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        采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)鑒定紫蘇的化學成分

        2019-01-25 05:31:58張桂清楊宇森許藝敏羅海凌姚俊新林占熺
        關(guān)鍵詞:醛酸紫蘇黃酮

        張桂清, 楊宇森, 許藝敏, 羅海凌, 姚俊新, 林占熺

        (福建農(nóng)林大學國家菌草工程技術(shù)研究中心,福建 福州 350002)

        紫蘇(PerillafrutescensL.)系唇形科紫蘇屬一年生草本植物,是我國傳統(tǒng)的藥食兩用植物[1],是國家衛(wèi)生部首批頒布的既是“食品又是藥品”的物品之一.其主要含有紫蘇醛、紫蘇醇、丁香油酚以及紫蘇苷、木犀草素、芹菜苷、芹黃素等多種黃酮類化合物[2,3].由于存在結(jié)構(gòu)的差異, 黃酮類化合物表現(xiàn)出不同的生物活性.有的黃酮可促使血管擴張,增加冠狀動脈血流量,從而起到降血壓、降血脂、增大心臟血流量、降低心率等作用[4];某些黃酮還具有抗菌消炎、抑制腫瘤細胞生長、保肝護肝及抗氧化等作用[5].

        紫蘇獨具降壓、助消化、解熱、鎮(zhèn)靜、止咳平喘、增強免疫力、抗癌、降血脂、清熱解毒等功效,其各部位都具有較好的抗癌作用,尤以葉片的作用更強,紫蘇籽中所含黃酮類化合物具有顯著的抗動脈硬化和降低甘油三脂的作用[6].近年來,紫蘇因具有獨特的活性物質(zhì)及營養(yǎng)成分,隨著對紫蘇含有的多種營養(yǎng)成分和活性物質(zhì)的深入研究,其開發(fā)利用研究也日益成為世界性的熱點課題.紫蘇適應(yīng)性較強、對土壤要求不嚴,易于種植,產(chǎn)量高,降脂效果顯著,大面積推廣和應(yīng)用必將提高我國人口的健康狀況,對國家衛(wèi)生保健事業(yè)的發(fā)展起到積極促進作用.

        通過系統(tǒng)的化學研究,目前已從紫蘇中分離鑒定出百余種化合物,包括揮發(fā)油類、萜類、黃酮類、甾醇類和酚類等.隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)已成為解析復(fù)雜組分的常用分析方法之一.采用高效液相色譜—飛行時間質(zhì)譜系統(tǒng)、液相色譜—四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜(QTOF/MS)結(jié)合液相色譜-離子阱質(zhì)譜(IT/MS)鑒定紫蘇化學成分的報道較少,采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用儀(超高效液相UPLC-SYNAPT G2-Si HD質(zhì)譜聯(lián)用)技術(shù)鑒定其它植物鮮有報道,但采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)鑒定紫蘇化學成分尚未見報道.四級桿質(zhì)量分析器對高質(zhì)量數(shù)離子有質(zhì)量歧視效應(yīng)、分辨率較低、適用質(zhì)量范圍較??;飛行時間質(zhì)量分析器存在分辨率低,無串極功能,限制了進一步的定性能力;液相色譜—離子阱質(zhì)譜(IT-MS)通常是低分辨質(zhì)譜,無法獲得準確質(zhì)量信息,定量靈敏度低于四級桿分析器,而且MS/MS模式下離子阱中碎裂程度低于串聯(lián)四級桿,因為母離子在離子阱中不會進一步碎裂,此外,IT-MS不能獲得分子式,不適用于定量分析;液相色譜—四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜(QTOF-MS)結(jié)合液相色譜—離子阱質(zhì)譜(IT-MS),雖然結(jié)合了二者功能的一些優(yōu)點,但總體存在分辨率較低的缺點.

        采用高效的T-Wave離子淌度分離技術(shù),增加了分離維度,具有無可比擬的離子淌度性能,可提供更詳細的信息,顯著提高了分析的峰容量、特異性和靈敏度,SYNAPT G2-Si擁有獨特的研發(fā)優(yōu)勢,其巨大的潛力更可滿足未來需求.本研究采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用儀,獲取精確相對分子質(zhì)量或裂解行為以推斷可能的分子式和化學結(jié)構(gòu),實現(xiàn)了紫蘇超聲波協(xié)同微波和二次微波法提取物復(fù)雜組分的較系統(tǒng)的快速分析鑒定,為紫蘇資源開發(fā)利用及臨床應(yīng)用提供依據(jù).

