王軼凡,孫敬鋒,呂愛軍,胡秀彩,邢克智
(天津農學院水產學院/天津市水產生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室,天津 300384)
魚類腸炎病是由氣單胞菌感染引起的一類常見傳染病。氣單胞菌屬的多種細菌均可導致多種水產動物發(fā)病,常感染鯉魚(Cyprinus carpio)、斑點叉尾(Ictalurus punctatus)、長吻鮠(Leiocassis longirostris)等。蘭壽金魚為鯉科魚類,其作為觀賞魚的一種備受青睞。由于觀賞魚養(yǎng)殖環(huán)境較好,發(fā)病情況并不嚴重,相關疾病報道較少。筆者報道一列蘭壽金魚腸炎病例,發(fā)病地區(qū)為天津市西青區(qū)某觀賞魚市場。
2018年6月,天津市西青區(qū)某觀賞魚市場出現(xiàn)觀賞魚發(fā)病的情況,患病魚主要為蘭壽金魚。金魚體質量平均為150 g、魚體長度平均為16 cm,投喂飼料為觀賞魚顆粒飼料,供氧充足,水質較好。但6月中旬開始氣溫居高不下,發(fā)病金魚出現(xiàn)攝食量減少甚至不吃食,并且每天都會有死亡的現(xiàn)象。發(fā)病金魚體色發(fā)黑,身體側歪,游動緩慢,胸鰭及尾鰭基部充血,腹部腫大,肛門紅腫,輕微外突,疑似為細菌性腸炎。
病魚攝食減少至停止攝食,身體側歪,游動緩慢,反應遲鈍,體色發(fā)黑,皮膚能夠見到出血點,胸鰭及尾鰭基部出現(xiàn)充血癥狀,腹部腫大,肛門紅腫,輕微外突,輕輕按壓腹部有粘液狀物流出。
取病魚解剖可見鰓蓋部充血,鰓絲發(fā)白;腹腔內有腹水;腸道充血、出血,并充斥著膿性黏液,腸道內無任何食物,腸壁彈性喪失;肝臟發(fā)黃、有出血點。病魚腸道組織病理學觀察,顯示腸道腸系膜脫落,大量炎性細胞浸潤,腎臟含有大量含鐵血黃素,腎小管上皮細胞脫落分離,并伴有大量的炎性細胞浸潤。
取瀕死患病蘭壽金魚,在無菌條件下解剖并收集肝臟,腎臟,脾臟和其他患病組織,并將其接種在LB平板上。并且劃線分離。將種平板在28℃恒溫培養(yǎng)箱中進行24 h的培養(yǎng)。定期觀察長成的菌落的形態(tài),選擇優(yōu)勢菌落進行革蘭氏染色,然后將其保種。并提取致病菌的DNA作為總模板,通過gyrB基因和16SrDNA基因的PCR擴增,并進行測序分析,鑒定該菌為維氏氣單胞菌(A.veronii)。
確診患病蘭壽金魚為維氏氣單胞菌引起的細菌性腸炎。診斷依據(jù)患病魚的體表癥狀、解剖組織的病理變化,實驗室的基因檢測及流行病學的理論。
使用五味子、五倍子、黃連、烏梅粉拌餌投喂,并及時補充維生素K3、C,連續(xù)用藥3 d,可以有效抑制維氏氣單胞菌,恢復魚體健康。
魚類腸炎是一類常見傳染病,此例腸炎為氣單胞菌感染引起的細菌性腸炎。氣單胞菌屬多種細菌可導致多種水產動物發(fā)病。維氏氣單胞菌一般來說主要分布于水體和淤泥中的革蘭氏陰性菌,目前被認為是重要的人-獸-魚條件性致病菌,當環(huán)境改變或動物機體免疫力下降時,可引起相關疾病。近年來有文獻報道,維氏氣單胞菌可引起錦鯉、懷頭鯰等魚類疾病,但在蘭壽金魚報道較少。該文以蘭壽金魚腸炎為例,介紹了此類病癥的發(fā)病情況,臨床癥狀,組織變化以及對應的檢測方法,能夠為金魚氣單胞菌腸炎的預防與治療用藥等提供科學依據(jù)。
對發(fā)病情況進行了實地考察,通過了解觀賞魚的養(yǎng)殖環(huán)境較為清潔,并未在魚體發(fā)現(xiàn)寄生蟲大量繁殖現(xiàn)象。腸型點狀氣單胞菌通常是引發(fā)魚類的腸炎的病原,在診斷此例金魚腸炎的方法中,主要結合流行病學的理論、患病魚的臨床癥狀、剖檢組織的病理變化及病原分離鑒定等方法最終確診為腸炎,通過16S rDNA和gyrB基因序列分析,鑒定該病原體為維氏氣單胞菌(A.veronii)。綜合分析,在養(yǎng)殖密度過大、時值盛夏來臨水溫持續(xù)升高、早晚溫差過大的條件下氣單胞菌開始大量孳生,從而引發(fā)了細菌性腸炎。該病發(fā)病前和發(fā)病初期,金魚食欲旺盛,發(fā)現(xiàn)幾尾死魚,技術人員沒有及時進行治療及預防,使金魚出現(xiàn)持續(xù)死亡的現(xiàn)象。
金魚多作為觀賞魚養(yǎng)殖,相對于食用魚,其養(yǎng)殖環(huán)境較好,個體價值更高。建議按時使用消毒劑消毒,發(fā)病季節(jié)潑灑或拌料投喂可以提高魚體免疫力的微生態(tài)制劑,并且能夠抑制有害菌的繁殖生長。如果金魚個體價值較高可以適量使用抗生素。該病例中對分離菌株進行藥敏試驗,致病菌對氯霉素、米諾環(huán)素、呋喃妥因、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢呋辛和頭孢克虧7種藥物高度敏感;對諾氟沙星、頭孢拉定、氨芐西林和苯唑西林4種藥物中度敏感;對克林霉素、卡那霉素、紅霉素等27種藥物耐藥。此結果在臨床腸炎治療中具有重要參考價值。但應注意的是,在治療相應疾病時要慎重的選擇藥物并且謹慎用藥,藥物應用應遵守水產養(yǎng)殖用藥有關規(guī)定及規(guī)范,避免濫用藥物及使用違禁藥物而使細菌產生耐藥性。