楊賀淇

（江西省南昌市南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院瑪麗女王學(xué)院175班，江西 南昌 330031）

近年來人們健康意識逐漸提升，再加之社會老齡化進(jìn)程逐漸加劇，環(huán)境污染日益嚴(yán)重，導(dǎo)致惡性腫瘤檢出率逐年提升。宮頸癌為婦科第二大惡性腫瘤，資料稱[1]發(fā)展中國家婦產(chǎn)科惡性腫瘤中宮頸癌占比為20%～30%，每年因?qū)m頸癌死亡者占5%者，對女性身心健康及生命安全存在嚴(yán)重威脅。研究稱[2]在宮頸癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)p97蛋白陽性表達(dá)提升，腫瘤領(lǐng)域已經(jīng)將p97作為治療新靶點，含纈氨酸蛋白p97密切關(guān)聯(lián)于多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、預(yù)后及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等情況。此外，p97在諸多疾病的生理病理過程中也發(fā)揮參與作用，作用機(jī)制為將細(xì)胞內(nèi)異常蛋白質(zhì)清除后對蛋白質(zhì)質(zhì)量予以控制，將正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞存活有效維持，故而在婦科惡性腫瘤中p97抑制劑有獨特優(yōu)勢。現(xiàn)詳述含纈氨酸蛋白p97與宮頸癌的相關(guān)性。

1 含纈氨酸蛋白p97的概念與功能

1.1 p97的概念

P97蛋白概念首次被Moir等外國學(xué)者提出，該學(xué)者描述p97蛋白酵母變異株，并提出該變異株失活后G2-M為其細(xì)胞周期停止階段，同源蛋白也存在于哺乳動物體內(nèi)，因97kDA為其分子量，故而被命名為含纈氨酸蛋白p97。在秀麗隱桿線蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)CDC-48.2、CDC-48.1，為p97同源基因，而在其他生物體內(nèi)如酵母、人類及鼠類中基因為單個存在，機(jī)體內(nèi)染色體9p13-p12為編碼p97蛋白基因所處位置，而p97基因轉(zhuǎn)錄得以調(diào)節(jié)的關(guān)鍵因子為前體B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子。P97蛋白屬于同質(zhì)六聚體，各個單體均包括D1和D2域這2個ATP酶及1個N域。觀察于低溫電子顯微鏡后發(fā)現(xiàn)當(dāng)D1域結(jié)合于ATP時N域會旋轉(zhuǎn)至上方構(gòu)成“上方構(gòu)象”，便于N域結(jié)合于輔助因子，比如形成泛素鏈底物結(jié)合位點，可將D2酶域暴露充分，同時提高ATP酶的活性，發(fā)生水解作用后底物會經(jīng)由蛋白中心孔通過。

1.2 p97的功能

P97蛋白作為ATP酶家族的一員在機(jī)體各類細(xì)胞中廣泛存在，功能主要為調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活性、控制蛋白質(zhì)質(zhì)量、在細(xì)胞周期控制中發(fā)揮作用及介導(dǎo)膜融合等。P97蛋白控制細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)質(zhì)量主要經(jīng)由降解異常蛋白途徑。P97對胞內(nèi)錯誤折疊蛋白質(zhì)泛素化予以介導(dǎo)，并協(xié)助從脂質(zhì)雙分子層通過，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向蛋白酶體轉(zhuǎn)運后將相關(guān)蛋白降解途徑完成；異常多肽會出現(xiàn)在機(jī)體發(fā)生mRNA缺陷時，底物被泛素化后結(jié)合于p97蛋白，此時可提取異常蛋白再進(jìn)行溶酶體降解。P97還可與線粒體外膜異常多肽相結(jié)合，加快降解后對體內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)予以維持。

2 p97蛋白、宮頸癌相關(guān)性的研究進(jìn)展

2.1 宮頸癌發(fā)生發(fā)展

宮頸癌、正常宮頸及CIN2/3等組織中p97含量不一，該物質(zhì)低表達(dá)于絕大多數(shù)正常組織中，高表達(dá)于宮頸癌及CIN2/3等組織中，免疫組化法研究后發(fā)現(xiàn)宮頸癌組織中p97蛋白陽性率比正常組織明顯要高，說明p97蛋白水平提升可能關(guān)聯(lián)于宮頸癌發(fā)生發(fā)展。在宮頸癌細(xì)胞上使用可逆性p97蛋白抑制劑時，當(dāng)耗盡細(xì)胞中p97蛋白時大量轉(zhuǎn)錄因子會聚集于細(xì)胞膜與細(xì)胞核豐富的區(qū)域，加快腫瘤細(xì)胞凋亡速度。p97蛋白具備介導(dǎo)泛素蛋白酶系統(tǒng)的功效，該功效主要發(fā)揮于正常組織細(xì)胞內(nèi)，可消除異常蛋白，將蛋白質(zhì)質(zhì)量控制在一定范圍內(nèi)。而該狀態(tài)下癌細(xì)胞細(xì)胞周期速度加快，相應(yīng)地合成蛋白質(zhì)的速度也變快，導(dǎo)致殘次品數(shù)量增加，而p97蛋白對蛋白質(zhì)質(zhì)量控制的作用也直接影響癌細(xì)胞繁殖及存活情況，對p97蛋白予以抑制會使得癌細(xì)胞內(nèi)堆積異常蛋白，腫瘤細(xì)胞因此死亡，提示宮頸癌細(xì)胞生存十分依賴p97蛋白。

