徐香梅，徐文華，楊文娜，陳 旋，趙 陽(yáng)，趙新望，鄭景輝

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué) 南寧530001；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院 南寧530001）

冠心病是一種慢性血管性疾病，近年來(lái)，人們對(duì)冠心病的相關(guān)研究日益重視。根據(jù)2017年中國(guó)心血管指南數(shù)據(jù)報(bào)告推算冠心病現(xiàn)患人數(shù)1100萬(wàn)，患病率持續(xù)升高，并為心血管病最大危險(xiǎn)因素之一[1]。人參湯出自張仲景的《金匱要略》，文中記載：“胸痹心中痞，留氣結(jié)在胸，胸滿，脅下逆搶心，枳實(shí)薤白桂枝湯主之，人參湯亦主之?！彪S著現(xiàn)代藥理學(xué)研究不斷發(fā)展,人參湯廣泛用于治療多種心臟疾病，并均有明顯的療效。本研究利用分子對(duì)接和系統(tǒng)藥理學(xué)方法，探究人參湯治療冠心病的作用機(jī)制，該方法有并綜合網(wǎng)絡(luò)分析“藥物-靶點(diǎn)-疾病-信號(hào)通路”方面。從而整體系統(tǒng)的來(lái)分析人參湯中復(fù)雜的網(wǎng)狀協(xié)同作用治療冠心病的原理，此方法為中藥潛在活性成分對(duì)治療疾病的作用靶點(diǎn)預(yù)測(cè)及作用機(jī)制的闡述的研究提供新思路[2]。

1 材料與方法

1.1 人參湯的活性化合物的篩選

本研究借助中藥系統(tǒng)藥理學(xué)和分析平臺(tái)TCMSP（http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php）,以O(shè)B≥30%，DL≥0.18篩選人參湯中“干姜”、“白術(shù)”、“人參”、“甘草”的有效化合物活性成分。

1.2 人參湯化合物相對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)的收集

將TCMSP中篩選出來(lái)的有效化合物通過(guò)DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.drugbank.ca/）確認(rèn)出人參湯每個(gè)化合物的有效作用靶點(diǎn)。

1.3 人參湯化合物-靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

對(duì)同一化合物預(yù)測(cè)產(chǎn)生的相同靶點(diǎn)進(jìn)行篩選剔除，錄入U(xiǎn)niProt（https://www.uniprot.org/）數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索，選擇物種為“Homo sapiens”，剔除重復(fù)、非人源與不規(guī)范的靶點(diǎn)，經(jīng)檢索和轉(zhuǎn)化操作最終得到人參湯活性成分的基因靶點(diǎn)（Gene symbol），再將將篩選出來(lái)的人參湯化合物和相關(guān)靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape3.7.0軟件中，構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)。

1.4 冠心病相關(guān)靶點(diǎn)的獲取

利用在線文本挖掘服務(wù)器GeneCards（https://www.genecards.org/）收集與冠心病相關(guān)的靶點(diǎn)。數(shù)據(jù)庫(kù)以關(guān)鍵詞“Coronary heart disease（CHD）”進(jìn)行搜索，通過(guò)Gifts算法計(jì)算靶點(diǎn)與冠心病的相關(guān)度，并按照相關(guān)度的排序選擇得分≥30的靶點(diǎn)作為冠心病靶點(diǎn)進(jìn)行研究，并摘錄相應(yīng)的靶點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)基因名。

1.5 人參湯對(duì)冠心病的作用靶點(diǎn)蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

通過(guò)利用Venn在線分析工具獲得人參湯和冠心病共同交集的靶點(diǎn)來(lái)確認(rèn)為人參湯治療冠心病的作用靶點(diǎn)。再把作用靶點(diǎn)收集在一起后上傳至在線STRING10.5（http://string-db.org）獲取基因靶點(diǎn)。再運(yùn)用Cytoscape3.7.0軟件對(duì)其構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖。

1.6 人參湯基因本體（GO）功能富集分析

通過(guò)采用Davidv6.8.0數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)人參湯作用于冠心病的靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行GO功能富集分析。包括生物過(guò)程（BP，biological process），細(xì)胞組分（CC，cellular component），分子功能（MF，molecular function）。將人參湯作用于冠心病的靶點(diǎn)GO功能富集結(jié)果進(jìn)行可視化分析。

