luò)合反應(yīng)PH值的優(yōu)化

在實(shí)驗(yàn)溫度為19攝氏度下，分別采用PH值為4.5、4.6、4.7、4.8進(jìn)行試驗(yàn)。采用PH值為4.5進(jìn)行試驗(yàn)頭孢氨芐絡(luò)合率為91.2%，采用PH值為4.6進(jìn)行頭孢氨芐絡(luò)合率為95.9%，采用PH值為4.7進(jìn)行試驗(yàn)頭孢氨芐絡(luò)合率為96.3%，采用PH值為4.8進(jìn)行試驗(yàn)頭孢氨芐絡(luò)合率為93.5%。試驗(yàn)結(jié)果表明PH值為4.7時(shí)頭孢氨芐絡(luò)合率最高。

3 結(jié)果與討論

本實(shí)驗(yàn)對頭孢氨芐絡(luò)合回收工藝進(jìn)行優(yōu)化，得到高純度產(chǎn)品，提高了產(chǎn)品的回收率。

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