王麗英 袁瑞敏

（承德市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測中心，河北 承德 067000）

承德作為習(xí)近平總書記定位的京津冀水源涵養(yǎng)功能區(qū)，水源充沛、氣候適宜、生態(tài)優(yōu)良、土壤條件較好，發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)和條件得天獨(dú)厚。近年來，我市構(gòu)建起“一環(huán)六帶” 生態(tài)特色農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)布局和產(chǎn)業(yè)體系，特別是蔬菜產(chǎn)業(yè)呈現(xiàn)出強(qiáng)勁的發(fā)展勢頭，確保食品安全重要手段的安全快速度檢測技術(shù)，也起到越來越重要的作用。由于許多食品原材料大量使用農(nóng)藥、激素、抗生素等有害物質(zhì)使食品中毒現(xiàn)象時有發(fā)生，且突發(fā)性強(qiáng)，蔓延迅速。常規(guī)的農(nóng)藥殘留分析方法利用氣相色譜儀、液相色譜儀、質(zhì)譜儀或各種光譜儀等大型精密儀器來進(jìn)行農(nóng)藥殘留，基于色譜和質(zhì)譜的分析方法檢測精度高、重復(fù)性好，是農(nóng)藥殘留定量檢測分析的主要方式。但這些方法不僅需要大型的儀器設(shè)備，而且需要比較復(fù)雜的前處理過程、儀器設(shè)備昂貴、檢測時間較長、要求熟練的技術(shù)人員才能完成等問題，既無法適應(yīng)大批量快速檢測的需要也不能滿足樣品現(xiàn)場快速檢測的要求，迫使人們運(yùn)用新的原理和方法去開發(fā)特異性強(qiáng)、靈敏度高、方便快捷、準(zhǔn)確安全的快速檢測新技術(shù)。

一、農(nóng)產(chǎn)品安全快速檢測技術(shù)

從對我各市縣（區(qū)）調(diào)查結(jié)果來看我市各縣、區(qū)檢測中心及鄉(xiāng)鎮(zhèn)檢測站主要采取的農(nóng)產(chǎn)品快速檢測方法主要為酶抑制法、酶聯(lián)免疫法。

（一）酶抑制技術(shù) 酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、在國內(nèi)應(yīng)用最廣泛的速測技術(shù)之一，是利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制膽堿酯酶(ChE)的特異性生化反應(yīng)。膽堿酯酶主要分為乙酰膽堿酯酶(ACHE)和丁酰膽堿酯酶(BcllE)，農(nóng)藥對其抑制由于來源不同而有差異，對農(nóng)殘的檢測精度也因不同品種的農(nóng)藥產(chǎn)品而不同。目前，依據(jù)酶抑制法原理設(shè)計(jì)并廣泛使用的農(nóng)藥殘留檢測方法主要有速測卡法（紙片法）、比色法（分光光度法）。

1.比色法（分光光度法）?！禛B/T 18630—2002 蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的簡易檢驗(yàn)方法酶抑制法》和《NY/T 448—2001蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留毒快速檢測方法》均為比色法（分光光度法）。乙酰膽堿酯酶水解后，水解產(chǎn)物可與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測定吸光度隨時間的變化 值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑 量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。但是酶抑制法只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥，且對同類、不同種農(nóng)藥的抑制率差別很大。它具有短時間能夠檢測大量蔬菜樣本，檢測成本低對于檢測人員技術(shù)水平要求低，易于在基層推廣等特點(diǎn)，是目前我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法，也是目前國內(nèi)和我市應(yīng)用最為廣泛的農(nóng)藥殘留快速檢測方法。

