渠柏艷　張哲

摘 要：研究的目的主要針對有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測方法的探討，可以找到一種操作簡單、耗時(shí)短、價(jià)格低廉、實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好，穩(wěn)定性較好、可行性高，以解決現(xiàn)有檢測方法的高成本、難操作等問題。本研究利用化學(xué)發(fā)光及分光光度法，以有機(jī)磷農(nóng)藥樂果為標(biāo)的物，通過對磷鉬藍(lán)比色法的反應(yīng)條件進(jìn)行改進(jìn)和優(yōu)化，以磷酸二氫鉀作為磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，優(yōu)化溶液中鹽酸、鉬酸銨、無水乙醇、L-抗壞血酸的用量，建立磷濃度與吸光度線性關(guān)系。在此基礎(chǔ)上，研究了有機(jī)磷農(nóng)藥轉(zhuǎn)化為正磷酸的條件，并將其用于蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥的定量檢測。

關(guān)鍵詞：磷鉬藍(lán)比色法；農(nóng)殘檢測；分光光度法；化學(xué)發(fā)光

近年來由于農(nóng)藥的大量使用致使食品的農(nóng)藥殘留問題倍受關(guān)注， 提高農(nóng)藥殘留分析檢測技術(shù)是解決農(nóng)藥殘留問題的前提。有機(jī)磷類農(nóng)藥因?yàn)楦咚儆行АV譜適用等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用，但它高殘留、毒性強(qiáng)同時(shí)殘留期較長、會在動物體內(nèi)產(chǎn)生蓄積等問題，導(dǎo)致有機(jī)磷農(nóng)藥現(xiàn)在雖然已經(jīng)被國家禁止使用，但它的殘留檢測仍是農(nóng)產(chǎn)品檢測重要的一環(huán)。

目前常用的農(nóng)殘檢測方法有氣相色譜法[1，2]、酶抑制法[3，4]、熒光光度法[5-7]等，但這些方法檢測成本高、不易操作等，所以普遍的農(nóng)殘檢測需要一種簡便、快速的方法，更有利于推廣使用。

1.主要儀器與材料

在721E型紫外-可見分光光度計(jì)進(jìn)行分光光度法檢測，利用LDZX-50KB立式壓力蒸汽滅菌器將有機(jī)磷成分轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷，在HH6-數(shù)顯恒溫水浴鍋進(jìn)行反應(yīng)。采用50%樂果農(nóng)藥（乳油）為主要檢測對象。

2. 研究方法的原理

鉬藍(lán)比色法測定磷化合物，在酸性條件下，鉬酸銨與正磷酸結(jié)合，生成淡黃色的磷鉬酸銨，其高價(jià)的磷鉬酸銨具有氧化性，可被抗壞血酸還原成藍(lán)色化合物。生成的鉬藍(lán)在特定的波長下有最大吸收?；诖嗽?，采用鉬藍(lán)比色法，測定磷化合物含量。樂果農(nóng)藥中的有機(jī)磷經(jīng)高溫高壓，與強(qiáng)氧化劑K2S2O8反應(yīng)，將有機(jī)磷化合物轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷化合物。本實(shí)驗(yàn)通過磷鉬藍(lán)比色法測定磷濃度，進(jìn)而轉(zhuǎn)換為農(nóng)藥濃度，實(shí)現(xiàn)對蔬菜中含磷有機(jī)農(nóng)藥（極性農(nóng)藥）的檢測。

3.最大吸收波長的確定

按先后順序依次加入磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，5%鉬酸銨溶液，無水乙醇，搖勻，溶液成淡黃色后，加入HCl， L-抗壞血酸，室溫靜置，在600nm—900nm范圍內(nèi)，每隔10nm測一次吸光度，做λ—A曲線，該實(shí)驗(yàn)條件下，最大吸收波長（λmax）為730nm。基于此，本實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)皆在730nm下測定所得。

鉬藍(lán)比色法實(shí)驗(yàn)條件的確定

根據(jù)先后順序依次加入磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，5%鉬酸銨溶液，無水乙醇，搖勻，溶液成淡黃色后，加入HCl，再加 L-抗壞血酸，在某溫度放置一段時(shí)間，在最大吸收波長處測吸光度，做V1—A曲線，確定最優(yōu)條件，通過單因素和正交實(shí)驗(yàn)，最終確定無水乙醇用量為4.0mL、HCl（1：1）為0.5mL、5%鉬酸銨用量為0.7mL、L—抗壞血酸為3.0mL。

有機(jī)磷轉(zhuǎn)化率的確定

以樂果農(nóng)藥為例，取樂果溶液，分別加入K2S2O8定容，經(jīng)高壓、121℃、恒溫30min，使樂果轉(zhuǎn)化為正磷酸。取出后用流水快速冷卻，用NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值為6-7。取轉(zhuǎn)化液，按比例加入鉬酸銨、無水乙醇、HCl、L-抗壞血酸，定容，60℃恒溫水浴，其轉(zhuǎn)化率最大為84.6%。

農(nóng)藥檢出限的測定

在樂果農(nóng)藥的轉(zhuǎn)化率為84.6%時(shí)，加入不同量的樂果農(nóng)藥，按最優(yōu)條件實(shí)驗(yàn)，按比例加入4%的K2S2O8溶液。經(jīng)轉(zhuǎn)化后，按比例加入顯色劑，60℃恒溫水浴30min，流水冷卻后，測吸光度值，以此確定該方法對樂果農(nóng)藥的檢出限為0.05mg/L。

加標(biāo)回收率

將洗凈稱重的卷心菜加入無水硫酸鈉，研碎、抽濾、脫色獲得蔬菜汁，經(jīng)檢測計(jì)算得到該方法對樂果農(nóng)藥的回收率為83.5%。說明該方法在實(shí)際檢出環(huán)境中，能很好的給予檢出。

綜上所述，本文利用化學(xué)發(fā)光和分光光度計(jì)的方法建立了一個(gè)操作簡單且不需要昂貴的儀器設(shè)備，特別適用于蔬菜中含磷極性有機(jī)農(nóng)藥的檢測方法。

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基金項(xiàng)目： 遼寧省教育廳項(xiàng)目《基于微流控芯片技術(shù)的食品中極性相反的多種農(nóng)殘同提方法研究》（項(xiàng)目編號L015424 ）