        1 材料與方法

        1.1 儀器與試藥

        高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用儀,其中質(zhì)譜儀為SYNAPT G2-Si HD(英國,沃特世)、ACQUITY(美國,沃特世)超高效液相色譜儀、超離心研磨儀(德國,RetschZM200)、電腦紫外檢測儀(HD-3000,上海嘉鵬科技有限公司)、程控多功能全自動部分收集器(CBS-B,上海嘉鵬科技有限公司)、恒流泵(HL-2S,上海嘉鵬科技有限公司)、中壓特制玻璃層析柱(CXZ-5 cm×20 cm)、大孔弱酸性陽離子交換樹脂(D152,北京索萊寶科技有限公司)、甲酸(CFTB-94318-250ML,上海安譜實驗科技股份有限公司)、乙腈(sigma)、LCMS級、NaOH(分析純,西隴化工股份有限公司)、HCl(分析純,西隴化工股份有限公司)、乙醇(分析純,西隴化工股份有限公司)、紫蘇(廣東匯群中藥飲片股份有限公司).

        1.2 方法

        1.2.1 粗黃酮制備 (1)超聲波協(xié)同微波提取紫蘇莖和葉:稱取紫蘇莖和葉放在烘干箱中干燥5 h,之后用德國Retsch(萊馳)ZM200超離心研磨儀(RetschZM200)研磨成約40 μm紫蘇粉末.稱取該粉末50 g,用1 000 mL 61%乙醇浸泡20 min,超聲時間30 min,水浴溫度40 ℃,過濾后低壓濃縮并冷凍干燥.

        (2)二次微波提取紫蘇莖和葉:稱取紫蘇莖和葉放在烘干箱中干燥5 h,之后用德國Retsch(萊馳)ZM200超離心研磨儀(RetschZM200)研磨成大約40 μm紫蘇粉末.稱取該粉末,料液比1∶20(50 g紫蘇粉末溶于1000 mL 61%乙醇),提取時間30 min,功率800W×60%,乙醇體積分數(shù)61%,提取2次,過濾,低壓濃縮,冷凍干燥.

        1.2.2 粗黃酮純化 先預(yù)處理D152大孔樹脂,之后裝上?5cm×24 cm的玻璃層析柱.采用61%(體積分數(shù))乙醇進行洗脫柱子,恒流泵(HL-2S)轉(zhuǎn)速45 r·min-1,實際流速約1.53 mL·min-1洗脫柱子,直至閾值低于6 MV,洗脫液開始從收集器廢液管流出時,收集管子,并集中在一起.過濾,濃縮,冷凍干燥.

        1.3 材料處理

        稱取純化黃酮粉50 mg溶于10 mL甲醇中,濃度為5 mg·mL-1,離心,轉(zhuǎn)速8 000 r·min-1.

        1.4 高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)條件

        1.4.1 色譜分析條件 超高效液相:ACQUITY,色譜柱:HSS T3(2.1×100 mm,1.8 μm),色譜梯度洗脫溶劑:水(0.1%甲酸)、乙腈(0.1%甲酸)、進樣量1 μL,流速0.45 mL·min-1(表1).

        表1 超高效液相色譜梯度洗脫程序Table 1 Gradient elution procedure for ultra-high performance liquid chromatography

        1.4.2 質(zhì)譜條件 儀器:SYNAPT G2-Si HDMS,離子模式:電噴霧離子源(ESI),負離子掃描模式,數(shù)據(jù)采集:MSe,ramp:10~50 ev,m/z掃描范圍:50~1 200 Da,Lockspray校正系統(tǒng):亮氨酸—腦啡肽,毛細管電壓:(ESI-:3.0 kV),離子源溫度:120 ℃,脫溶劑溫度:450 ℃,脫溶劑氣體流速:800 L·h-1,錐體氣流速:50 L·h-1,樣品孔電壓:40 V,源偏移:80,霧化器氣流:6.5,掃描時間:0.2 s.

