楊 柳，康 雷，劉忠松

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128）

油菜主要用作油料作物，近年來(lái)也作為觀賞作物、蔬菜作物、飼料作物等種植。從植物學(xué)角度看，油菜包括白菜型油菜、芥菜型油菜和甘藍(lán)型油菜三類。三類油菜在形態(tài)上存在明顯差別，如白菜型油菜較矮；甘藍(lán)型油菜、芥菜型油菜較高；白菜型油菜、芥菜型油菜有天然的紫葉、多室、黃籽特征等。這些性狀差異特異性強(qiáng)、易識(shí)別、受環(huán)境條件影響小，不僅可以作為標(biāo)記性狀直接應(yīng)用于遺傳研究、雜種鑒別、種子純度鑒定等諸多方面，而且有些還與作物的產(chǎn)量、品質(zhì)甚至抗逆性相關(guān)聯(lián)。近年形態(tài)標(biāo)記性狀作為重要的育種選擇參考越來(lái)越受到重視，如隨著觀賞油菜的興起，對(duì)油菜品種的葉型、葉色、株高和花色都提出了新的要求［1，2]。

油菜的根、莖、葉、花、果、實(shí)的形態(tài)性狀研究由來(lái)已久，但以往研究大多停留在對(duì)表觀性狀遺傳分析方面。近年隨著油菜及近緣植物全基因組測(cè)序完成和序列公布，已將控制葉色、葉型、株高、花色、種子顏色等性狀的基因進(jìn)行了定位和克隆，從而為比較不同油菜類型間控制同一性狀的基因差異提供了條件。本文僅對(duì)油菜及其近緣種的形態(tài)標(biāo)記性狀基因定位和克隆進(jìn)展進(jìn)行評(píng)述。

1 葉色

油菜葉片一般為綠色，但有紫色、黃色、桔黃色等變異類型。紫葉白菜含有更多的蘆?。?]，桔黃葉白菜積累更多的β-胡蘿卜素［4]，這些物質(zhì)提高了白菜的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。在油菜（Brassica napus）、芥菜（B.juncea）、白菜（B.rapa）和甘藍(lán)（B.oleracea）等蕓薹屬植物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了有天然的紫葉突變，屬于單基因顯性突變，并且紫葉性狀可通過(guò)種間雜交由芥菜、白菜轉(zhuǎn)移到油菜和甘藍(lán)中去［5，6]。油菜控制紫葉性狀的基因在A03染色體，編碼APR2基因［7]，芥菜控制紫葉性狀的基因位于B02染色體（重新命名為B05［8]），編碼MYB轉(zhuǎn)錄因子基因［9]，白菜控制紫葉性狀的基因定位到A03、A07和A09染色體［10]，A03染色體的編碼基因?yàn)長(zhǎng)BD39［10]，A09染色體有2個(gè)控制葉色的基因，分別為DFR和bHLH類轉(zhuǎn)錄因子EGL3［11，12]，甘藍(lán)控制紫葉性狀的基因定位到C03、C06和C09染色體，C06染色體上的紫葉基因?yàn)镸YB2和MYBL2，而C09染色體的紫葉基因?yàn)镈FR［13～19]。紫葉的形成是由于過(guò)量積累花色素［20～23]?；ㄉ貙儆陬慄S酮類物質(zhì)。類黃酮的生物合成途徑研究成果頗豐，在蕓薹屬植物中有數(shù)十個(gè)基因參與這一途徑［23，24]，還有許多基因沒(méi)有找到自然突變體。

桔黃葉是大白菜的重要性狀，多個(gè)研究都把單基因隱性遺傳的桔黃葉指向A09染色體的影響胡蘿卜素合成的CRTISO基因［25～29]。蕓薹屬植物像水稻等植物一樣，有許多葉片黃化突變體，在葉綠體基因組［30]和C01、C07和C08染色體定位有黃化基因［31～34]，但至今僅1個(gè)油菜黃化突變體和1個(gè)白菜黃化突變體基因被克隆，分別編碼血紅素加氧酶1（PHO1）基因和葉綠體rps4基因。白菜QTL定位及基因注釋分析認(rèn)為，SCO3、ABI3、FLU、HCF153、HEMB1和CAB3等基因與葉色和葉綠素合成有關(guān)［35]。