2.2 宮頸癌預(yù)后

報道稱[3]p97蛋白抑制劑或應(yīng)用siRNA對p97蛋白表達(dá)予以干擾可促進(jìn)上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)型（EMT）樣改變并誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用。EMT可將上皮細(xì)胞表面標(biāo)志物喪失后間葉細(xì)胞表面標(biāo)志物被獲取的過程顯示出來，該狀態(tài)也會誘發(fā)腫瘤侵襲。若未將細(xì)胞內(nèi)異常蛋白質(zhì)及時有效清除會導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)處于應(yīng)激狀態(tài)，并經(jīng)由多種通路誘發(fā)EMT。NFκB活性亦可經(jīng)p97蛋白調(diào)節(jié)，且p97蛋白還參與細(xì)胞增殖與抗凋亡環(huán)節(jié)，p97蛋白可對細(xì)胞因子VEGF、IL-6及IL-8等予以正性調(diào)節(jié)后促進(jìn)腫瘤血管生成。除此之外，NFκB還可在一定程度上促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，原因在于該物質(zhì)可將活化尿激酶樣纖溶酶原激活劑與MMP9的功效發(fā)揮出來。研究結(jié)果表明[4]p97蛋白可促進(jìn)惡性腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，如肝癌、非小細(xì)胞癌、骨肉瘤、乳腺癌及前列腺癌等。當(dāng)前尚未報道p97蛋白與宮頸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)聯(lián)，仍需進(jìn)一步研究。

2.3 人乳頭瘤病毒（HPV）感染

機(jī)體持續(xù)感染可能因高危型HPV誘發(fā)，還會向宿主細(xì)胞染色體整合，誘發(fā)宮頸癌[5-6]。病毒對宿主細(xì)胞產(chǎn)生侵襲后會啟動凋亡程度，抑制病毒增殖擴(kuò)散，泛素連接酶相結(jié)合于HPVE6蛋白將p53泛素化作用誘導(dǎo)出來并經(jīng)溶酶體降解，該作用可有效抑制細(xì)胞凋亡；HPVE7細(xì)胞結(jié)合于Rb可加快宿主細(xì)胞進(jìn)入S期速度，促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂。應(yīng)用RTqPCR技術(shù)對子宮頸鱗癌、CIN2/3標(biāo)本p14、p97轉(zhuǎn)錄差異進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn)高級別上皮內(nèi)瘤變組織及宮頸癌組織中p97轉(zhuǎn)錄比p14明顯更高，提示p97啟動子對大部分HPV病毒早期基因轉(zhuǎn)錄予以控制。

3 p97蛋白抑制劑治療宮頸癌的進(jìn)展

EerI為人工合成P97蛋白抑制劑，作用于p97蛋白D1域ATP水解功能，但缺乏特異性。EerI可將多泛素化蛋白聚集，對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白降解進(jìn)行抑制，促使細(xì)胞凋亡及誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等途徑將p97蛋白功能削弱；體外環(huán)節(jié)EerI可將腫瘤細(xì)胞活性降低作用發(fā)揮出來，提示有望將p97蛋白作為新型抗腫瘤靶點[7-8]。當(dāng)前臨床主要采取手術(shù)與放射療法治療宮頸癌，手術(shù)適應(yīng)證為Ia-IIa期，醫(yī)療技術(shù)水平、醫(yī)院設(shè)備、臨床分期、全身狀況及年齡等均會影響手術(shù)效果；且手術(shù)為創(chuàng)傷性操作，會誘發(fā)諸多并發(fā)癥如淋巴囊腫、臟器損傷、術(shù)后感染及輸尿管瘺等，對患者生命質(zhì)量及婚姻質(zhì)量影響較大。放療為常用手段，當(dāng)手術(shù)切除存在可疑殘存、切除范圍不夠及腫瘤對放療敏感時可輔助采取該療法，但也有較多不良反應(yīng)，患者可能出現(xiàn)抗拒治療或不配合現(xiàn)象，對治療進(jìn)程產(chǎn)生影響。當(dāng)前臨床抗腫瘤藥物主要成分為雙硫侖，有學(xué)者將陰道環(huán)劑研發(fā)出來，包含雙硫侖成分，乙烯-醋酸乙烯酯共聚物為環(huán)劑主要材料，可保證雙硫侖的穩(wěn)定性[9]；臨床亦研發(fā)出雙硫侖陰道片，雙腔放置可將雙硫侖持續(xù)釋放出來，提示p97蛋白抑制劑可為臨床治療宮頸癌提供新途徑。

4 結(jié) 論

綜上所述，在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移及預(yù)后中p97蛋白發(fā)揮主要調(diào)控作用，對于作用機(jī)制的研究已經(jīng)逐漸深入，取得初步成效，但對p97與宮頸癌的相關(guān)性及作用機(jī)制并非十分明確，還需臨床深入研究。