李天舒，劉 龍，劉亞男，秦 源

(1.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院機(jī)能科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春130021；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春130033；3.吉林大學(xué)護(hù)理學(xué)院2016級(jí)，吉林 長(zhǎng)春130021)

隨著人民生活水平的發(fā)展，人們逐漸增加自我健康保護(hù)，既往因飲食不規(guī)律，寒冷所導(dǎo)致的胃潰瘍逐漸減少；而人們因?yàn)橥鈧?，重病，其他刺激情況所導(dǎo)致的失血性休克-應(yīng)激性胃潰瘍比重逐漸增高，尤其缺血再灌注后加重了胃黏膜的潰瘍程度[1]，導(dǎo)致在臨床上治療效果不佳?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)教學(xué)內(nèi)容也應(yīng)隨著疾病的發(fā)展而創(chuàng)新，為了讓同學(xué)們對(duì)疾病有新的了解，我們創(chuàng)新了傳統(tǒng)的病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)“大鼠應(yīng)激性胃潰瘍”實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法，以往實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括應(yīng)激性胃潰瘍的兩種模型的復(fù)制：倒置法和冷儲(chǔ)法。實(shí)驗(yàn)前將大白鼠24 h禁食，自由飲水，然后通過倒置法和冷儲(chǔ)法復(fù)制大鼠應(yīng)激性胃潰瘍模型[2]?，F(xiàn)通過實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法的創(chuàng)新，將基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)問題緊密聯(lián)系，聯(lián)合藥物對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍模型的治療及缺血再灌注損傷機(jī)制探討，幫助同學(xué)更好的了解應(yīng)激性胃潰瘍的發(fā)生機(jī)制和藥物抗應(yīng)激性胃潰瘍的原理。通過實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法的創(chuàng)新，引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)，從而培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力[3]。

1 失血性休克大鼠應(yīng)激性胃潰瘍動(dòng)物模型的建立

1.1將大白鼠分為三組，空白對(duì)照組，給藥組，模型組?？瞻讓?duì)照組：正常飲食飲水；給藥組和模型組：術(shù)前24 h禁食，自由飲水，倒置和冷儲(chǔ)2 h。

1.2大鼠麻醉固定，頸部手術(shù)，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈和一側(cè)頸外淺靜脈，頸動(dòng)脈插管(用靜脈留置針插管方便記錄血壓及放血比較簡(jiǎn)潔方便)，記錄血壓，插頸外淺靜脈備再灌注用。通過頸總動(dòng)脈靜脈留置針放血至平均動(dòng)脈壓40 mmHg，給藥組給藥。10 min后經(jīng)靜脈插管回輸血液(放出的動(dòng)脈血里含少量肝素生理鹽水)，所有動(dòng)物90 min后處死，找到大鼠的胃，分別結(jié)扎幽門和賁門，在結(jié)扎線的外側(cè)剪斷胃與食管、十二指腸連接處。取出胃，向胃腔內(nèi)注射10%甲醛溶液10 ml,再將胃放入甲醛溶液浸泡15 min。

1.3將胃平展在玻璃平皿上，觀察空白對(duì)照組，模型組，給藥組胃黏膜潰瘍的大小及數(shù)目，進(jìn)行胃黏膜組織損傷潰瘍指數(shù)判定(分7度)[4]。

1.4取胃粘膜組織進(jìn)行超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)，黃嘌呤氧化酶(XOD)測(cè)定。

1.5在實(shí)驗(yàn)教師的指導(dǎo)下，同學(xué)們進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理，分析疾病發(fā)生機(jī)制和相關(guān)藥物治療機(jī)制。

2 結(jié)果

2.1通過“失血性休克-應(yīng)激性胃潰瘍實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)”使同學(xué)們掌握了復(fù)制失血性休克-應(yīng)激性胃潰瘍動(dòng)物病理模型的方法。以往大鼠應(yīng)激性胃潰瘍實(shí)驗(yàn)內(nèi)容比較單一，只是通過簡(jiǎn)單的冷藏，倒立復(fù)制胃潰瘍模型，同學(xué)對(duì)實(shí)驗(yàn)不感興趣。通過實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法的創(chuàng)新，新實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物手術(shù)操作比較復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容緊密聯(lián)系臨床實(shí)際以及最新抗?jié)兯幬锏闹委熯M(jìn)展，增強(qiáng)了同學(xué)們對(duì)醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)的興趣，也提高了同學(xué)們手術(shù)操作能力，為今后臨床外科工作奠定了基礎(chǔ)。

其中本實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新的方法用靜脈留置針代替了傳統(tǒng)的動(dòng)靜脈插管，由于大鼠動(dòng)靜脈管徑小，一般插管極易凝血，靜脈留置針管壁由于特殊原料抗凝血效果好，使動(dòng)脈放血過程更加便利，減少了凝血因素帶來的困擾。

2.2測(cè)定動(dòng)物血清MDA，SOD。MDA是組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，胃組織MDA顯著增高，與胃潰瘍指數(shù)呈正比[5]，SOD為超氧化物歧化酶，其作用是催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，防止氧化損傷的發(fā)生[6]，通過實(shí)驗(yàn)讓同學(xué)了解失血性休克再灌注后，氧自由基參與胃潰瘍的發(fā)生，SOD值在再灌注后顯著下降是由于強(qiáng)烈的應(yīng)激作用會(huì)導(dǎo)致大鼠體內(nèi)組織超氧化物歧化酶含量降低。通過這些指標(biāo)的變化，可以幫助同學(xué)們熟悉應(yīng)激性胃潰瘍的發(fā)生機(jī)制。

3 結(jié)語

人類疾病動(dòng)物模型已成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)生命科學(xué)客觀規(guī)律的主要工具，通過研究動(dòng)物模型，可更加準(zhǔn)確地觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從而有助于人們更深刻地認(rèn)識(shí)人類疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和采取更有效的防治措施[7]。

復(fù)制應(yīng)激性胃潰瘍動(dòng)物模型有很多種，如饑餓，冷藏，電擊，休克[8]。近年來臨床由于外傷，重病及其他刺激情況下，出現(xiàn)胃、十二指腸黏膜急性病變?cè)龆?，?dāng)胃黏膜潰瘍惡化侵蝕大血管時(shí)，可引起大出血，導(dǎo)致的失血性休克-應(yīng)激性胃潰瘍比重逐漸增高，尤其缺血再灌注后加重了胃黏膜的潰瘍程度。醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)教學(xué)是培養(yǎng)臨床醫(yī)學(xué)生通過對(duì)功能異常的動(dòng)物病例模型的復(fù)制和藥物的應(yīng)用有機(jī)結(jié)合，更貼近于臨床實(shí)際，更好地為醫(yī)學(xué)生奠定醫(yī)學(xué)知識(shí).實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的復(fù)制對(duì)于研究疾病大發(fā)生機(jī)制，起著十分重要的作用。因此我們?cè)凇按笫髴?yīng)激性胃潰瘍”傳統(tǒng)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法的創(chuàng)新，增加藥物對(duì)應(yīng)激性胃潰瘍模型的治療及缺血再灌注損傷機(jī)制探討?？墒雇瑢W(xué)們更加全面了解疾病的發(fā)生機(jī)制，幫助同學(xué)們未來學(xué)習(xí)臨床醫(yī)學(xué)知識(shí)奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)知識(shí)。