■何凌云 周銘文 孫云章 宋 凱 葉繼丹

（集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院廈門市飼料檢測與安全評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建廈門361021）

?；撬崾且环N含磺酸基的氨基酸，是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)含量最多的氨基酸，但它并不參與蛋白質(zhì)的合成[1]。?；撬嵊泻芏嘀匾纳飳W(xué)作用[2-3]，如與膽酸合成膽汁酸，使其限速酶膽固醇7α-羧化酶的活性升高，加強(qiáng)膽固醇向膽汁酸轉(zhuǎn)化的能力[4]，促進(jìn)脂肪的合成與代謝。?；撬崾嵌鄶?shù)動(dòng)物機(jī)體的一種條件性必需氨基酸，其自身（貓科和狐貍除外）有一定合成牛磺酸的能力[5]，但其合成能力又與動(dòng)物種類、個(gè)體營養(yǎng)狀況、蛋白質(zhì)進(jìn)食量和胱氨酸有效性有關(guān)[6]。與陸生恒溫動(dòng)物相比，魚類合成牛磺酸的能力均較低，并且這一能力在肉食性魚類及幼齡魚上表現(xiàn)得尤為明顯，其體內(nèi)?；撬岷铣闪看蠖嗖荒軡M足正常生長所需，需要從外源（食物）供給[5]。飼料中添加牛磺酸能顯著提高斜帶石斑魚（Epinepheluscoioides）[7]、黃尾鰤（Seriola quinqueradiata）[8]和大菱鲆（Scophthalmusmaximus L.）[9]的生長性能，當(dāng)飼料中?；撬岵蛔銜r(shí)，會(huì)降低真鯛（Pagrus major）[10]和牙鲆（Paralichthys olivaceus）[11]的生長性能。由于陸生植物?；撬岷亢艿突虿缓；撬?，而魚粉（包括其他動(dòng)物產(chǎn)品）中牛磺酸含量較高，這在配制生產(chǎn)以植物蛋白源為主要蛋白源的水產(chǎn)飼料時(shí)如何合理使用牛磺酸，有針對(duì)性地為養(yǎng)殖魚類提供個(gè)性化的飼料配制方案，實(shí)現(xiàn)養(yǎng)殖魚類的最佳生長等方面有積極意義。近年來，國內(nèi)外學(xué)者研究了草魚（Ctenopharyngodon idellus）[12]、斜帶石斑魚[13]、虹鱒（Oncorhynchus mykiss）[14]、牙鲆[15]、鱸魚（Lateolabrax japonicus）[16]等多種養(yǎng)殖魚類對(duì)?；撬岬男枰?。目前關(guān)于尼羅羅非魚對(duì)飼料中?；撬岬倪m當(dāng)需求量已有研究[17]，但尼羅羅非魚在關(guān)鍵生長期中的不同階段對(duì)?；撬嵝枰挠绊戇€未見報(bào)道，因而，該試驗(yàn)?zāi)康氖菫檠芯匡暳吓；撬岷亢筒煌L階段對(duì)尼羅羅非魚生長性能的影響，為尼羅羅非魚飼料中?；撬岬氖褂锰峁┮罁?jù)。

1 材料與方料

1.1 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)用酪蛋白、明膠和牛磺酸（純度為99%）均購自鄭州明瑞化工產(chǎn)品有限公司，維生素預(yù)混料和礦物質(zhì)預(yù)混料均購自廈門嘉康飼料有限公司。該試驗(yàn)是以酪蛋白和明膠（無牛磺酸）作為蛋白源，魚油、大豆油和大豆卵磷脂作為脂肪源，玉米淀粉作為糖源制備成尼羅羅非魚的基礎(chǔ)飼料。然后在飼料中添加比例為0、400、800、1 200 mg/kg的牛磺酸，制備成4種不同?；撬岷康哪崃_羅非魚幼魚試驗(yàn)飼料。當(dāng)飼料中牛磺酸比例增加時(shí)，就相應(yīng)的減少結(jié)晶纖維素比例。試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)水平見表1。酪蛋白和明膠粉碎過篩（80目）。按飼料配方將各種飼料原料充分混勻，再加一定水?dāng)嚢?，用雙螺桿制粒機(jī)制成直徑2.5 mm、3.5 mm的顆粒料，65℃烘箱烘干，裝自封袋密封，備用。

