摘要：本文利用無(wú)菌乳糖干燥粉替代無(wú)菌原料藥做了針對(duì)粉針劑工藝模擬分裝過(guò)程的實(shí)驗(yàn)，將其裝在西林瓶中，采用的驗(yàn)證方法是在西林瓶中加入胰酪胨大豆肉湯液體，在在20-25℃以及30-35℃環(huán)境下培養(yǎng)七天，同時(shí)進(jìn)行陰性與陽(yáng)性的比較。最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果上陰性、陽(yáng)性對(duì)照成立，試驗(yàn)樣品滿足無(wú)菌條件，證明了這一方法的可行性。

關(guān)鍵詞：粉針劑工藝；模擬分裝過(guò)程；驗(yàn)證

粉針劑生產(chǎn)工藝驗(yàn)證過(guò)程中需要綜合考慮各個(gè)方面的因素，需要綜合考慮滅菌系統(tǒng)、公用系統(tǒng)、無(wú)菌環(huán)境保持系統(tǒng)以及螺桿分裝機(jī)清洗消毒方法等多個(gè)方面的內(nèi)容，本文以實(shí)驗(yàn)方式進(jìn)行了相應(yīng)分析。

1.實(shí)驗(yàn)材料

本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中選用了酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基、注射用水、10mL低硼硅玻璃管制瓶、乳糖、抗生素瓶用鋁塑組合蓋以及注射用無(wú)菌粉末用鹵化丁基橡膠塞等幾種成分[1]。驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)：GMP無(wú)菌藥品附錄規(guī)定樣品超過(guò)5000-10000支時(shí)，如果有一支藥品染菌需調(diào)查原因，可考慮重新進(jìn)行驗(yàn)證，有2支藥品染菌需重新進(jìn)行驗(yàn)證。

2.粉針劑工藝模擬分裝過(guò)程的驗(yàn)證

2.1實(shí)驗(yàn)的相關(guān)工作與條件要求

首先是在操作規(guī)程及操作人員控制方面，要求對(duì)西林瓶進(jìn)行模擬分裝，同時(shí)對(duì)膠塞進(jìn)行清洗與滅菌，嚴(yán)格依據(jù)真實(shí)生產(chǎn)操作一致的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行相應(yīng)設(shè)備的清洗與消毒工作，在分裝機(jī)的分裝速度上要求比正常的生產(chǎn)速度低一些。要求參與實(shí)驗(yàn)的相關(guān)人員接受到無(wú)菌更衣程序、無(wú)菌操作以及GMP等相關(guān)的專(zhuān)業(yè)知識(shí)培訓(xùn)。實(shí)驗(yàn)的重要要求是在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前塵埃粒子、沉降菌以及人員表面微生物等的檢測(cè)能夠滿足實(shí)驗(yàn)的相關(guān)要求。在進(jìn)行分裝實(shí)驗(yàn)的模擬時(shí)要求對(duì)送瓶軌道、分裝區(qū)域以及設(shè)備表面等位置進(jìn)行取樣分析，通過(guò)表面微生物檢測(cè)滿足實(shí)驗(yàn)條件[2]。

分裝實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要求對(duì)空氣中的沉降菌進(jìn)行充分監(jiān)測(cè)，將營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿放在分裝機(jī)臺(tái)面位置上，目的在于通過(guò)暴露進(jìn)行取樣分析，在分裝工作開(kāi)始的時(shí)候即放置，一直持續(xù)到分裝工作結(jié)束之后。

在分裝實(shí)驗(yàn)的模擬過(guò)程中、模擬分析完成之后要求能夠?qū)?shí)驗(yàn)的參與人員手部位置以及工作服的表面位置等提取部分微生物以進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)工作，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)當(dāng)<各/皿。同時(shí)要求實(shí)驗(yàn)人員的手套以及工作衣服上的菌落數(shù)應(yīng)當(dāng)<1個(gè)/皿，最終的檢測(cè)結(jié)果滿足這一條件，符合實(shí)驗(yàn)的生產(chǎn)工藝條件。