        2 結(jié)果與分析

        采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用(超高效液相UPLC-SYNAPT G2-Si HD質(zhì)譜聯(lián)用)技術(shù)鑒定紫蘇化學成分,在全波長UV譜與總離子流譜圖中(圖1,2),各峰得到較好分離.通過對各化合物進行Masslyznv4.1軟件分析和數(shù)據(jù)庫(human metabolome、reaxys、pubchem)查詢,對各色譜峰準分子離子與碎片離子的高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行分析,結(jié)合文獻中紫蘇植物化學研究結(jié)果,初步鑒定出10種化學成分(表2),這些化合物從結(jié)構(gòu)類別上看主要為酚酸與黃酮類兩大類成分.

        表2 高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)鑒定紫蘇超聲波協(xié)同微波和二次微波提取物的相同化學成分Table 2 High-resolution ion mobility liquid chromatography-mass spectrometry to identify the same chemical constituents of perilla-extracted by ultrasonic synergistic microwave and secondary microwave

        2.1 迷迭香酸及咖啡酸四聚體類化合物

        色譜峰保留時間為5.16 min,其準分子離子峰[M-H]-m/z 359.076 9,同時還可觀察到二聚體離子峰[2M-H]-m/z 719.163 0,及其碎片離子m/z分別為[M-H-Caffeoyl]-197.045 4,[M-H-Caffeoyl-H2O]-179.036 4,[M-H-C9H10O5]-161.0240,[M-H-Caffeoyl-H2O-CO2]-135.045 2.m/z 179.036 4[Caffeicacid-H]為咖啡酸,m/z 135.045 2[Caffeicacid-H-CO2]為咖啡酸失去1個中性碎片CO2產(chǎn)生的離子m/z 135[M-H-CO2],這是典型的迷迭香酸的質(zhì)譜特征,因此推測此化合物為迷迭香酸[7-9].而且,咖啡?;c葡萄糖基在高能量質(zhì)譜中的準確相對分子質(zhì)量(162.031 7和162.052 8)存在顯著差異,本研究的[M-H-C9H10O5]-161.024 0,準確相對分子質(zhì)量為162.024 0,與咖啡酰基準確相對分子質(zhì)量(162.031 7)較接近,可信度較高,因此,本研究[M-H-C9H10O5]-161.024 0應(yīng)為咖啡?;?而不是葡萄糖基,這進一步證明該化合物含有咖啡?;?而迷迭香酸包含咖啡?;?因此,推斷該化合物為迷迭香酸.

        色譜保留時間4.804 min,檢測到質(zhì)譜峰m/z 719.161 7,其低能量質(zhì)譜中僅有較弱碎片離子峰m/z 359.076 4.此化合物的高能量質(zhì)譜中,觀察到碎片離子m/z 197.044 3,179.03 53與161.023 9,135.045 0這些碎片離子質(zhì)量表明此化合物與迷迭香酸有相似的結(jié)構(gòu)特征,故推測此化合物可能為咖啡酸四聚體類化合物或迷迭香酸二聚體.具有此特征的咖啡酸四聚體類化合物未見文獻報道,因此有可能為新化合物,但其結(jié)構(gòu)有待進一步結(jié)合磁共振技術(shù)進行結(jié)構(gòu)鑒定.

        2.2 黃酮類化合物鑒定

        黃酮及其苷類化合物質(zhì)譜特征較為明確,通過對各化合物進行Masslyznv4.1軟件分析和數(shù)據(jù)庫(human metabolome、reaxys、pubchem)查詢,對各色譜峰準分子離子與碎片離子的高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行分析,結(jié)合文獻中紫蘇植物化學研究結(jié)果,可初步鑒定出芹菜素6,8-二葡萄糖苷、木樨草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、山奈酚3-葡萄糖醛酸-7-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖醛酸糖苷、芹菜素-7-氧-葡萄糖醛酸苷等化合物.