2 光葉

油菜葉片表面一般會(huì)合成、積累一層蠟粉，保護(hù)植株免受干旱、高溫等環(huán)境脅迫。蠟質(zhì)是鏈非常長(zhǎng)的脂肪酸（C20～C34）衍生物質(zhì)，在油菜葉片中檢出有24種之多（C24～C31）［36]。如果葉片表皮細(xì)胞不合成蠟質(zhì)，葉片表面就因不能積累蠟粉而變成光葉（glossy）。光葉白菜、甘藍(lán)口感更好，而且不利于蚜蟲等多種昆蟲取食［37]。光葉既有顯性遺傳的，也有隱性遺傳的。油菜中單基因顯性光葉性狀是由A09染色體CER1基因單堿基突變所致［38]，白菜中克隆了A01和A09染色體上CER2和CER1基因［39，40]，甘藍(lán)中克隆了C01和C08染色體上的CER4、CER1基因，其中CER1基因有3個(gè)等位突變［41～45]，而C03染色體有涉及蠟質(zhì)合成的O-?；D(zhuǎn)移酶家族蛋白（WSD1-like）、3-酮酰CoA合成酶（KCS）和脂肪酰CoA還原酶（FAR）3個(gè)候選基因［37]。擬南芥中涉及蠟質(zhì)合成、分泌和調(diào)控的基因有20余個(gè)［46]，通過(guò)生物信息手段分析其中10個(gè)基因的油菜同源基因，發(fā)現(xiàn)有44個(gè)拷貝，除了CER10外，每一個(gè)擬南芥基因在油菜中有4個(gè)或更多同源基因［47]。

3 葉型

花葉是由于葉片深度缺刻造成，在油菜、芥菜中均有花葉自然突變體。油菜花葉是單基因不完全顯性遺傳，由于A10染色體LMI1基因啟動(dòng)子區(qū)域插入突變所致［48，49]。白菜QTL定位及基因注釋分析認(rèn)為CYCD3；1、CYCB2；4、AN3、ULT1和ANT基因與葉片大小有關(guān)［35]。遺傳基因組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，白菜A03、A09和A10染色體分別攜帶有控制葉型的KRP2、ERECTA和LONGIFOLIA1等基因［50]。

4 矮稈

甘藍(lán)型冬油菜株高一般在180～200 cm，容易倒伏，不利于機(jī)械收獲。由于油菜收獲指數(shù)低（0.28～0.35），所以一些育種家認(rèn)為油菜植株應(yīng)高大。但矮稈是水稻、小麥等作物第一次“綠色革命”的目標(biāo)性狀，油菜能否培育出矮稈高產(chǎn)品種近年受到重視?？刂浦参锇捫誀畹幕蛏婕暗匠嗝顾?、生長(zhǎng)素、油菜素內(nèi)酯和獨(dú)腳金內(nèi)酯的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和傳導(dǎo)。油菜中現(xiàn)有矮稈突變體多是化學(xué)誘變產(chǎn)生的堿基替換的結(jié)果，株高在70～100 cm，表現(xiàn)為單基因半顯性遺傳。已經(jīng)定位的矮稈基因位于油菜A03、A06、A09和C05、C07、C09染色體上，A03染色體的矮稈基因編碼控制生長(zhǎng)素合成的IAA7［51]，C05染色體的矮稈基因編碼控制赤霉素合成的GID1［52]，其他已克隆的油菜、白菜矮稈基因都編碼控制赤霉素傳導(dǎo)的RGA基因［53～59]。油菜是無(wú)限花序作物，如果變成有限花序，株高也會(huì)降低。決定油菜有限花序的基因定位在A10染色體，編碼TFL1基因［60，61]。通過(guò)株高QTL定位、整合和候選基因鑒定，發(fā)現(xiàn)油菜有287個(gè)控制株高的候選基因［62]。