2.農(nóng)藥殘留速測卡農(nóng)藥殘留速測卡法（紙片法）。農(nóng)藥殘留速測卡又名農(nóng)藥殘留快速檢測卡、農(nóng)藥殘留檢測卡、農(nóng)殘速測卡。是以國家2003年公布的農(nóng)藥殘留快速檢測的標(biāo)準(zhǔn)方（《GB/T 5009.199—2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》）為原理，利用對有機(jī)磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥高敏感的膽堿酯酶和顯色劑做成的試紙，利用迅速產(chǎn)生明顯顏色的化學(xué)反應(yīng)檢測待測物質(zhì)，通過與標(biāo)準(zhǔn)比色卡進(jìn)行目視定性或半定量分析。速測卡法與一般的儀器分析方法相比，具有價格便宜，操作相對簡便，結(jié)果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護(hù)，具有一定的靈敏度和專一性等一系列優(yōu)點(diǎn)，非常適于食品安全的現(xiàn)場檢測。

酶抑制法的優(yōu)缺點(diǎn)：

（1）該方法具有快速方便、前處理簡單、成本較低等優(yōu)點(diǎn)，適用于現(xiàn)場定性測定，特別適合在蔬菜生產(chǎn)基地、批發(fā)市場及農(nóng)產(chǎn)品檢測部門開展快速檢測工作。

（2）該方法可對有農(nóng)藥殘留的蔬菜進(jìn)行粗篩，將一部分農(nóng)藥殘留含量較高的蔬菜控制在市場之外，避免因農(nóng)藥殘留發(fā)生中毒事件

（3）酶試劑易失活，導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定，檢測結(jié)果誤差較大，重復(fù)性不好，實(shí)際應(yīng)用中的確認(rèn)率大約為 60%~70%左右。

（4）存在檢測盲區(qū)，只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥，不能檢測有機(jī)氯類、菊酯和其它類別的劇毒農(nóng)藥。

（5)不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、茭白、蘑菇、花椒等 14 種容易出現(xiàn)假陽性的農(nóng)產(chǎn)品。

另外該方法僅適用于基層初檢。在發(fā)現(xiàn)超標(biāo)現(xiàn)象時，必須用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行復(fù)測確證，這在《農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法》第36條第二款中有明確的規(guī)定，對于陰性結(jié)果，也應(yīng)按比例進(jìn)行抽樣，采用可靠的方法進(jìn)行復(fù)測和確證。

二、農(nóng)產(chǎn)品快速檢測標(biāo)準(zhǔn)

各縣市目前使用的檢測標(biāo)準(zhǔn)主要有《GB/T 18630—2002 蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的簡易檢驗(yàn)方法酶抑制法》、《GB/T 5009.199—2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》和《NY/T 448—2001蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留毒快速檢測方法》

中國現(xiàn)行的3個蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量快速檢測標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施均達(dá)10年或10年以上。而近10年來，中國多次修訂了有關(guān)農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，最新版本為《GB 2763—2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》已于2017年6月18日起實(shí)施；最近幾年，速測產(chǎn)品及其配套試劑都得到了快速發(fā)展，并且在實(shí)際應(yīng)用中積累了大量實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，為下一步修訂和更新蔬菜中有機(jī)磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量快速檢測標(biāo)準(zhǔn)打下了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

三、儀器設(shè)備及檢測方法在使用中存在問題及建議

（一）存在問題。一是目前的快速檢測儀器只能夠?qū)μ囟悇e的農(nóng)藥進(jìn)行定性檢測（有機(jī)磷和氨基甲酸酯類），不能檢測有機(jī)氯、菊酯和其他類農(nóng)藥；二是酶試劑容易失活，反應(yīng)不穩(wěn)定，檢測結(jié)果誤差較大，重復(fù)性不好；三是快速檢測設(shè)備靈敏度低，檢測數(shù)據(jù)結(jié)果穩(wěn)定性差，個別檢驗(yàn)方法繁瑣，假陽性率偏高等。四是某些蔬菜在檢測過程中容易出現(xiàn)假陽性，影響判斷。

（二）建議。一是引進(jìn)新型的速測儀器，能夠?qū)ζ渌愞r(nóng)藥進(jìn)行檢測，改進(jìn)檢測方法，提高速測結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。二是應(yīng)增加對有機(jī)氯、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的快速檢測方法。三是提高試劑盒廠家準(zhǔn)入門檻，從而提高試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性。