        大量文獻將保留時間3.621 min核質(zhì)比m/z 593的化合物歸類為芹菜素7-O-咖啡酰葡萄糖苷,這與本試驗結(jié)果不一致,對此,本研究對該化合物進行了詳細分析.首先從質(zhì)量數(shù)準確度的角度考慮,芹菜素7-O-咖啡酰葡萄糖苷的準確分子質(zhì)量為m/z 594.137 3,分子式為C30H26O13,在質(zhì)譜正離子模式下加合H離子的信號[M+H]+為m/z 595.144 6,負離子模式下[M-H]-m/z 593.130 1[10],這與本研究實際測得結(jié)果(594.158 5)差異較大,誤差為35.68e-6.而芹菜素6,8-二葡萄糖苷的準確分子質(zhì)量為m/z 594.158 5,分子式為C27H30O15,在質(zhì)譜正離子模式下加合H離子的信號[M+H]+為m/z 595.165 7[10],這與本研究實際測得結(jié)果(594.158 5)一致,可信度較高.此外,該化合物的高分辨率質(zhì)譜結(jié)果也得到了豐富的碎片離子信息,通過比較[10],該化合物的碎片離子與芹菜素6,8-二葡萄糖苷碎片離子基本一致,都有m/z 383、353、473、503等碎片離子,裂解規(guī)律也大致相同.

        保留時間3.856 min色譜峰的準分子離子峰[M-H]-為 m/z 637.104 0,通過軟件分析和數(shù)據(jù)庫查詢,對各色譜峰準分子離子與碎片離子的高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行分析,結(jié)合文獻中紫蘇植物化學研究結(jié)果,得到化學式為C27H25O18.在紫蘇植物化學成分研究中[7,11],野黃芩素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、木樨草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷兩化合物分子式都為C27H25O18,野黃芩素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷和木犀草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷為一對同分異構(gòu)體,擁有相同的碎片m/z285、351和193,[M-H-2(Glu-H2O)]-285.0397,[M-H-C15H10O6]-351. 055 6,[M-H-C15H10O6-C6H6O5]-193.035 0分別為苷元、2個葡萄糖醛酸離子及它們斷裂形成的碎片[12].m/z 351為2個葡萄糖醛酸離子,由于葡萄糖醛酸含有羧基,使得其在負離子條件下有較強的響應(yīng).但本研究高能量質(zhì)譜中存在m/z 175.025 2碎片,則可以將兩者區(qū)分開來,m/z 175為木犀草素脫去鄰羥基苯酚后的碎片離子,而野黃芩素沒有此碎片,推斷m/z 637.103 9為木犀草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷.

        保留時間4.241 min色譜峰的準分子離子峰[M-H]-m/z 621.109 3,數(shù)據(jù)庫查詢得到化學式為C27H26O17,此化合物低能量質(zhì)譜中可檢測到碎片離子m/z 351.056 3,高能量質(zhì)譜中檢測到碎片離子m/z 269.044 8、351.056 3、m/z 487、351和269等比較明顯的碎片離子,其中m/z 487為[M-H-C8H6O2]-,為黃酮的特征斷裂方式;m/z 351[M-H-C15H10O5]-351.2,為2個葡萄糖醛酸離子,由于葡萄糖醛酸含有羧基,使得其在負離子條件下有較強的響應(yīng),本研究中m/z 351豐度最高,響應(yīng)最強.[M-H-2(Glu-H2O)]-269.2為芹菜素苷元.結(jié)合數(shù)據(jù)庫信息,質(zhì)譜碎片信息及文獻報道[7,11,13],即可判斷此譜峰為芹菜素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷.以上2個黃酮二葡萄糖醛酸苷類的低能量質(zhì)譜中并未檢測到高強度的黃酮苷元離子,而檢測到較高能量的碎片離子 m/z 351.056 3,經(jīng)數(shù)據(jù)庫查詢得到其化學式為C12H16O12,表明此片段為二葡萄糖醛酸離子.此碎片離子強度較高,可能與其結(jié)構(gòu)中羧基易失去質(zhì)子離子化有關(guān).