表1 基礎(chǔ)飼料配方及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)，g/kg）

1.2 養(yǎng)殖管理

羅非魚幼魚暫養(yǎng)2周后，從中挑選健康魚400尾（體質(zhì)量約為4.25 g），隨機(jī)分放到16個(gè)的150 L容量的水族箱中，每個(gè)水族箱25尾魚。試驗(yàn)分為4個(gè)飼料處理組，每個(gè)飼料組設(shè)4個(gè)水族箱(重復(fù)組)。

養(yǎng)殖試驗(yàn)期為84 d。養(yǎng)殖過程中，每日投喂兩次（08:30和18:30），每次投喂至表觀飽食。在投喂后0.5 h吸去糞便和殘餌，每次換水量約1/4。將試驗(yàn)期分為3個(gè)生長階段（1～28、29～56、57～84 d），每個(gè)階段為28 d。養(yǎng)殖期間水溫為25～31℃，溶解氧含量為5.7～6.6 mg/l，硝酸鹽氮含量0.10～0.32 mg/l。

1.3 樣品采集

試驗(yàn)在第28、第56 d和第84 d分別對(duì)每個(gè)水族箱的魚稱總重。再放回到原來的水族箱，24 h后，從每個(gè)水族箱中隨機(jī)抽取6尾魚，丁香酚麻醉，逐尾魚稱重并測量體長，解剖并取肝臟、腸等內(nèi)臟，分別稱重。在第84 d時(shí)，從每個(gè)水族箱中隨機(jī)抽取3尾魚用于全體體成分分析。

1.4 樣品測定

測定飼料原料、試驗(yàn)飼料和魚體樣品中的常規(guī)營養(yǎng)成分。水分測定采用105℃烘箱常壓干燥法烘至恒重；粗蛋白質(zhì)測定采用半微量凱氏定氮法；粗脂肪測定采用索氏抽提法；粗灰分測定采用馬弗爐（550℃）灼燒法。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

式中：W0——初始均質(zhì)量（g）；

Wt——終末均質(zhì)量（g）；

Wf——攝食的飼料總量（g）；

Wb——樣品魚的體質(zhì)量（g）；

Wh——樣品魚肝臟質(zhì)量（g）；

Wv——樣品魚內(nèi)臟質(zhì)量（g）；

L——樣品魚體長（cm）；

t——試驗(yàn)天數(shù)（d）。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS17.0進(jìn)行單因素（One-way ANOVA）和雙因素方差（Two-way ANOVA）分析；若結(jié)果差異顯著時(shí)（P＜0.05），則采用Student-Newmnan-Keuls法進(jìn)行多重比較。檢驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SE）”表示。

2 結(jié)果

2.1 飼料中牛磺酸含量對(duì)不同生長階段尼羅羅非魚幼魚生長性能的影響(見表2、表3)

表2 飼料中?；撬岷繉?duì)不同生長階段尼羅羅非魚幼魚生長性能的影響

表3 飼料中?；撬岷亢筒煌L階段對(duì)尼羅羅非魚幼魚生長性能的影響

表4 飼料中?；撬岷浚╔）與尼羅羅非魚幼魚不同生長階段增重率（Y）的關(guān)系

由表2可知，在每一個(gè)生長階段中，飼料中添加牛磺酸對(duì)試驗(yàn)魚的增重率和攝食率有明顯的影響。?；撬崽砑咏M的增重率均明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），且隨著牛磺酸含量的增加表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢。牛磺酸添加組的攝食率明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），且?；撬崽砑咏M之間無明顯差異（P＞0.05）。飼料效率不受飼料中牛磺酸含量的影響（P＞0.05）。表3中，每個(gè)飼料中?；撬岷肯?，試驗(yàn)魚的第1個(gè)生長階段的增重率、飼料效率和攝食率明顯高于第2個(gè)和第3個(gè)生長階段（P＜0.05），飼料中?；撬岷亢筒煌L階段對(duì)增重率和攝食率有明顯的影響（P＜0.05），并存在明顯交互作用。飼料效率不受?；撬岷康挠绊懀≒＞0.05）。

為確定3個(gè)生長階段中尼羅羅非魚幼魚對(duì)飼料?；撬岬男枰浚覀兘⒘肆_非魚增重率與飼料?；撬岷恐g的回歸方程（見表4），擬合得到3個(gè)生長階段下尼羅羅非魚幼魚對(duì)牛磺酸的需要量分別為0.72%、0.68%和0.64%。由此可見，尼羅羅非魚魚齡越大，?；撬岬男枨罅烤驮降?。

