朱立娜 唐源 黃初軍

[摘要]目的 探討白介素-17（IL-17）、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在慢加急性肝衰竭（ACLF）患者中的作用。方法 選取2015年1月～2018年6月在本院住院治療的59例肝損傷患者作為對照組，59例ACLF患者作為觀察組。ACLF患者根據(jù)疾病分期進一步分為早期組（20例）、中期組（20例）、晚期組（19例）3組。采用流式細(xì)胞儀方法檢測所有患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α的濃度并進行比較。結(jié)果 觀察組血清IL-17、IL-6及TNF-α的濃度高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。ACLF不同分期患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;其中，晚期組的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度高于中期組及早期組，中期組血清IL-17、IL-6及TNF-α的濃度高于早期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 IL-17、IL-6、TNF-α參與ACLF的發(fā)生與發(fā)展過程，是促進ACLF肝功能惡化的因素，并且其濃度高低與ACLF的分期相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]肝衰竭;白介素-17;白介素-6;腫瘤壞死因子-α

[中圖分類號] R575.3 ? ? ? ? ?[文獻標(biāo)識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1674-4721（2019）12（c）-0044-03

[Abstract] Objective To investigate the effects of interleukin-17 （IL-17）， IL-6 and tumor necrosis factor-α （TNF-α） in patients with with acute on chronic liver failure （ACLF）. Methods A total of 59 patients with liver injury hospitalized in our hospital from January 2015 to June 2018 were selected as control group and 59 patients with ACLF as observation group. ACLF patients were further divided into early group （20 cases）， middle group （20 cases） and late group （19 cases） according to disease stages. The concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in all patients were detected by flow cytometry and compared. Results The concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in the observation group were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in ACLF patients with different stages were different between groups （P<0.05）. Among them， the concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in the late group were higher than those in the middle group and the early group， and the concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in the middle group were higher than those in the early group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion IL-17， IL-6 and TNF-α participate in the occurrence and development of ACLF， which is a factor to promote the deterioration of ACLF liver function， and their concentrations are related to the stages of ACLF.

[Key words] Liver failure; Interleukin-17; Interleukin-6; Tumor necrosis factor-α

慢加急性肝衰竭（ACLF）是慢性肝病基礎(chǔ)上發(fā)生的、短期內(nèi)肝功能的急劇惡化，它是我國肝病的最常見死亡原因之一[1]。它是多因素作用的結(jié)果，主要有兩個方面[2]：一是原發(fā)性損傷，包括免疫病理反應(yīng)和近期加速肝功能惡化的因素;二是繼發(fā)性損傷，即細(xì)胞因子等炎癥介質(zhì)對肝臟的連鎖損傷效應(yīng)。原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷疊加，導(dǎo)致大量肝細(xì)胞壞死，進而肝功能發(fā)生衰竭。促炎性細(xì)胞因子在肝功能惡化的加速期起到很關(guān)鍵的作用，既往研究顯示促炎性細(xì)胞因子的濃度與肝損傷成正相關(guān)[3]，但白介素-17（IL-17）在ACLF中的作用研究較少。而白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）已證實參與肝損傷的發(fā)生、發(fā)展，是促炎性細(xì)胞因子。本研究對ACLF患者的IL-17、IL-6，TNF-α進行檢測分析，進一步探討IL-17、IL-6、TNF-α在ACLF的作用，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2015年1月～2018年6月在本院住院治療的59例肝損傷患者作為對照組，59例ACLF患者作為觀察組。觀察組中，年齡34～69歲，平均（52.47±10.24）歲;男29例，女30例。對照組中，年齡39～73歲，平均（49.81±9.24）歲;男27例，女32例。兩組的年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。其中觀察組患者根據(jù)疾病分期進一步分為早、中、晚期組。早期組（20例），男12例，女8例;年齡（49.91±12.87）歲。中期組（20例），男11例，女9例;年齡（42.02±10.42）歲。晚期組（19例），男10例，女9例;年齡（45.63±11.52）歲。三組患者的年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者診斷符合《肝衰竭診治指南（2012年版）》[1]、《慢性乙型肝炎防治指南（2015版）》[4]的診斷與分期標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴惡性腫瘤者;合并其他嚴(yán)重的全身性疾病和精神病患者。所有入選患者均簽署知情同意書，且本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2方法

所有患者于入院后抽取空腹靜脈血標(biāo)本，經(jīng)3000 r/min離心10 min，后取血清于-80℃超低溫冰箱內(nèi)保存待檢。采用流式細(xì)胞儀方法檢測患者血清IL-17、IL-6，TNF-α的濃度，所有流程按照說明書進行。

