張佳音 王越

摘要：本文描述了用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬果中的吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素6種農(nóng)藥殘留的方法確認(rèn)。結(jié)果表明，此方法標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)為0.99917～0.99999，方法檢出限為0.006mg/kg～0.01mg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0%～4.88%之間，平均加標(biāo)回收率在97.8%～104%之間。本文提供了一種簡(jiǎn)便、高效的多農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，適用于大批量樣品分析。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜;農(nóng)藥殘留;同時(shí)測(cè)定;方法確認(rèn)

中圖分類號(hào)：TS255.7 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： ?A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.038

1 儀器與材料

1.1 儀器設(shè)備

高效液相色譜儀帶紫外檢測(cè)器： LC 1260;電子分析天平： PL602E/02;勻漿機(jī)： FA25;水浴鍋： XMTD-204;氮吹儀： TTL-DCII。

1.2 試劑材料

吡蟲啉、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)品：農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津），1000mg/L;多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品：農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（天津），500mg/L;乙腈、甲醇、二氯甲烷：色譜純;水：純凈水;氯化鈉：140℃烘烤4h;氨基柱;有機(jī)濾膜：孔徑0.22μm;黃瓜。

2 方法

2.1前處理方法

將蔬菜水果樣品充分粉碎混勻。稱取35.0g，加70.0mL乙腈，高速勻漿1min～2min，經(jīng)濾紙過濾，將濾液完全收集到裝有6g氯化鈉的100mL具塞量筒內(nèi)，劇烈震蕩使其充分萃取，室溫下靜置20min～30min，吸取10.0mL上層有機(jī)相溶液，轉(zhuǎn)移至50mL燒杯中，放入水浴鍋中70℃蒸發(fā)至近干，加入2.0mL甲醇+二氯甲烷（5+95），待凈化。

用4.0mL甲醇+二氯甲烷（5+95）預(yù)淋洗氨基柱，棄去淋洗液，立即加入待凈化溶液，將洗脫液收集到50mL燒杯中，用4.0mL甲醇+二氧甲烷（5+95）洗燒杯繼續(xù)洗脫，重復(fù)一次。將盛有10ml洗脫液的燒杯放入水浴鍋中，溫度37℃，蒸發(fā)近干，用甲醇+水（3+2）準(zhǔn)確定容至5.0mL?；靹蚝?，過有機(jī)濾膜，待測(cè)。

2.2 高效液相色譜儀測(cè)定條件

色譜柱：C18（3.0mm×250mm）;流動(dòng)相：甲醇+乙腈（7+3），水;柱箱溫度：40.0℃;進(jìn)樣體積：10μL;流速：0.8ml/min;外標(biāo)法定量。

流動(dòng)相時(shí)間程序：0.00min，水相+有機(jī)相（40+60）;7.00min，水相+有機(jī)相（40+60）;13.00min，水相+有機(jī)相（20+80）;19.00min，水相+有機(jī)相（10+90）;30.00min，水相+有機(jī)相（5+95）;30.01min，水相+有機(jī)相（60+40）;35.00min，水相+有機(jī)相（60+40）。

3 方法確認(rèn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

3.1 線性及校準(zhǔn)確認(rèn)實(shí)驗(yàn)

3.1.1 分析步驟 將農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液用甲醇稀釋配制成濃度分別為0.0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照2.2條件測(cè)定，測(cè)定結(jié)果以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程與相關(guān)系數(shù)。

3.1.2 結(jié)果 吡蟲啉線性方程為y=64.5x，r=0.99917;多菌靈線性方程為y=30.7x，r=0.99990;除蟲脲線性方程為y=39.6x，r=0.99997;滅幼脲線性方程為y=41.4x，r=0.99999;辛硫磷線性方程為y=32.4x，r=0.99995;阿維菌素線性方程為y=29.8x，r=0.99972。

3.2 方法檢出限和方法定量限確認(rèn)實(shí)驗(yàn)

