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        規(guī)模場豬偽狂犬病的診斷與防控措施

        2019-02-12 13:40:15冉紅志張勇俊趙仙苗張朝鵬
        獸醫(yī)導(dǎo)刊 2019年10期
        關(guān)鍵詞:狂犬病毒狂犬病活疫苗

        冉紅志 張勇俊 趙仙苗 張朝鵬

        (1.陜西省動物疫病預(yù)防控制中心,陜西西安 710000;2.西安邦騰農(nóng)牧公司,陜西西安 710000)

        1 病原學(xué)

        PRV屬于皰疹病毒科(Herpesviridae)、豬皰疹病毒屬,病毒粒子為圓形,直徑150~180 nm之間,囊膜表面有長約8~10 nm呈放射狀排列的纖突。

        PRV只有一種血清型,但不同毒株在毒力和生物學(xué)特性等方面存在差異,基因組為線狀雙鏈DNA,平均胞嘧啶與鳥嘌呤含量高達74%,具有典型的皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)特征,由長獨特區(qū)(Unique long region,UL)、短獨特區(qū)(Unique short region,US)以及位于US兩側(cè)的末端重復(fù)序列(Terminal repeat,TR)和內(nèi)部重復(fù)序列(Internal repeat,IR)組成[1]。

        PRV基因組序列測定發(fā)現(xiàn)由72個閱讀框組成,可編碼70種蛋白,目前已發(fā)現(xiàn)和命名的有g(shù)B、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM、gN11種。這些糖蛋白都是病毒粒子的結(jié)構(gòu)成分(除gG糖蛋白外)。其中g(shù)D與細(xì)胞受體結(jié)合后,使結(jié)合狀態(tài)從可逆狀態(tài)進入不可逆狀態(tài),為PRV侵入細(xì)胞發(fā)生感染所必需。編碼gB、gE、gH、gI、gL和gM、gC糖蛋白促使病毒快速粘附于細(xì)胞表面,gB是主要病毒抗原,在PRV進入中起關(guān)鍵作用。gG基因是偽狂犬病毒的非必需基因,它的缺失與插入對病毒在體內(nèi)增值無影響。糖蛋白gB、gC、gD在免疫誘導(dǎo)方面最為重要。偽狂犬病病毒的毒力是由幾種基因協(xié)同調(diào)控,其中TK是PRV最主要的毒力基因[2]。

        2 診斷

        2.1 臨床癥狀

        豬偽狂犬病的臨診表現(xiàn)主要取決于感染病毒的毒力和感染量,以及感染豬的年齡。其中,感染豬的年齡是最主要的。與其他動物的皰疹病毒一樣,幼齡豬感染偽狂犬病病毒后病情最重。

        新生仔豬感染偽狂犬病病毒會引起大量死亡,臨診上新生仔豬第1天表現(xiàn)正常,從第2天開始發(fā)病,3~5 d內(nèi)是死亡高峰期,有的整窩死光。同時,發(fā)病仔豬表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)癥狀、昏睡、嗚叫、嘔吐、拉稀,一旦發(fā)病,1~2 d內(nèi)死亡。剖檢主要是腎臟布滿針尖樣出血點,有時見到肺水腫、腦膜表面充血、出血。15日齡以內(nèi)的仔豬感染本病者,病情極嚴(yán)重,發(fā)病死亡率可達100%。仔豬突然發(fā)病,體溫上升達41℃以上,精神極度委頓,發(fā)抖,運動不協(xié)調(diào),痙攣,嘔吐,腹瀉,極少康復(fù)。斷奶仔豬感染偽狂犬病病毒,發(fā)病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、拉稀、嘔吐等。成年豬一般為隱性感染,若有癥狀也很輕微,易于恢復(fù)。主要表現(xiàn)為發(fā)熱、精神沉郁,有些病豬嘔吐、咳嗽,一般于4~8 d內(nèi)完全恢復(fù)。懷孕母豬可發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎兒或死胎,其中以死胎為主無論是頭胎母豬還是經(jīng)產(chǎn)母豬都發(fā)病,而且沒有嚴(yán)格的季節(jié)性,但以寒冷季節(jié)即冬末春初多發(fā)[3]。

        豬偽狂犬病的另一發(fā)病特點是表現(xiàn)為種豬不育癥。近幾年發(fā)現(xiàn)有的豬場春季暴發(fā)偽狂犬病,出現(xiàn)死胎或斷奶仔豬患偽狂犬病后,緊接著下半年母豬配不上種,返情率高達90%,有反復(fù)配種數(shù)次都屢配不上的。此外,公豬感染偽狂犬病病毒后,表現(xiàn)出睪丸腫脹、萎縮,喪失種用能力。

        2.2 流行病學(xué)