2.2 飼料中?；撬岷繉?duì)不同飼喂天數(shù)尼羅羅非魚幼魚形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響（見表5、表6）

由表5可知，無論在哪個(gè)飼喂階段，試驗(yàn)魚的肝體比和臟體比都受到飼料?；撬岷康娘@著影響，添加了?；撬峤M的肝體比和臟體比明顯高于對(duì)照組（P＜0.05），但各牛磺酸組的肝體比、臟體比沒有明顯差異（P＞0.05）；飼料中?；撬岷坎挥绊懛蕽M度（P＞0.05）。從表6可以看出，在每個(gè)飼料中牛磺酸含量下，試驗(yàn)魚的肝體比和臟體比，在飼喂到第28 d時(shí)明顯高于飼喂到第56 d和第84 d時(shí)（P＜0.05）。飼料中?；撬岷坎挥绊懛蕽M度，但飼喂天數(shù)對(duì)其有顯著的影響（P＜0.05），飼喂到第28 d的肥滿度明顯高于飼喂到第56 d和第84 d（P＜0.05）。

2.3 飼料?；撬岷繉?duì)飼喂84 d尼羅羅非魚幼魚體成分的影響(見表7)

該試驗(yàn)測定了養(yǎng)殖結(jié)束時(shí)各牛磺酸處理組尼羅羅非魚的體成分。由表7可知，?；撬崽砑咏M魚體水分含量明顯低于對(duì)照組（P＜0.05），但各?；撬崽砑咏M之間差異不明顯（P＞0.05）。對(duì)照組魚體粗脂肪和粗蛋白質(zhì)含量明顯低于?；撬崽砑咏M（P＜0.05），且800 mg/kg?；撬峤M的魚體粗脂肪含量明顯高于其它組（P＜0.05）。魚體粗灰分含量不受飼料中牛磺酸含量的影響（P＞0.05）。

表5 飼料中牛磺酸含量對(duì)不同飼喂天數(shù)尼羅羅非魚幼魚形態(tài)指標(biāo)的影響

表6 飼料中?；撬岷亢筒煌曃固鞌?shù)對(duì)尼羅羅非魚幼魚形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響

表7 飼料中牛磺酸含量對(duì)飼喂84 d尼羅羅非魚體成分的影響

3 討論

已有研究顯示，飼料中添加?；撬崮軌蛎黠@促進(jìn)魚類的生長[18-19]。該試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼料中添加一定含量的牛磺酸能夠使尼羅羅非魚幼魚的生長性能明顯提高，而當(dāng)飼料中不添加?；撬釙r(shí)，其生長速度變緩，這與在真鯛[20]、牙鲆[11]和草魚[12]的試驗(yàn)結(jié)果一致，表明飼料牛磺酸含量不足時(shí)會(huì)抑制魚類生長。在該試驗(yàn)的3個(gè)生長階段中，隨著飼料中?；撬岷康脑黾樱鲋芈示尸F(xiàn)先升高后降低的趨勢（見表2），這與在虹鱒[21]、斜帶石斑魚[7]、花鰻鱺（Anguillamarmorata）[22]、青魚（Mylopharyngodonpiceu）[23]的試驗(yàn)結(jié)果類似。

在不考慮飼料中?；撬岷康那闆r下，3個(gè)生長階段中，尼羅羅非魚幼魚的生長速度以第1個(gè)生長階段為最大，第2個(gè)生長階段次之，以第3個(gè)生長階段為最慢（見表3），表明其生長速度隨飼喂天數(shù)的增加而降低，其生長趨勢符合魚類生長的規(guī)律。回歸分析擬合得出試驗(yàn)魚3個(gè)生長階段的適宜?；撬岷糠謩e為0.72%（第1個(gè)生長階段初始體質(zhì)量為4.24 g）、0.68%（第2個(gè)生長階段初始體質(zhì)量為30.14 g）和0.64%（第3個(gè)生長階段初始體質(zhì)量為83.27 g）。由此可見，隨年齡增加，尼羅羅非魚幼魚對(duì)牛磺酸的需要量逐漸減少。雖然本試驗(yàn)中尼羅羅非魚幼魚的生長速度從第1個(gè)生長階段到第3個(gè)生長階段是逐漸降低的，但它們?nèi)允橇_非魚養(yǎng)殖過程中生長速度較快的3個(gè)階段。

