黃 建 郭金強 周偉新 馮春宇 凌學民

廣東省深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院 1 婦科 2 診斷科 3 病理科 518012

子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis,EMs)是指具有生長能力及功能的子宮內(nèi)膜組織(腺體或間質(zhì))出現(xiàn)在子宮腔被覆內(nèi)膜及宮體肌層以外的其他部位所致的疾病[1]。多發(fā)生于育齡女性，臨床表現(xiàn)主要為疼痛、不孕、盆腔粘連等，嚴重影響女性的身心健康。由于目前子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機制尚不明確，本文從分子水平研究Caspase-8、PCNA和nm23在子宮內(nèi)膜異位癥患者及正常子宮內(nèi)膜組織的表達情況，為子宮內(nèi)膜異位癥的早期診斷和治療提供理論依據(jù)和臨床參考指標，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2012年5月—2017年12月于我院婦科就診的患者為觀察對象，分為實驗組和對照組。實驗組為行開腹或者腹腔鏡手術(shù)進行治療的子宮內(nèi)膜異位癥患者40例，對照組為同期因不孕癥(排除器質(zhì)性疾病及子宮內(nèi)膜異位癥)行子宮內(nèi)膜活檢正常子宮內(nèi)膜患者33例。所有病例都經(jīng)過了病理學診斷確診，排除子宮內(nèi)膜異位癥以外的內(nèi)膜病例。所有入組的患者月經(jīng)周期具有規(guī)律性，并且手術(shù)治療前3個月內(nèi)均未接受過激素治療，均未處于妊娠或哺乳狀態(tài)。排除其他需要依賴激素治療的疾病，如功能性子宮出血等。實驗組平均年齡(33.38±6.02)歲，平均體重(52.48±6.28)kg；對照組平均年齡(32.94±5.59)歲，平均體重為(50.70±5.03)kg，所有患者在年齡、體重方面差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有入組患者均簽署知情同意書，且方案通過本院倫理委員會批準。

1.2 檢測方法 所有標本均用甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，分別用常規(guī)HE染色，免疫組織化學S-P方法檢測Caspase-8、PCNA和nm23蛋白的表達。陽性結(jié)果判定標準：光鏡下每張切片選取5個有代表性高倍鏡視野，計數(shù)1 000個細胞，計算陽性細胞百分率。陰性：無陽性染色細胞或者陽性染色細胞數(shù)<5%；弱陽性，5%≤陽性染色細胞<25%；陽性：25%≤陽性染色細胞數(shù)≤50%；強陽性：陽性染色細胞>50%。

1.3 統(tǒng)計學方法 用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析。免疫組化實驗結(jié)果應(yīng)用等級資料的秩和檢驗對相關(guān)組間進行顯著性檢驗；采用Spearman相關(guān)分析法對Caspase-8、PCNA和nm23與子宮內(nèi)膜異位癥表達的關(guān)系進行相關(guān)性分析。P<0.05 為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

實驗組的Caspase-8表達以陰性和弱陽性為主，陰性率為60.00%；PCNA的表達以弱陽性及以上為主，總陽性率(弱陽性+陽性+強陽性)為90.00%；nm23的表達則以陰性和陽性為主，陰性率和陽性率均為32.50%，實驗組和對照組的Caspase-8、PCNA和nm23中的表達在各自等級具有明顯差異，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。經(jīng)Spearman相關(guān)分析，子宮內(nèi)膜異位癥組患者Caspase-8和PCNA的表達呈負相關(guān)(r=-0.730，P=0.000)，Caspase-8和nm23表達呈正相關(guān)(r=0.798，P=0.000)。詳見表1。

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥是困擾女性健康的問題之一，給女性帶來巨大的身心壓力甚至影響生育[3]。據(jù)有關(guān)文獻報道，子宮內(nèi)膜異位癥在育齡婦女的發(fā)病率達6%～10%。然而子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病原因與發(fā)病機制尚不明確，存在多種假說，如子宮內(nèi)膜種植學說、遺傳學說、免疫學說機制等。近年來有不少學者從分子水平對子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病原因及機制進行了研究[4-6]，以尋求病因，希望根源入手為該病的診斷治療提供方法。

本文通過對以行開腹或者腹腔鏡手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜異位癥患者和同期因不孕癥(排除器質(zhì)性疾病及子宮內(nèi)膜異位癥)行子宮內(nèi)膜活檢正常子宮內(nèi)膜患者的Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達水平進行分析后，認為兩組的Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達在各自等級具有明顯差異，且差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，并且經(jīng)Spearman相關(guān)分析，子宮內(nèi)膜異位癥患者Caspase-8和PCNA、nm23的表達水平均具有相關(guān)性(P<0.05)，其中Caspase-8與PCNA為負相關(guān)關(guān)系，與nm23為正相關(guān)關(guān)系。Caspase家族是一組蛋白酶，能夠介導(dǎo)即將死亡細胞的蛋白水解，對于細胞凋亡過程中的啟動、完成中具有非常重要的作用，Caspase-8是關(guān)鍵的啟動子。在本文中Caspase-8在實驗組的陰性率高于對照組，可能是子宮內(nèi)膜細胞Caspase-8低表達，能夠逃脫免疫監(jiān)視、清除，抵制細胞凋亡，從而可以異位黏附種植[2]。PCNA參與DNA多聚酶活性作用，和細胞增長具有密切關(guān)系，在子宮內(nèi)膜異位癥中保持著內(nèi)膜細胞增殖的能力[4]。

表1 Caspase-8、PCNA和nm23蛋白在兩組中的表達

綜上所述，Caspase-8、PCNA和nm23蛋白表達水平在實驗組和對照組的表達具有顯著差異性，可能與子宮內(nèi)膜異位癥分子學機制有關(guān)，為子宮內(nèi)膜異位癥在分子水平進一步研究提供了理論依據(jù)。