胡靜 焦鳳超 黃文植 何書海

孔雀自然感染組織滴蟲病例的病理學診斷與防治

胡靜 焦鳳超 黃文植 何書海*

（信陽農(nóng)林學院牧醫(yī)工程學院 河南 信陽 464000）

信陽雙井鄉(xiāng)某孔雀養(yǎng)殖廠出現(xiàn)孔雀精神萎靡，頭部發(fā)紺，排黃色帶血稀糞現(xiàn)象，通過病史調(diào)查，眼觀病變和病理組織學觀察方法，對發(fā)病孔雀進行病理學診斷。病死孔雀尸體剖檢可見肝臟有大小不等淡黃色壞死灶，盲腸腫大出血，內(nèi)有干酪樣內(nèi)容物；對病死孔雀肝臟和盲腸使用石蠟包埋法制作病理切片，H.E染色后在顯微鏡下觀察，顯示肝臟和盲腸中有大量炎性細胞和嗜伊紅性組織滴蟲浸潤。

組織滴蟲病是一種禽類急性寄生蟲病，主要侵害肝臟和盲腸，故又稱盲腸肝炎病，目前發(fā)現(xiàn)多種禽類均可感染本病[1]。隨著孔雀養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，其已經(jīng)成為威脅孔雀養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的主要寄生蟲病之一[2]。2019年5月，信陽雙井鄉(xiāng)某孔雀養(yǎng)殖場飼養(yǎng)的孔雀陸續(xù)發(fā)病死亡，根據(jù)病史調(diào)查、臨床癥狀和病理組織學診斷結(jié)果，確診為孔雀組織滴蟲感染，本文對該起孔雀組織滴蟲病自然感染病例的發(fā)病情況、診斷及防治分析如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病料來源 信陽市平橋區(qū)雙井鄉(xiāng)某孔雀養(yǎng)殖場2月齡病死孔雀。

1.1.2 儀器和設(shè)備 石蠟切片機(型號為KD1508 A，購自浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司)、熔蠟恒溫培養(yǎng)箱(購自重慶萬達儀器有限公司)、攤片烤片烘片機(型號為PPTHK-21B，購自襄樊徠克生物電子儀器廠)、試劑與切片制作儀器等實驗器材為實驗室自備。

1.2 方法

對病死孔雀進行尸體剖檢觀察病理變化，選取眼觀病變明顯的肝臟和盲腸，切取大小為1.7cm×0.9cm×0.2cm的組織塊并立即放入濃度為10%的甲醛生理鹽水液中固定；組織塊固定完成后，裝入包埋盒中，使用流水沖洗數(shù)小時；將沖洗好的裝有組織塊的包埋盒依次放入濃度為70%、85%、95%I、95%II的酒精溶液中各浸泡2h左右后取出，再依次放入無水乙醇I，無水乙醇II中各浸泡1h左右，之后將組織取出依次置于二甲苯I、二甲苯II中進行透明并觀察組織的透明情況；將透明完全的肝臟和盲腸組織塊依次放入熔點為52~54℃、56~58℃融化的石蠟中，其中肝臟的浸蠟時間為軟蠟3h，硬蠟2h，盲腸的浸蠟時間為軟蠟3h，硬蠟1h，將浸蠟后的組織置于溫度與組織塊本身溫度相同的融化石蠟中，待石蠟?zāi)毯?，即完成包埋；將制作好的蠟塊固定于切片機上，切出厚度為3μm的切片，干燥脫蠟復(fù)水后即可使用蘇木素伊紅染色，再使用酒精和二甲苯使切片透明，最后使用中性樹膠進行封固，蓋上蓋玻片完成切片制作。

2 結(jié)果

2.1 病史及癥狀

該養(yǎng)殖場飼養(yǎng)約60只孔雀，自2017年起，連續(xù)兩年均有孔雀發(fā)生組織滴蟲病，2019年5月3日飼養(yǎng)員發(fā)現(xiàn)部分孔雀精神沉郁，采食不佳，個別孔雀排黃色帶血糞便，使用抗球蟲藥物和抗生素治療效果不佳，4d后大部分孔雀都有下痢癥狀，10只孔雀飲食斷絕，頭部發(fā)紺，臥地不起，排黃綠色帶血糞便，5只2月齡孔雀死亡，當天飼養(yǎng)員將死亡孔雀送檢。

2.2 眼觀病變

眼觀可見盲腸腫大增粗有出血現(xiàn)象，盲腸黏膜水腫，腸壁增厚較為明顯，內(nèi)有固體內(nèi)容物，形似香腸，剪開可見大量栓塞物，呈干酪樣；肝臟腫大質(zhì)脆，表面布滿大小不一、分布不均勻的圓形潰瘍灶中央凹陷，邊緣隆起，其他組織未見明顯異常。