無論在試驗(yàn)的哪個(gè)飼喂階段，飼料中添加?；撬崦黠@提高了尼羅羅非魚幼魚的攝食率，表明?；撬釋?duì)尼羅羅非魚幼魚有一定的誘食作用（見表2），該結(jié)果支持了前期的發(fā)現(xiàn)[24]。但該試驗(yàn)中各?；撬崽砑咏M的攝食率沒有明顯差異，說明在滿足?；撬嵝枰那疤嵯?，繼續(xù)增加?；撬岷繘]有進(jìn)一步促進(jìn)尼羅羅非魚幼魚攝食。同時(shí)，每個(gè)生長階段的飼料效率均不受飼料中?；撬岷康挠绊?。由此可以看出，牛磺酸并非是通過提高飼料效率而是通過增加攝食量來提高羅非魚的生長，該研究結(jié)果與在牙鲆[15]中的研究結(jié)果一致。然而，該試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，在飼料中?；撬岷窟^高（1 200 mg/kg?；撬幔?，試驗(yàn)魚的增重率有所下降，原因不明。有人認(rèn)為飼料中添加過量的牛磺酸會(huì)引起其適口性下降[25]，攝食量隨之降低，從而導(dǎo)致魚體生長速度下降。

?；撬岬囊粋€(gè)重要作用是可以與游離膽汁酸結(jié)合形成?；悄懰?，促進(jìn)脂類的消化吸收[26]。由試驗(yàn)結(jié)果可知，牛磺酸添加組魚體粗脂肪含量明顯高于對(duì)照組（見表7），這與在草魚[12]、羅非魚[27]中的研究結(jié)果一致，但與虹鱒[14]、大菱鲆[28]、石斑魚[7]的結(jié)果相反。魚體粗脂肪增加的原因可能是飼料中添加的?；撬岽龠M(jìn)了甲狀腺激素T3分泌，而T3是戊糖磷酸循環(huán)中的重要調(diào)節(jié)因子，主要調(diào)節(jié)其關(guān)鍵酶1,6-磷酸脫氫酶，它的分泌促進(jìn)了脂肪酸合成及其關(guān)鍵酶的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)脂肪合成并在魚體沉積，最終表現(xiàn)為魚體粗脂肪增加[29]。在不考慮飼喂天數(shù)的情況下，試驗(yàn)魚肝體比和臟體比是隨?；撬崽砑颖壤脑黾佣叩?，這與魚體粗脂肪的變化趨勢相似，這可能是牛磺酸與膽固醇結(jié)合形成膽鹽，進(jìn)而激活了肝脂肪酶[30]。另外，在肝臟中，牛磺酸能和膽酸結(jié)合形成膽汁酸，促進(jìn)肝臟脂肪的合成，最終導(dǎo)致肝臟脂肪沉積。該試驗(yàn)中，添加?；撬峤M的魚體粗蛋白質(zhì)含量都高于對(duì)照組，說明飼料中添加牛磺酸可以促進(jìn)尼羅羅非魚幼魚體蛋白質(zhì)的合成，該研究結(jié)果同大菱鲆[9]、細(xì)點(diǎn)牙鯛（Dentex dentex）[30]和塞內(nèi)加爾鰨（Solea senegalensis Kaup）[31]一致，這可能是因?yàn)榕；撬嵩鰪?qiáng)了蛋白質(zhì)合成有關(guān)激素的分泌[32]。在3個(gè)生長階段中，第1個(gè)生長階段（1～28 d）的肝體比和臟體比均明顯高于第2個(gè)生長階段（29～56 d）和第3個(gè)生長階段（57～84 d），且后兩者之間差異不明顯。因此認(rèn)為，尼羅羅非魚幼魚在第1個(gè)生長階段時(shí)身體各器官處于快速發(fā)展的階段，但從第2個(gè)生長階段起，魚體各器官的生理功能都趨向于成體，其生長發(fā)育也呈現(xiàn)出相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)。

4 結(jié)論

飼料中添加適量的?；撬崮軌虼龠M(jìn)尼羅羅非魚幼魚的生長。尼羅羅非魚幼魚在3個(gè)生長階段所需的?；撬岷糠謩e是0.72%（第1個(gè)生長階段初始體質(zhì)量為4.24 g）、0.68%（第2個(gè)生長階段初始體質(zhì)量為30.14 g）和0.64%（第3個(gè)生長階段初始體質(zhì)量為83.27 g），說明隨著年齡增加，尼羅羅非魚幼魚對(duì)?；撬岬男枨罅恐饾u降低。