        保留時間4.077 min色譜峰的準分子離子峰[M-H]-為m/z 637.104 0,通過軟件分析和數(shù)據(jù)庫查詢,對各色譜峰準分子離子與碎片離子的高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行分析,結(jié)合文獻中紫蘇植物化學研究結(jié)果,得到化學式為C27H25O18.521.189 8應(yīng)該是丟失1個C4H6O3后形成的碎片;475.180 1應(yīng)該是丟失C5H8O5后形成的碎片;285.039 4是丟失葡萄糖基和葡萄糖醛酸基后的母核碎片.根據(jù)以上信息,推測該化合物可能為山奈酚3-葡萄糖醛酸-7-葡萄糖苷或其同分異構(gòu)體.

        保留時間4.537 min,色譜峰的準分子離子峰[M-H]-為m/z 461.071 8,數(shù)據(jù)庫查詢得到其化學式為C21H18O12.產(chǎn)生m/z 285的二級碎片離子,即[M-H-176]-,根據(jù)池玉梅等[14]研究,推測失去1個葡萄糖醛酸殘基;m/z 285的二級碎片離子產(chǎn)生m/z 257的三級碎片離子,這與標準品山奈酚的碎片離子相同,因此可以推斷色譜峰準分子離子峰[M-H]-為m/z 461.071 8為山奈酚衍生化的黃酮糖苷.此化合物低能量質(zhì)譜都可檢測到碎片離子m/z 447.092 3、285.039 8,其中m/z 285.039 8在高能量質(zhì)譜中豐度較高.通過數(shù)據(jù)庫查詢得到m/z 447.092 3化學式為C21H20O11,m/z 447.092 3失去1個葡萄糖殘基162,產(chǎn)生m/z 285的二級碎片離子,推測為山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖苷[15].結(jié)合前人研究[10]推測為山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖苷酸,根據(jù)文獻[16],推測該化合物為山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖醛酸糖苷.

        保留時間5.053 min,色譜峰的準分子離子峰[M-H]-為m/z 445.977 3,數(shù)據(jù)庫查詢得到其化學式為C21H18O11.此化合物低能量質(zhì)譜中可檢測到碎片離子m/z 269.045 2,高能量質(zhì)譜中檢測到碎片離子m/z 269.045 0,431.096 1,其中[M-H-176]-269.045 0,池玉梅等[14]研究表明,黃酮氧苷表現(xiàn)為丟失糖殘基,如六碳糖苷、五碳糖苷、甲基五碳糖苷和六碳糖醛酸苷分別為丟失162、132、146和176 u,失去1個葡萄糖醛酸殘基,且豐度較高.通過數(shù)據(jù)庫查詢得到m/z 269.045 0化學式為:C15H10O5,為芹菜素,m/z 431.096 1化學式為C21H20O10,為芹菜素-7-葡萄甙,通過前人研究[17]和質(zhì)譜碎片信息,推測該化合物為芹菜素-7-氧-葡萄糖醛酸苷.

        2.3 葵二酸的鑒定

        紫蘇提取物色譜分析中,在6.043 min檢測到離子m/z 201.112 9,通過數(shù)據(jù)庫查詢得到此化合物分子式為C10H18O4,高能量質(zhì)譜中碎片離子m/z分別為[M-H-H2O]-183.102 0、[M-H-H2O-CO2]-139.112 4、[M-H-CO2]-157.124 8、[M-H-CH2O2]-155.108 1.m/z 183.102 0是脫一分子水而產(chǎn)生,m/z 139.112 4是脫一分子水和一分子CO2而產(chǎn)生,m/z 157.124 8是脫一分子CO2而產(chǎn)生,m/z 155.1081是脫一分子CH2O2而產(chǎn)生,因此推斷此化合物為葵二酸,這在紫蘇文獻中尚未找到,是推導(dǎo)出來的新化合物.