1.7 人參湯KEGG通路富集分析

利用DAVID平臺(tái)的KEGG富集分析功能,對(duì)人參湯作用于冠心病的靶點(diǎn)中涉及的18個(gè)蛋白質(zhì)的功能進(jìn)行了研究，富集出23條信號(hào)通路，并導(dǎo)入omicshare（http://www.omicshare.com/）進(jìn)行可視化處理。

1.8 人參湯中主要活性成分?人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)分子對(duì)接結(jié)果分析

依據(jù)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)，選出人參湯關(guān)鍵的化合物和靶點(diǎn)。登陸系統(tǒng)分子對(duì)接Systems Dock Web Site（Systemsdock）數(shù)據(jù)庫(kù)，將人參湯治療冠心病的潛在18個(gè)作用靶點(diǎn)輸入PDB ID，找活性位點(diǎn)，計(jì)算格點(diǎn)，調(diào)整X-Y-Z坐標(biāo)來(lái)細(xì)化位置。在系統(tǒng)對(duì)接中應(yīng)用AutoDockVina進(jìn)行對(duì)接模擬，預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)和配體結(jié)合的性能，調(diào)整X-Y-Z坐標(biāo)和網(wǎng)格大小以細(xì)化綁定的位置[3]。對(duì)接結(jié)果的分?jǐn)?shù)=的負(fù)對(duì)數(shù)，Docking Scores的值通常為0至10。輸入篩選后的人參湯化合物的結(jié)構(gòu)，成功后開始對(duì)接,整理對(duì)接結(jié)果中的Docking Score并分析。

2 結(jié)果

2.1 人參湯活性化合物的篩選

通過(guò)TCMSP軟件以藥物標(biāo)準(zhǔn)OB≥30%和DL≥0.18為條件篩選出人參湯活性化合物共126個(gè)，其中干姜5個(gè)，人參22個(gè)，甘草92個(gè)，白術(shù)7個(gè)。這126個(gè)化合物包括：西拉苯嗪（Celabenzine）、甘草醇（Glycyrol）、7,2'，4'-三羥基-5-甲氧基-3-芳基香豆素（7,2',4'-trihydroxy-5-methoxy-3-arylcoumarin）、苦參素（licopyranocoumarin）、利可霉素（liquiritin）、葛根素B（GlepidotinB）、甘草利酮（Licoricone）等。各個(gè)化合物的OB和DL值見(jiàn)表1。

2.2 人參湯化合物-靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)

為了更直觀地表示化合物分子和靶點(diǎn)之間的相互作用關(guān)系，構(gòu)建了化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，共有38個(gè)化合物節(jié)點(diǎn)和94個(gè)靶點(diǎn)節(jié)點(diǎn),126個(gè)化合物中有88個(gè)未參與網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建。取每一個(gè)化學(xué)成分的前20個(gè)蛋白，再將這些蛋白導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(kù)中，剔除掉非人源蛋白和重復(fù)蛋白，最后整合共得到84個(gè)靶點(diǎn)。將得到的結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape軟件中構(gòu)建“化合物成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖（圖1）。

2.3 人參湯對(duì)冠心病的作用靶點(diǎn)

根據(jù)Gene-Cards數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.GeneCards.org/）分析按照相關(guān)度排序選擇得分≥析按收集冠心病靶點(diǎn)219個(gè)[4]。利用Venn分析工具，將人參湯化學(xué)成分靶點(diǎn)與冠心病相關(guān)發(fā)病機(jī)制靶標(biāo)進(jìn)行對(duì)比分析，得出人參湯化學(xué)成分靶點(diǎn)與冠心病相關(guān)發(fā)病機(jī)制的18個(gè)靶點(diǎn)基因，分別為SCN5A、NOS2、TNF、IL1B、NR3C2、SELE、ADRB1、MMP1、HTR2A、VCAM1、PPARG、ADRB2、F7、IFNG、HMOX1、PON1、KCNH2、ESR1。

2.4 人參湯對(duì)冠心病的作用靶點(diǎn)蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