        豬偽狂犬病是指不同階段豬受到偽狂犬病毒的侵入,造成自身免疫力低下,表現(xiàn)出不同癥狀的一種具有傳染性的疾病。豬偽狂犬病主要是通過直接和間接兩種接觸方式進行傳播,且此疾病的病癥最為明顯,傳染率最高。通常情況下,偽狂犬病毒通過鼻液、飛沫、分泌物等多種途徑排出體外,然而病豬的病毒傳播可依靠鼻部接觸、飲水等途徑,這些方式的接觸均導(dǎo)致偽狂犬病毒散播在豬場內(nèi)的各個不同豬群中。當(dāng)偽狂犬病毒侵入公豬身體后,偽狂犬病毒在精液中一般可存活12d之久。當(dāng)豬場人員采用此精液對母豬進行人工授精,極易導(dǎo)致母豬感染病毒,最終出現(xiàn)妊娠不成功。豬場工作人員可以采用血清學(xué)檢測方法對豬場內(nèi)的豬群進行檢查,繼而篩選出患有偽狂犬病毒的陽性豬。引起豬群免疫力低下的主要原因是由于豬場內(nèi)沒有合理、安全的免疫程序。其中較為常見的是由于豬場內(nèi)工作人員未掌握母源抗體的消失時間規(guī)律,從而對仔豬的免疫時間無法進行確定,所以當(dāng)仔豬體內(nèi)來自母豬的抗體在高滴度時,通常對仔豬進行肌肉注射,繼而達到接種的目的,然而母源抗體將影響仔豬的免疫效果[4]。豬偽狂犬病傳播的速度較快,且陽性率可達100%。當(dāng)整個豬場內(nèi)個別豬群發(fā)現(xiàn)陽性野毒抗體,同時伴有咳嗽時,在以后的2~3周內(nèi)整個豬場都有可能被病毒感染。

        2.3 病理變化

        豬偽狂犬病病毒株感染豬群后,哺乳仔豬、保育豬、生長育肥豬都有非常典型的豬偽狂犬病的病變。主要表現(xiàn)為扁桃體水腫、化膿、出血、潰瘍甚至形成偽膜,肝臟、脾臟形成非常典型的黃白色壞死點或白色壞死結(jié)節(jié)病變,肺臟彌漫性點狀出血,腸道出血,腎出血,腦出血、水腫等特別典型的病理變化。尤其以臨床上發(fā)現(xiàn)哺乳仔豬發(fā)生病毒性心肌炎為主要特征,心肌呈白色條紋狀壞死[5]。

        2.4 實驗室診斷

        2.4.1 分子生物學(xué)診斷

        分子生物學(xué)診斷主要包括核酸雜交(DNA探針技術(shù))、普通PCR診斷和實時熒光定量PCR監(jiān)測等。其中,DNA探針技術(shù)利用DNA探針敏感性高和特異性強的特性,可以活體直接檢測,而且快捷簡便;普通PCR診斷樣本用量少、檢測速度快,一般5 h就可以檢測出結(jié)果。實時熒光定量PCR檢測更加敏感,特異性相對其他方法更強,可以對潛伏期或者亞臨床感染疾病進行有效的診斷[6]。

        2.4.2 血清學(xué)診斷

        血清學(xué)診斷多種血清學(xué)方法可用于偽狂犬病的診斷,目前常使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、微量血清中和試驗(MSN)、間接免疫熒光試驗(IFA)和乳膠凝集試驗(LA)等進行診斷[7]。其中血清中和試驗的特異性、敏感性都是最好的,并且被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為法定的診斷方法。但由于中和試驗的技術(shù)條件要求高、時間長,所以主要是用于實驗室研究。酶聯(lián)免疫吸附試驗同樣具有特異性強、敏感性高的特點,3~4 h內(nèi)可得出試驗結(jié)果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。另外,近幾年來,乳膠凝集試驗以其獨特的優(yōu)點也在臨診上廣泛應(yīng)用,操作極其簡便,幾分鐘之內(nèi)便可得出試驗結(jié)果。

        2.5 鑒別診斷

        豬偽狂犬病同流行性乙型腦炎、豬圓環(huán)病毒病和豬流感等病的癥狀類似,臨床上需進行鑒別診斷。

        (1)對于出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病例,有木乃伊胎則考慮偽狂犬病;弱胎、死胎的頭蓋骨肥厚者考慮流行性乙型腦炎;對死胎剖檢,前驅(qū)皮下水腫、腦膜出血、腦蓋骨出血則懷疑為偽狂犬病,后驅(qū)皮下水腫、腦組織出血、溝回間出血則懷疑為流行性乙型腦炎。