        2.4 二次微波法與超聲波協(xié)同微波法鑒定紫蘇莖和葉化學成分比較

        通過二次微波法和超聲波協(xié)同微波法提取紫蘇黃酮的負離子模式高分辨質(zhì)譜總離子圖(圖1)和二次微波法和超聲波協(xié)同微波法提取紫蘇黃酮的液相色譜圖(圖2)分析,黃酮及其化合物主要集中在3.6 min到5.1 min內(nèi),5.1 min以后多為酚酸類.在質(zhì)譜中,分子離子峰的相對豐度與化合物的結(jié)構(gòu)密切相關(guān).5.1 min以內(nèi),二次微波法提取紫蘇黃酮的負離子模式高分辨質(zhì)譜總離子相對豐度高于超聲波協(xié)同微波法,說明二次微波法提取紫蘇黃酮化合物形成的穩(wěn)定性較超聲波協(xié)同微波法的強,較不易發(fā)生裂變,但2種方法提取紫蘇黃酮化合物形成的各個分子離子峰基本一致,即每個化合物基本一樣;5.1 min以后,超聲波協(xié)同微波法提取紫蘇的酚酸類負離子模式高分辨質(zhì)譜各離子相對豐度高于二次微波法,說明超聲波協(xié)同微波法提取紫蘇的酚酸類化合物形成的穩(wěn)定性高于二次微波法,較不易發(fā)生裂變,而且2種方法提取紫蘇的酚酸類化合物形成的各分子離子存在差異.二次微波法提取紫蘇黃酮的液相色譜波峰吸光度顯著高于超聲波協(xié)同微波法(圖2),而且有些液相色譜波峰不同,二次微波法提取紫蘇黃酮的液相色譜波峰數(shù)多于超聲波協(xié)同微波法.通過兩者綜合比對,二次微波法提取紫蘇黃酮類化合物的效果優(yōu)于超聲波協(xié)同微波法,超聲波協(xié)同微波法提取紫蘇酚酸類化 合物的效果優(yōu)于二次微波法.

        3 討論

        本研究采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(聯(lián)合使用超高效液相色譜儀)和質(zhì)譜儀(SYNAPT G2-Si HD英國沃特世),通過得到的紫外數(shù)據(jù)與高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)結(jié)合分析,再根據(jù)紫蘇化學成分相關(guān)文獻,從紫蘇莖葉提取物中初步鑒定出10種化學成分.這些成分主要為酚酸與黃酮類化合物,其中葵二酸是采用高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)首次從紫蘇中鑒定出的化合物.在黃酮類成分的質(zhì)譜鑒定中,鑒定出2種含量較高的黃酮二葡萄糖醛酸苷類化合物.這類化合物的低能量質(zhì)譜中,檢測到較高強度的二葡萄糖醛酸碎片離子m/z 351.056 3,而僅檢測到極弱的黃酮苷元碎片離子,因此提示此離子可能為黃酮二葡萄糖醛酸苷類化合物在負離子模式下的特征碎片離子.本研究鑒定的芹菜素6,8-二葡萄糖苷,與芹菜素7-O-咖啡酰葡萄糖苷結(jié)構(gòu)相似,但通過分子質(zhì)量數(shù)準確度和高分辨率質(zhì)譜結(jié)果得到的豐富碎片離子信息等推斷為芹菜素6,8-二葡萄糖苷,而不是芹菜素7-O-咖啡酰葡萄糖苷.野黃芩素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷和木犀草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷為同分異構(gòu)體,擁有相同的碎片m/z 285、351和193,但本研究高能量質(zhì)譜中存在m/z 175.025 2碎片,則可以將兩者區(qū)分開來,m/z 175為木犀草素脫去鄰羥基苯酚后的碎片離子(285-110=175),而野黃芩素沒有此碎片,推斷m/z 637.103 9為木犀草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷.中藥材成分復(fù)雜,藥材植物與產(chǎn)地、季節(jié)等自然因素有關(guān),在藥材采集儲運等環(huán)節(jié)還存在著影響藥材化學成分變化的因素.紫蘇在世界范圍內(nèi)作為藥食兩用的植物藥材,化學成分的變化必然會影響其藥理活性與食用價值,因此在大規(guī)模地開發(fā)利用之前,應(yīng)對其化學成分作進一步了解.本研究建立了一種基于高分辨離子淌度液質(zhì)聯(lián)用方法,用于紫蘇莖葉提取物中化學成分快速分離與結(jié)構(gòu)鑒定,可為該植物的合理利用與開發(fā)提供依據(jù).

        致謝:本論文研究工作在福建農(nóng)林大學作物科學學院何水林教授實驗室完成,特此致謝!

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