尹祖興

（德宏職業(yè)學(xué)院 云南 德宏 678400）

為探討構(gòu)建家犬的人工膀胱反射弧，通過改變體反射運(yùn)動(dòng)沖動(dòng)經(jīng)，使膀胱能夠接受到運(yùn)動(dòng)傳出支的刺激[1]，從而引起膀胱自主收縮，以恢復(fù)脊髓損傷后的膀胱功能，我們對6條雄性犬構(gòu)建一條“膝腱-脊髓中樞-膀胱”人工反射通路，家犬的膝腱反射中樞位于L4-L6脊髓節(jié)段，支配膀胱的脊神經(jīng)S2-S4脊髓節(jié)段，通過實(shí)驗(yàn)，刺激家犬右側(cè)膝腱以達(dá)到激發(fā)排尿的目的。具體研究如下。

一、材料與方法

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與儀器

選取6只雄性家犬，體重介于12.5-15kg之間，隨機(jī)將6只家犬進(jìn)行編號(hào)。 其中，1-4號(hào)家犬觀察術(shù)后6個(gè)月的近期結(jié)果，5、6號(hào)家犬觀察術(shù)后18個(gè)月的遠(yuǎn)期結(jié)果。6只家犬的左側(cè)均為對照組，右側(cè)為實(shí)驗(yàn)組。儀器：BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、刺激及記錄電極、手術(shù)顯微鏡、手術(shù)器械等。經(jīng)對比納入此次研究的實(shí)驗(yàn)家犬的身體狀況、犬齡、是否有疾病等其它一般資料，所有的家犬差異不明顯，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異無意義，P ＞ 0.05。

（二）方法

1.神經(jīng)吻合

利用3%戊巴比妥鈉溶液25mg/kg對家犬進(jìn)行靜脈麻醉。麻醉成功后，為了充分暴露出家犬的馬尾神經(jīng)，需要切除其椎板并切開硬膜囊。 對神經(jīng)根的定位可以采取解剖和電刺激的方式，將同一平面的右L5、右S2前根切斷。將右L5前根近端與S2前根遠(yuǎn)端，在顯微鏡下行神經(jīng)外膜縫合，做好標(biāo)記，注意保持右L5后根的完整。1-4號(hào)家犬觀察術(shù)后6個(gè)月的近期結(jié)果，5、6號(hào)家犬觀察術(shù)后18個(gè)月的遠(yuǎn)期結(jié)果。

2.電生理觀察

分別再吻合口遠(yuǎn)端神經(jīng)干及左側(cè)S2前根置記錄電極，在右L5后根及S2后根置刺激電極，利用BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)刺激神經(jīng)根，并記錄動(dòng)作電位曲線，系統(tǒng)均以單相方波刺激，以左側(cè)S2前根置記錄電極，S2后根置刺激電極的結(jié)果做為對照。于T10椎管平面銳性橫斷脊髓, 制成完全性截癱模型后，繼續(xù)進(jìn)行電生理觀察。

3.膀胱測壓觀察

平面截癱1-6號(hào)家犬的T10椎管，模擬完全性截癱模型。將合適的導(dǎo)尿管經(jīng)后尿道小切口插入膀胱，縫合切口后連接尿流動(dòng)力學(xué)三導(dǎo)程簡易測壓計(jì)，并向膀胱注入生理鹽水約150ml。利用BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)分別刺激右L5前根吻合口近端、右L5后根、左S2前根、左L5后根及右側(cè)股神經(jīng)，以2次/s的頻率分別用醫(yī)用叩診錘敲擊，右側(cè)膝腱、左側(cè)膝腱各敲擊10s。同時(shí)，記錄膀胱壓力增加值（P/kPa）及持續(xù)時(shí)間（t/s）。

4.膀胱逼尿肌肌電圖觀察

將肌電圖記錄電極置入5、6號(hào)家犬的膀胱逼尿肌前壁，靠近膀胱頂部，記錄電極連接至肌電圖儀，調(diào)節(jié)刺激電流分別刺激右L5后根、左S2后根、左L5后根、股神經(jīng)。記錄并打印膀胱逼尿肌肌電圖。

二、結(jié)果

（一）神經(jīng)電生理

6只家犬截癱前和平面截癱T10椎管48小時(shí)后，刺激右側(cè)L5后根，6只家犬的吻合口遠(yuǎn)端均可在右S2前根上監(jiān)測到動(dòng)作電位，對照組與其形態(tài)、波幅相似。

（二）膀胱測壓

實(shí)驗(yàn)記錄6只家犬截癱48小時(shí)后膀胱測壓結(jié)果。4只家犬在術(shù)后6個(gè)月截癱48小時(shí)后，電刺激經(jīng)新建反射弧引出的膀胱收縮的概率，與對照組相比平均可達(dá)66.67%，敲擊右側(cè)膝腱引出的膀胱收縮平均達(dá)正常的52.24%；2只家犬術(shù)后18個(gè)月，相同電流刺激引出的膀胱收縮平均達(dá)正常的85.12%，敲擊膝腱平均達(dá)62.33%。

（三）膀胱逼尿肌肌電圖

在將6只家犬的T10椎管進(jìn)行截癱48小時(shí)后，用電流分別刺激右L5后根、右股神經(jīng)、左S2后根，記錄其肌電圖動(dòng)態(tài)，其中右L5后根和股神經(jīng)均可記錄到肌電圖的波動(dòng)，其動(dòng)態(tài)與左S2后根基本一致，但肌電圖顯示左L5后根不能對電流刺激做出反應(yīng)。

三、討論

脊髓損傷后膀胱功能障礙是社會(huì)和醫(yī)學(xué)一大難題，它所引起的并發(fā)癥也成為了截癱患者最主要的死因。有相關(guān)研究表明[2]，腎功能衰竭是截癱患者死亡的主要原因。目前，骶神經(jīng)根電刺激是唯一應(yīng)用于臨床的方法，但其依然存在效果不恒定等缺點(diǎn)。我們采用構(gòu)建“膝腱-脊髓中樞-膀胱”人工反射通路，通過其他能產(chǎn)生體反射運(yùn)動(dòng)，使興奮經(jīng)異化從而促使運(yùn)動(dòng)傳出支可以傳入膀胱，如敲擊膝腱等，這些刺激可以刺激膀胱產(chǎn)生自主收縮。為了證明這一反射通路是有效的，做了多種實(shí)驗(yàn)，其中電生理和膀胱測壓的實(shí)驗(yàn)均可證實(shí)這一結(jié)果。

綜上所述可得出結(jié)論，為使神經(jīng)獲得良好的傳導(dǎo)運(yùn)動(dòng)興奮的功能，可通過軸突再生的方式讓體神經(jīng)的運(yùn)動(dòng)傳出支與膀胱平滑肌內(nèi)副交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相結(jié)合；利用截癱位置的殘存健體所形成的體反射，采用將神經(jīng)根在硬膜囊內(nèi)吻合的方法，可建立“膝腱-脊髓中樞-膀胱”人工膀胱反射弧，使脊髓損傷的患者恢復(fù)到可自主控制排尿。