        (2)豬感染偽狂犬病毒后,其吻突通常有綠豆大小的瘀血斑點,呈紫黑色;病死豬剖檢,腹股溝淋巴結(jié)不腫大,表面呈淺紅色或灰色,且腎臟有針尖狀出血點;而圓環(huán)病毒病例的吻突部顏色深諳,觸診發(fā)涼;軀體皮膚或四肢下部有吉痘樣潰點;病死豬剖檢,腹股溝淋巴結(jié)明顯腫大,表面呈白色,且腎臟出現(xiàn)邊沿整齊、綠豆大小的白色壞死灶。

        (3)豬流感通常與氣候突變有密切關(guān)系,不同年齡的豬均可感染發(fā)病,且一般無神經(jīng)癥狀,采用退熱藥和抗生素類藥可治愈[8]。

        3 防控措施

        豬偽狂犬病尚無有效藥物治療,應(yīng)以預(yù)防為主。遵守科學(xué)引種制度,發(fā)病果斷隔離或淘汰,制定科學(xué)合理的免疫程序,建立嚴(yán)格的生物安全體系,采取科學(xué)的飼養(yǎng)管理措施,減少各種應(yīng)激因素,逐步凈化豬場。

        3.1 科學(xué)引種制度

        由于該病一經(jīng)感染可潛伏感染,存在隱性帶毒豬,因此,規(guī)模豬場應(yīng)實行自繁自養(yǎng),培育屬于自己豬場的健康種群,若無特殊情況不要從外面引種(精液),嚴(yán)禁從疫區(qū)引入。引進種豬、后備豬時,需隔離飼養(yǎng)45 d,期間采血送實驗室檢測,并做好配種前的疫苗免疫及驅(qū)蟲工作,血清學(xué)檢測確認(rèn)為健康豬只,方可混群飼養(yǎng)。

        3.2 果斷隔離或淘汰

        一旦發(fā)病立即采取隔離措施,檢測確診后,全場緊急免疫,條件允許時,淘汰全部陽性豬。對一切有可能被污染的場所和設(shè)施、設(shè)備均進行徹底消毒。隔離舍由專業(yè)人員飼養(yǎng),隔離期間禁止外來車輛及人員隨意走動。

        3.3 免疫接種

        (1)后備豬應(yīng)在配種前實施至少2次偽狂犬疫苗的免疫接種,使用基因缺失弱毒活疫苗。

        (2)經(jīng)產(chǎn)母豬應(yīng)根據(jù)本場感染程度,每年全群普免3~4次,使用滅活苗或基因缺失弱毒活疫苗均可,2次免疫中至少有1次使用基因缺失弱毒苗,陽性率高的豬場,第一次使用基因缺失弱毒活疫苗,第二次使用滅活苗較為穩(wěn)妥。

        (3)哺乳仔豬免疫根據(jù)本場豬群感染情況而定。本場未發(fā)生過或周圍也未發(fā)生過偽狂犬疫情的豬群,可在35 d以后免疫1頭份滅活苗;若本場或周圍發(fā)生過疫情的豬群應(yīng)在3日齡內(nèi)使用弱毒活疫苗滴鼻免疫,55~65日齡接種弱毒活疫苗1頭份,3周后弱毒活疫苗加強免疫1次。

        (4)疫區(qū)或疫情嚴(yán)重的豬場:3日齡內(nèi)使用弱毒活疫苗滴鼻免疫,55-65日齡接種滅活疫苗1頭份,3周后弱毒活疫苗加強免疫1次。

        3.4 生物安全措施

        豬場要科學(xué)選址,其內(nèi)部各區(qū)間的距離適當(dāng),相互獨立,防止交叉感染,各飼養(yǎng)管理人員禁止串舍,并做好人員、車輛、豬群、用具以及各種器械的日常消毒工作。消滅豬場中的鼠類,嚴(yán)格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進入豬場,嚴(yán)格控制人員來往,并做好消毒工作及血清學(xué)監(jiān)測等,這樣對本病的防制也可起到積極的推動作用。

        3.5 飼養(yǎng)管理措施

        全進全出,分階段分日齡飼養(yǎng),根據(jù)不同階段的豬只營養(yǎng)需求給予新鮮的飼料供給。保證飲水的清潔和充足。做好圈舍衛(wèi)生、通風(fēng)、夏天降溫和冬天保溫等工作,讓豬只處于舒適的環(huán)境,減少豬群應(yīng)激。在豬只轉(zhuǎn)群、疫苗免疫前添加維生素及黃芪多糖等,提高主動免疫力,及被動免疫應(yīng)答能力。

        3.6 凈化技術(shù)要點

        (1)引進陰性后備豬,做好配種前疫苗免疫工作。

        (2)定期監(jiān)測豬群抗體情況,制定合理免疫程序。

        (3)做好生物安全措施,切斷傳播途徑。

        (4)杜絕犬、貓、雞及其他鳥類進入豬場,定期進行場內(nèi)滅鼠、滅蠅工作。

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