5 花色

油菜種植面積大、花期長(zhǎng)、花色鮮艷，近年來(lái)以觀賞油菜花為主題的油菜花節(jié)助推了鄉(xiāng)村旅游的興起，需要培育紅色、紫色、彩色等不同花色的油菜品種。傳統(tǒng)的油菜花一般是黃色（鮮黃色、金黃色、桔黃色），通過(guò)遠(yuǎn)緣雜交已將甘藍(lán)（白花芥藍(lán)）、蘿卜、諸葛菜等植物的白花、紫花和紅花等性狀導(dǎo)入到油菜中。影響花色的色素物質(zhì)主要有三類，即藍(lán)色到紅色的花青素、紅色的甜菜素和黃色到帶紅色的類胡蘿卜素，這些色素的組成和含量決定花色的變化［63]。油菜桔黃色花是由2個(gè)隱性基因位點(diǎn)控制，其中一個(gè)位點(diǎn)定位在C09染色體，編碼類胡蘿卜素代謝途徑玉米黃素環(huán)氧化酶ZEP基因［64]。由白花芥藍(lán)轉(zhuǎn)移到油菜的白花性狀是單基因顯性遺傳，基因定位在C03染色體，編碼類胡蘿卜素裂解雙加氧酶基因CCD4［65，66]，白花是由于轉(zhuǎn)座子插入所致。芥菜乳白花性狀是由2個(gè)隱性基因控制，分別定位在A02和B04（B06［8]）染色體，編碼硫酯酶家族蛋白PES2和PES1基因［67，68]。

6 種子顏色

油菜未成熟種子為綠色，成熟種子為黑色、褐色或黃色。在相同遺傳背景下，油菜黃色種子比黑色、褐色種子含油量更高，種皮更薄，不含原花色素。因此選育黃籽油菜品種是重要的育種目標(biāo)。在自然界還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)甘藍(lán)型黃籽油菜，將白菜型油菜、芥菜型油菜、白芥（Sinapis alba）中發(fā)現(xiàn)的黃籽性狀通過(guò)種、屬間雜交轉(zhuǎn)移到油菜中，培育出了甘藍(lán)型油菜黃籽類型。白菜和白菜型油菜黃籽性狀基因分別定位在A06和A09染色體，A06染色體TTG1基因調(diào)控種子顏色［69，70]，A09染色體有2個(gè)編碼轉(zhuǎn)錄因子的基因TT1和TT8被認(rèn)為調(diào)控種子顏色［71～73]。芥菜型油菜黃籽性狀基因定位在A09和B03（B08［8]）染色體［74，75]，同樣編碼TT8基因，但芥菜型油菜黃籽很可能不是來(lái)源于白菜型油菜黃籽，因?yàn)橥蛔兾稽c(diǎn)不同［71，75]。

7 多室

油菜一般由1個(gè)假隔膜將角果分為2室，但也發(fā)生了天然的3或4室突變，這種具有3或4室的油菜稱為多室油菜。多室油菜每角果種子數(shù)增加，有利于提高單產(chǎn)。白菜型黃籽油菜中突變形成的多室油菜是由于A04染色體CLV3基因單堿基替換所致［76，77]，而芥菜型黃籽油菜中突變形成的多室油菜是由2個(gè)隱性基因控制，分別位于A07和B07（B03［8]）染色體，均編碼CLV1基因［78～80]。

8 總結(jié)

油菜及其近緣植物已定位、克隆的形態(tài)標(biāo)記性狀基因列于表1。從表1可見：（1）控制同一性狀的基因往往不只1個(gè)，而是多個(gè)。（2）這些控制同一性狀的多個(gè)基因可能位于不同代謝途徑（如矮稈），也可能位于同一代謝途徑（如紫葉）。如果通過(guò)基因編輯等手段創(chuàng)制新的種質(zhì)，可以選擇不同途徑、不同靶標(biāo)基因進(jìn)行研究。（3）異源四倍體的油菜、芥菜控制性狀的基因數(shù)目一般是其祖先親本種白菜、甘藍(lán)的2倍，在相同的染色體或同源區(qū)段能找到同源基因，這為進(jìn)一步克隆油菜基因提供了借鑒。

表1 油菜及其近緣植物已定位和克隆的形態(tài)標(biāo)記性狀基因

續(xù)表1