3.2.1 分析步驟 在黃瓜樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成一系列低濃度的加標(biāo)樣品，經(jīng)2.1前處理方法處理，按2.2條件測(cè)定。記錄待測(cè)農(nóng)藥的信噪比，當(dāng)信噪比為3∶1時(shí)，則該溶液濃度為方法檢出限，當(dāng)信噪比為10∶1時(shí)，則該溶液濃度為方法定量限。

3.2.2 結(jié)果 吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素的方法檢出限分別為0.006mg/kg、0.01mg/kg、0.008mg/kg、0.008mg/kg、0.008mg/kg、0.009mg/kg，方法定量限分別為0.02mg/kg、0.035mg/kg、0.025mg/kg、0.025mg/kg、0.025mg/kg、0.03mg/kg。

3.3 方法精密度試驗(yàn)

3.3.1 分析步驟 在黃瓜樣品中按下述方法進(jìn)行加標(biāo)：吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素6種農(nóng)藥設(shè)置一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個(gè)添加水平，每個(gè)濃度做6個(gè)平行。經(jīng)2.1前處理方法處理，按2.2條件測(cè)定，計(jì)算RSD。

3.3.2 結(jié)果 一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個(gè)添加水平下，吡蟲啉的RSD分別為2.38%、0.99%、3.01%;多菌靈分別為1.17%、1.17%、1.59%;除蟲脲分別為2.99%、1.48%、2.99%;滅幼脲分別為2.01%、1.04%、0%;辛硫磷分別為2.04%、1.66%、2.15%;阿維菌素分別為4.88%、0.87%、1.76%。

3.4 方法加標(biāo)回收試驗(yàn)

3.4.1 分析步驟 在黃瓜樣品中按下述方法進(jìn)行加標(biāo)：6種農(nóng)藥設(shè)置一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個(gè)添加水平，每個(gè)濃度做1個(gè)空白樣品和3個(gè)加標(biāo)平行樣品。經(jīng)2.1前處理方法處理，按2.2條件測(cè)定，計(jì)算加標(biāo)回收率平均值。

3.4.2 結(jié)果 一倍定量限、兩倍定量限、十倍定量限3個(gè)添加水平下，吡蟲啉的平均加標(biāo)回收率分別為110%、103%、103%;多菌靈分別為100%、101%、99%;除蟲脲分別為101%、101%、100%;滅幼脲分別為103%、100%、100%;辛硫磷分別為104%、103%、104%;阿維菌素分別為97.8%、100%、97.8%。

4 結(jié)果與討論

本文建立了高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜水果中吡蟲啉、多菌靈、除蟲脲、滅幼脲、辛硫磷、阿維菌素的含量，并進(jìn)行了方法確認(rèn)。結(jié)果表明，應(yīng)用此方法同時(shí)測(cè)定6種農(nóng)藥分離效果好，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)高、方法檢出限及方法定量限低、方法精密度高、方法加標(biāo)回收率良好。符合《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制范圍 食品理化檢測(cè)》（GB/T 27404-2008）檢測(cè)方法確認(rèn)的技術(shù)要求。本方法具有前處理過程簡(jiǎn)單、可操作性強(qiáng)的特點(diǎn)，可以快速、準(zhǔn)確的同時(shí)測(cè)定大批量蔬果中6種農(nóng)藥的殘留量，在一定程度上有助于提升實(shí)驗(yàn)室農(nóng)殘檢測(cè)的工作效率。

參考文獻(xiàn)

[1]GB/T 27404-2008，實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制范圍 食品理化檢測(cè)[S].

[2]劉謙，顏紅，等.蔬菜、水果中的吡蟲啉、多菌靈和5種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留測(cè)定[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2013，34（02）：24-28.

作者簡(jiǎn)介：張佳音，碩士研究生，實(shí)習(xí)研究員，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè);王越，碩士研究生，助理研究員，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)。