1.3觀察指標(biāo)

比較觀察組與對照組及ACLF早、中、晚期組患者血清IL-17、IL-6，TNF-α的濃度。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用F檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1觀察組與對照組患者血清IL-17、IL-6、TNF-α水平的比較

觀察組患者血清IL-17、IL-6及TNF-α的濃度均高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2 ACLF不同分期患者血清IL-17、 IL-6、TNF-α水平的比較

ACLF不同分期患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;晚期組的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度高于中期組及早期組，中期組的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度高于早期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

ACLF是我國主要的肝衰竭類型[1]，ACLF發(fā)病仍主要由感染HBV引起，其發(fā)病機制十分復(fù)雜，尚未完全明確[5]。有研究表明肝衰竭發(fā)生發(fā)展過程中有大量的免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子的參與[6]。以往研究發(fā)現(xiàn)，其對肝臟的損傷主要觀點為“三重打擊”學(xué)說[7-8]，即免疫損傷、缺血缺氧和內(nèi)毒素血癥。而細(xì)胞因子風(fēng)暴在肝衰竭發(fā)生發(fā)展過程中起到至關(guān)重要的作用，不僅參與肝衰竭的免疫損傷過程，還參與缺血缺氧損傷及內(nèi)毒素血癥對肝細(xì)胞的打擊過程，且與肝衰竭發(fā)展過程中肝細(xì)胞壞死和預(yù)后密切相關(guān)[9]。研究認(rèn)為原發(fā)性肝損傷發(fā)生后出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥，激活肝臟Kupffer細(xì)胞釋放大量細(xì)胞因子（如：TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17等）[10-12]，這些細(xì)胞因子在介導(dǎo)肝臟損傷的同時又進一步引起大量非特異性炎性細(xì)胞聚集于肝臟，從而對肝臟造成嚴(yán)重的二次損傷，同時出現(xiàn)了微循環(huán)障礙，即肝臟的缺血缺氧性損傷，最終導(dǎo)致肝衰竭。羅光成等[13]在ACLF患者中發(fā)現(xiàn)其IL-6、IL-8、TNF-α濃度明顯增加，與患者的預(yù)后成負(fù)相關(guān)。這些細(xì)胞因子按功能可分為促炎細(xì)胞因子（IL-2、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ等）、抗炎細(xì)胞因子（IL-4、IL-10等）[14]。

近年來研究新發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞是一類輔助性CD+4T細(xì)胞亞群，它受轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和IL-23誘導(dǎo)分化，分泌IL-17[15-16]。IL-17A被認(rèn)為是Th17細(xì)胞分泌的最具代表性的細(xì)胞因子。IL-17作為重要的炎癥介質(zhì)，主要通過刺激靶細(xì)胞釋放前炎癥細(xì)胞因子，誘導(dǎo)分化細(xì)胞因子IL-6、TNF等，促進炎癥反應(yīng)，IL-17在急性肝損傷中起促進作用[7]，有研究發(fā)現(xiàn)肝臟炎癥反應(yīng)與IL-17成正相關(guān)[17-18]，IL-6和TNF-α兩者均是強效促炎細(xì)胞因子，肝細(xì)胞壞死程度與IL-6、TNF-α密切相關(guān)，IL-6、TNF-α的高表達，反應(yīng)了肝衰竭嚴(yán)重程度和預(yù)后不良[3]。本研究結(jié)果顯示，觀察組IL-17、IL-6、TNF-α水平高于對照組（P<0.05），提示IL-17的作用與IL-6、TNF-α相似，均屬于促炎性細(xì)胞因子，且IL-17、IL-6、TNF-α是ACLF發(fā)生、發(fā)展的促進因素。本研究結(jié)果還顯示，在ACLF患者中，不同分期間存在統(tǒng)計學(xué)差異，晚期組的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度高于中期組及早期組，中期組的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度高于早期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），提示IL-17、IL-6、TNF-α促炎性細(xì)胞因子與ACLF的病情程度密切相關(guān)。

綜上所述，IL-17、IL-6、TNF-α參與ACLF的發(fā)生與發(fā)展過程，是促進ACLF肝功能惡化的因素，其濃度與ACLF的分期相關(guān)，該結(jié)果與以往研究結(jié)果一致[19]。因此，臨床上清除ACLF患者的炎性細(xì)胞因子IL-17、IL-6、TNF-α，對肝細(xì)胞功能恢復(fù)、病情緩解有很大幫助?？蛇M一步觀察IL-17、IL-6、TNF-α對ACLF患者預(yù)后的影響，為ACLF提供更多的治療方法。

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（收稿日期：2019-06-13 ? 本文編輯：李二云）