為了更直觀地觀察人參湯對(duì)冠心病作用的潛在靶點(diǎn)之間的關(guān)系，將人參湯化學(xué)成分靶點(diǎn)與冠心病相關(guān)發(fā)病機(jī)制的18個(gè)潛在靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape軟件中構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)（圖3）。如圖所示，人參湯對(duì)冠心病作用的潛在靶蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)有16個(gè)節(jié)點(diǎn)（2個(gè)靶蛋白未參與蛋白的相互作用），分別為心臟鈉離子通道α亞單位（SCN5A），一氧化氮合酶（NOS2），腫瘤壞死因子（TNF），重組白細(xì)胞介素1（IL1B），選擇素E（SELE），β1腎上腺素受體（ADRB1），基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP1），重組人血管細(xì)胞粘附分子-1（VCAM1），過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ（PPARG），β2腎上腺素能受體（RB2），類黃酮7（F7），姜黃素抑制（IFNG），血紅素加氧酶1（HMOX1），對(duì)氧磷酶（PON1），離子通道基因（KCNH2），雌激素受體（ESR1）。

表1 人參湯的活性化合物基本信息

2.5 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)GO功能富集注釋分析

為了研究人參湯中作用靶點(diǎn)具備的基因功能，借助DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行GO功能富集分析，得出109個(gè)GO條目，其中生物過(guò)程相關(guān)的條目最多，共有85條生物過(guò)程（BP），主要包括趨化因子生物合成過(guò)程的正向調(diào)控，一氧化氮生物合成工藝的正反饋，基因表達(dá)負(fù)調(diào)控，胰島素分泌調(diào)節(jié)，膜蛋白外域蛋白水解陽(yáng)性調(diào)節(jié)，基因表達(dá)負(fù)調(diào)控，類固醇激素介導(dǎo)的信號(hào)通路，白介素6生物合成過(guò)程的陽(yáng)性調(diào)節(jié)，殺傷其他生物細(xì)胞的陽(yáng)性調(diào)節(jié)等方面;其中有10條細(xì)胞組分（CC），主要包括質(zhì)膜，肌纖維膜，細(xì)胞質(zhì)的核周區(qū)域，等離子體膜，細(xì)胞外空間等組成部分。并有14條分子功能（MF），主要包括腎上腺素，去甲腎上腺素，酶結(jié)合，蛋白質(zhì)同源二聚化的激活和類固醇激素受體活性等方面。將人參湯PPI網(wǎng)絡(luò)的GO功能富集蛋白通過(guò)GraphPad軟件做出BP，CC，MF柱狀圖，具體GO分析注釋見(jiàn)圖4。

圖1 人參湯化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)

圖2 人參湯-冠心病共同靶點(diǎn)圖

圖3 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

2.6 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)KEGG通路富集分析和氣泡圖

為了明確人參湯作用靶點(diǎn)在信號(hào)通路中的作用，通過(guò)DAVID數(shù)據(jù)庫(kù)來(lái)進(jìn)行KEGG通路富集分析功能，分析結(jié)果顯示人參湯作用于冠心病的通路有23條，其中 包 括NF-κB信 號(hào) 通 路（NF-kappa B signaling pathway），腫瘤壞死因子信號(hào)通路（TNF signaling pathway），鈣信號(hào)傳導(dǎo)途徑（Calcium signaling pathway），心肌細(xì)胞中的腎上腺素能信號(hào)傳導(dǎo)（Adrenergic signaling in cardiomyocytes），HIF-1信號(hào)通路（HIF-1 signaling pathway），非洲錐蟲?。ˋfrican trypanosomiasis），瘧疾（Malaria），阿米巴病（Amoebiasis），I型糖尿病（Type I diabetes mellitus）等。將KEGG通路富集的通路有23條導(dǎo)入omicshare平臺(tái)做出高級(jí)氣泡圖，具體分析見(jiàn)圖5。

2.7 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)KEGG通路富集通路圖

通路富集分析KEGG分析發(fā)現(xiàn)人參湯作用于冠心病的靶點(diǎn)的通路有23條，其中按FDR<0.05選取有19條信號(hào)通路富集最相關(guān)（表2）。點(diǎn)擊相關(guān)性較大的NF-κB信號(hào)通路Chart（圖6）。

2.8 人參湯中主要活性成分?人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)分子對(duì)接結(jié)果分析