2.3 病理組織學觀察

（1）肝臟肝臟固有結(jié)構(gòu)破壞，可見壞死灶，外周區(qū)域的肝索排列紊亂，肝組織可見大量肝細胞變性、壞死，其間有大量圓形或橢圓形的嗜伊紅性組織滴蟲和炎性細胞浸潤。（2）盲腸盲腸黏膜漿膜肌層出血，固有層充血和出血，黏膜上皮細胞變性壞死脫落，表面出現(xiàn)多種細胞混合的團塊。黏膜固有層可見大量大小不一的圓形或橢圓形淡紅色的組織滴蟲蟲體，并有大量炎性細胞浸潤。

3 討論

（1）通過本次病例的病理組織學觀察中發(fā)現(xiàn)，組織滴蟲病主要損害孔雀的肝臟和盲腸，觀察到肝臟和盲腸中有大量圓形的紅染的組織滴蟲蟲體。組織滴蟲經(jīng)孔雀口進入體內(nèi)后，首先經(jīng)消化道侵入盲腸黏膜，導致黏膜上皮細胞壞死脫落，隨著炎癥向腸壁深層發(fā)展，導致漿膜肌層充血和出血，使盲腸整體受到損傷[3]。寄生于盲腸壁的組織滴蟲可通過毛細血管，隨門靜脈流入肝臟，使肝細胞變性壞死而引起炎癥，嚴重時損傷心肌纖維導致心力衰竭，出現(xiàn)血液循環(huán)障礙，引起臨床上表現(xiàn)的黑頭病[4]。（2）根據(jù)臨床癥狀，肝臟和盲腸的典型病變，病理學檢查的綜合診斷和實驗室蟲體檢查即可確診該病。需要注意的是，該病和球蟲感染癥狀相似，甚至有混合感染的現(xiàn)象，因此在診斷時需要考慮球蟲感染的可能。隨著科學技術(shù)的發(fā)展，組織滴蟲的診斷水平也得到了提高，免疫學及生物學診斷方法如PCR技術(shù)逐漸被應(yīng)用到診斷中，診斷速度和準確性得到很大的提升，具有廣闊的應(yīng)用前景[5]。（3）孔雀感染組織滴蟲主要是通過采食帶有組織滴蟲的蚯蚓或異刺線蟲，引起感染發(fā)病[6]。本次病例中的孔雀散養(yǎng)在一片開闊的樹林中，可能會接觸到帶蟲的蚯蚓或異刺線蟲，飼養(yǎng)員流動性大，缺乏飼養(yǎng)管理規(guī)章制度，飼料主要是小米和玉米，營養(yǎng)不全缺乏維生素，綜合以上因素可以判定這是該養(yǎng)殖場連續(xù)3年暴發(fā)組織滴蟲病的原因。因此建議將病情嚴重的孔雀宰殺淘汰進行無害化處理，治療前將孔雀分群，飲水中加入多維電解質(zhì)，發(fā)病孔雀飼料里按250mg/kg混入甲硝唑飼喂，未發(fā)病孔雀使用阿苯達唑驅(qū)蟲。使用該方法治療一周后停藥一周，再治療5d，該場病情得到控制，本次治療結(jié)束后建議養(yǎng)殖戶專門開辟一片場地徹底清掃消毒后再飼養(yǎng)孔雀。除此之外，建議養(yǎng)殖戶制定標準化飼養(yǎng)管理制度，包括合理的驅(qū)蟲計劃，維護環(huán)境衛(wèi)生工作，定期清洗消毒孔雀用具，及時處理糞便防止蚯蚓和異刺線蟲污染飼料，飼喂全價飼料等措施，只有做好日常飼養(yǎng)管理才是預(yù)防疾病發(fā)生的有效手段。

[1] 彭高輝, 翁亞彪, 朱興全. 禽組織滴蟲病概述[J]. 中國家禽, 2009, 31(12): 42-45.

[2] 鄭明學, 霍乃蕊, 董耀豐. 藍孔雀組織滴蟲病的病理學觀察[J]. 中國家禽, 1997(7): 38-39.

[3] 張媛, 王丹, 葛晨霞等. 孔雀組織滴蟲病的病理學診斷[J]. 中國獸醫(yī)雜志, 2011, 47(8): 49-50.

[4] 李普霖, 王水琴, 邱震東等. 動物病理學[M]. 長春: 吉林科學技術(shù)出版社, 1994: 879-881.

[5] 陸慧君, 賀文琦, 姜寧等. 孔雀組織滴蟲病自然感染病例的病理學觀察[J]. 中國畜牧獸醫(yī), 2010, 37(5): 186-187.

[6] 楊志偉, 潘玲, 劉紅梅等. 禽盲腸肝炎臨床診斷及病理組織學觀察[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2016(6): 102-104, 278-279.

河南省科技攻關(guān)項目（182102110313）

（2019–08–22）

S858.39

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1007-1733(2019)11-0034-02