根據(jù)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)PTGS2、ESR1、AR、PTGS1、NCOA2為計(jì)算中最重要的五個(gè)靶點(diǎn)，分別是MOL005384（Suchilactone蘇齊內(nèi)酯）、MOL000358（beta-sitosterol谷固醇；甾醇,植物甾醇）、MOL000422（kaempferol山柰酚；堪非醇）、MOL000787（fumarine原阿片堿；延胡索堿）、MOL000449（stigmasterol豆固醇；豆甾醇；豆甾烯醇）為計(jì)算中最重要的五個(gè)化合物分子對(duì)接結(jié)果。分子對(duì)接結(jié)果分析見(jiàn)表3。分子對(duì)接結(jié)果顯示人參湯多個(gè)靶點(diǎn)的Docking Score值大于8.0證明有強(qiáng)烈的結(jié)合活性（圖7）。由此表明人參湯與人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)有較好的結(jié)合活性。

圖4 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)的GO功能富集BP、CC、MF分析柱狀圖

3 討論

冠心病是一種慢性血管性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及脂質(zhì)代謝，血流動(dòng)力學(xué)，細(xì)胞凋亡以及一系列炎癥反應(yīng)等各個(gè)方面。常年處于較高的發(fā)病率和死亡率，探索一種安全有效的科學(xué)治療方法迫在眉睫。近年來(lái)，冠心病的診斷與治療有了長(zhǎng)足的進(jìn)步，但其病因?qū)W與發(fā)病機(jī)理的研究仍進(jìn)展緩慢。本研究采用綜合網(wǎng)絡(luò)“藥物-靶點(diǎn)-疾病-信號(hào)通路”等分析，從整體系統(tǒng)的分析人參湯干預(yù)冠心病的潛在作用靶點(diǎn)的作用機(jī)制，為預(yù)防及治療冠心病提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)于闡述其治病的科學(xué)性具有重要意義。

本研究在檢索人參湯4味中藥的化學(xué)成分和作用靶點(diǎn)后，構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)人參湯中可能潛在的關(guān)鍵化合物包括PTGS2，PTGS1，ADRB2等。PTGS1和PTGS2同源于PTGS，屬于它的2種異構(gòu)酶，也是起重要作用的限速酶，PTGS廣泛參與機(jī)體的腫瘤新生、炎癥反應(yīng)、凝血平衡等病理過(guò)程[5]。由此可知，PTGS極大可能參與了機(jī)體發(fā)病機(jī)制過(guò)程。ADRB2是β1腎上腺素能受體，主要存在血管平滑肌細(xì)胞和腎臟的多種細(xì)胞中，參與交感神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控機(jī)體的一部分。郭威早[6]等認(rèn)為β2腎上腺素能受體在心肌細(xì)胞中和糖皮質(zhì)激素受體具有明顯的關(guān)聯(lián)性，該受體可通過(guò)調(diào)節(jié)腎臟Na＋、血管緊張肽原酶、腎素來(lái)調(diào)節(jié)血壓，從而影響心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)機(jī)制。羅亨全[7]等認(rèn)為ADRB2其基因位于第5號(hào)染色體，介導(dǎo)兒茶酚胺遞質(zhì)產(chǎn)生生理學(xué)效應(yīng)。由此可推斷，ADRB2受體通過(guò)改變血管緊張性和兒茶酚胺等多種途徑參與了冠心病的發(fā)病過(guò)程。

圖5 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)KEGG通路富集分析氣泡圖

面對(duì)冠心病的發(fā)病機(jī)制是存在復(fù)雜性,本研究在此方面進(jìn)行了更深入的研究，為了明確人參湯作用靶點(diǎn)在信號(hào)通路中的作用，結(jié)合系統(tǒng)藥理學(xué)的系統(tǒng)分子對(duì)接中找出關(guān)鍵人參湯的關(guān)鍵化合物和靶點(diǎn)。預(yù)測(cè)其蛋白質(zhì)和配體結(jié)合的性能，分子對(duì)接結(jié)果顯人參湯多個(gè)靶點(diǎn)的Docking Score值大于8.0證明有強(qiáng)烈的結(jié)合活性由此表明人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)有非常強(qiáng)的結(jié)合活性。并通過(guò)進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析功能，GO分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)生物過(guò)程相關(guān)的條目最多，有85條生物過(guò)程，主要包括趨化因子生物合成過(guò)程的正向調(diào)控，一氧化氮生物合成工藝的正反饋，基因表達(dá)負(fù)調(diào)控，胰島素分泌調(diào)節(jié)，膜蛋白外域蛋白水解陽(yáng)性調(diào)節(jié)，類固醇激素介導(dǎo)的信號(hào)通路，白介素6生物合成過(guò)程的陽(yáng)性調(diào)節(jié)等方面。其次發(fā)現(xiàn)14條分子功能主要在腎上腺素，去甲腎上腺素，酶結(jié)合，蛋白質(zhì)同源二聚化的激活和類固醇激素受體活性等方面發(fā)揮作用。另外有10條細(xì)胞組分，主要包括對(duì)質(zhì)膜，肌纖維膜，細(xì)胞質(zhì)的核周區(qū)域，等離子體膜，細(xì)胞外空間等組成部分參與了其中。由此本研究可得出,人參湯對(duì)治療冠心病的作用靶點(diǎn)與這三個(gè)方面的參與調(diào)控和改變密切相關(guān)。在進(jìn)行（KEGG）通路富集分析出來(lái)的23條信號(hào)通路中發(fā)現(xiàn)NF-κB信號(hào)通路相關(guān)性較大，NF-κB作為信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的重要樞紐，在心血管復(fù)雜的生理病理過(guò)程中起著重大影響。闡明其病理機(jī)制和NF-κB兩者的相互關(guān)系有利于防治心血管疾病。

表2 人參湯作用于冠心病的蛋白的富集通路表

圖6 人參湯中NF-κB信號(hào)通路潛在靶基因的KEGG通路分析

表3 人參湯中主要活性成分?人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)分子對(duì)接結(jié)果

圖7 人參湯對(duì)冠心病作用靶點(diǎn)分子對(duì)接的結(jié)合活性

本研究發(fā)現(xiàn)炎癥相關(guān)的信號(hào)通路主要富集在NF-κB信號(hào)通路，通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κB及相關(guān)因子，減少TNF-α、IL-1β、NO等炎癥因子的釋放，阻礙其致炎作用。核因子κ因作為一種起重大作用的轉(zhuǎn)錄因子，存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞中，參與著機(jī)體的免疫應(yīng)答，防御功能及炎癥反應(yīng)有關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控[8]。國(guó)外文獻(xiàn)有資料已證實(shí)，NF-κB可調(diào)節(jié)多種參與炎癥、免疫、細(xì)胞增殖反應(yīng)的細(xì)胞因子、粘附分子、炎癥介質(zhì)、蛋白酶的基因表達(dá)，從而影響生物合成[9]。最新研究發(fā)現(xiàn)，核因子κ因（NF-κB）基因被克隆30多年來(lái)，人們對(duì)它的研究日趨深入，已發(fā)現(xiàn)一系列受其調(diào)控的基因，這些靶基因產(chǎn)物在大量參與了細(xì)胞生存、增值和分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡衰老等多個(gè)環(huán)節(jié)的心血管疾病病理過(guò)程[10]。NF-κB可通過(guò)調(diào)控促炎因子TNFα、IL-1α及COX-2和iNOS誘導(dǎo)酶等基因編碼來(lái)參與炎癥反應(yīng)[11]。潘海燕[12]等認(rèn)為NF-κB及AP-1對(duì)心肌組織中異位胰蛋白酶及促炎細(xì)胞因子的調(diào)控作用。陳濤[13]等研究表明，NF-κB調(diào)控致炎因子、粘附分子等多種細(xì)胞因子的表達(dá)，這些因子促進(jìn)單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）轉(zhuǎn)錄激活，并進(jìn)一步促進(jìn)粥樣硬化病灶的形成。因此可知，動(dòng)脈粥樣硬化病變主要是受趨化因子單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）的調(diào)控。NF-κB在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中起著直接間接的作用。并已有國(guó)外文獻(xiàn)研究表明，NF-κB在單核細(xì)胞趨化蛋白1（MCP-1）扮演著轉(zhuǎn)錄激活的作用。肺炎鏈球菌感染刺激人內(nèi)細(xì)胞MCP-1基因表達(dá)需要NF-κB信號(hào)通路的激活[14]。由此可發(fā)現(xiàn)，NF-κB參與血管炎性反應(yīng)與動(dòng)脈粥樣硬化病灶發(fā)生發(fā)展密切有關(guān)。郝進(jìn)[15]等發(fā)現(xiàn)活化補(bǔ)體成分誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞生成IL-8及MCP-1由NF-κB途徑調(diào)控，進(jìn)而促進(jìn)缺血心肌的血管生成，Psel基因啟動(dòng)子促進(jìn)Psel基因的表達(dá)，在2 h時(shí)能檢測(cè)到這種增高。并定向歸巢于缺血心肌，其作用與NF-κB介導(dǎo)的微血管內(nèi)皮細(xì)胞引發(fā)的損傷后反饋有關(guān)。由此可見(jiàn)，人參湯主要通過(guò)影響血流動(dòng)力學(xué)和組織代謝、細(xì)胞增殖、分裂，分化、凋亡和抵抗各種刺激的反應(yīng)，如氧化應(yīng)激、炎癥、缺血等而發(fā)揮治療冠心病的作用。

AP-1是腫瘤壞死因子受體，也是參與多種信號(hào)通路的關(guān)鍵受體。潘海燕[16]等認(rèn)為AP-1參與調(diào)控多種炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子的表達(dá)。如李群益[17]等發(fā)現(xiàn)人參皂苷代謝產(chǎn)物通過(guò)抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α），從而誘導(dǎo)支氣管上皮細(xì)胞分泌RANTES，此誘導(dǎo)機(jī)制跟抑制AP-1對(duì)下游靶基因的調(diào)控有關(guān)。TNF作為一種能夠直接殺傷腫瘤細(xì)胞而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)明顯毒性的細(xì)胞因子，是目前所發(fā)現(xiàn)直接殺傷腫瘤作用最強(qiáng)的生物活性因子之一?？煞譃門NF-α，TNF-β兩種，TNF家族除這兩種外還發(fā)現(xiàn)約30種。在本研究中作為腫瘤壞死因子信號(hào)通路，具有明顯的生物學(xué)功能，通過(guò)引發(fā)炎癥從而致細(xì)胞生長(zhǎng)分化和凋亡，并在血管內(nèi)皮損傷過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。TNF-的是一個(gè)強(qiáng)有力的炎癥介質(zhì)，體外循環(huán)前后出現(xiàn)不同程度的升高，可能與刺激激活了機(jī)體的炎癥反應(yīng)有關(guān)。體外循環(huán)過(guò)程中這種變化雖不是一種損害，是機(jī)體對(duì)損傷的一種生理反應(yīng)過(guò)程[18]。而這一過(guò)程間接的引發(fā)了微血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，從而參與血管炎性反應(yīng)與動(dòng)脈粥樣硬化病灶發(fā)生發(fā)展。

綜上所述，人參湯現(xiàn)今臨床上廣泛用于多種心臟疾病，如心肌梗死、心衰及心律失常尤其是冠心病心絞痛，在改善心肌供血、抑制炎性反應(yīng)、抗動(dòng)脈粥樣硬化、減少心肌氧耗等均有較好的療效。本研究通過(guò)應(yīng)用分子對(duì)接和系絡(luò)藥理學(xué)等方法，從整體性，系統(tǒng)性來(lái)分析人參湯多成分、多途徑、多靶點(diǎn)協(xié)同作用在干預(yù)冠心病的作用原理，充分體現(xiàn)了中藥復(fù)方在治療疾病的整體性和綜合性特點(diǎn)。在系統(tǒng)藥理學(xué)的研究過(guò)程中，本研究結(jié)果只初步預(yù)測(cè)了人參湯相關(guān)藥理學(xué)作用和相關(guān)機(jī)制。還尚未發(fā)現(xiàn)人參湯和冠心病存在明確的靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)關(guān)系，需進(jìn)一步對(duì)其治療疾病具體作用機(jī)制進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，利用高效液相和質(zhì)譜分析的手段進(jìn)一步分析其入血成分。更需要進(jìn)行更深入的研究以明確人參湯治療冠心病的間接調(diào)控作用如：腸道菌群調(diào)節(jié)、外泌體調(diào)節(jié)等，同時(shí)拓寬人參湯的用藥思路。