2.2無(wú)菌分裝粉針劑模擬分裝方法

要求培養(yǎng)基能夠滿足性能測(cè)試檢測(cè)的條件，30g的培養(yǎng)基配以1L的注射用水，按照這一比例制成40L的液體培養(yǎng)基，從而進(jìn)行滅菌使用。

以比正常速度比較低的速度將無(wú)菌乳糖裝在無(wú)菌西林瓶之中，一瓶的裝量大約為0.5g，借助于FZ一1全自動(dòng)模擬灌裝機(jī)的運(yùn)作將7ML的無(wú)菌液體培養(yǎng)基裝在西林瓶中，在鋁蓋的壓制之下進(jìn)行充分密封。試驗(yàn)?zāi)M的量應(yīng)當(dāng)高于五千瓶，本次的模擬量是5012瓶[3]。

2.3微生物培養(yǎng)

首先是陰性對(duì)照上，運(yùn)用20支無(wú)菌潔凈試管進(jìn)行7ML的培養(yǎng)基制作，以進(jìn)行培養(yǎng)基無(wú)菌性試驗(yàn)，結(jié)果顯示這20支陰性對(duì)照品都屬于無(wú)菌狀態(tài)。其次是陽(yáng)性對(duì)照，為了驗(yàn)證培養(yǎng)基的促菌生長(zhǎng)能力，選擇40支西林瓶樣品，這40瓶的要求是具有20瓶的接種濃度低于10Ocfu/0.1mL的枯草芽孢桿菌，另外的20瓶接種濃度低于10Ocfu/O.1mL的白色念珠菌，將其當(dāng)做陽(yáng)性對(duì)照品。在完成接種之后在30℃-35℃的環(huán)境下進(jìn)行接種枯草桿菌芽孢的西林瓶的培養(yǎng)工作，在20℃-25℃的環(huán)境下進(jìn)行白色念珠菌的西林瓶的培養(yǎng)工作，在進(jìn)行72個(gè)小時(shí)之后的培養(yǎng)工作之后出現(xiàn)了明顯的微生物生長(zhǎng)現(xiàn)象，滿足陽(yáng)性對(duì)照的條件。最后是針對(duì)試驗(yàn)品的培養(yǎng)工作，首先在適宜的溫度下進(jìn)行14天的培養(yǎng)，前七天在比較低的溫度即20-25℃下進(jìn)行培養(yǎng)，后七天在30-35℃的溫度下進(jìn)行培養(yǎng)，之后分別是第3天、第7天、第10天以及第14天進(jìn)行微生物生長(zhǎng)情況的充分觀察，從而充分總結(jié)污染瓶中的微生物特點(diǎn)，最終顯示都處于無(wú)菌狀態(tài)[4]。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

3.1在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)當(dāng)設(shè)置在“最差”的狀態(tài)下，要求比正常生產(chǎn)活動(dòng)中的正常故障以及高風(fēng)險(xiǎn)等高，重點(diǎn)體現(xiàn)在粉、加膠塞、設(shè)備維修過(guò)程中的頻次等。本次實(shí)驗(yàn)中在進(jìn)行一半的分裝過(guò)程中，要求進(jìn)行30分鐘之上的設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)之后再進(jìn)行模擬分裝實(shí)驗(yàn)工作，從而充分對(duì)剩下的物質(zhì)進(jìn)行分裝。

3.2為了充分結(jié)合具體的生產(chǎn)實(shí)際情況，應(yīng)當(dāng)在一年中進(jìn)行至少兩次的無(wú)菌模擬分裝試驗(yàn)，對(duì)于一些設(shè)備設(shè)施與無(wú)菌工藝等能夠充分結(jié)合利用，最大程度地減少由于生產(chǎn)環(huán)境的變化給無(wú)菌生產(chǎn)所帶來(lái)的不良影響，最終的合格標(biāo)準(zhǔn)為GMP無(wú)菌藥品附錄規(guī)定樣品超過(guò)5000-10000支時(shí)，如果有一支藥品染菌需調(diào)查原因，可考慮重新進(jìn)行驗(yàn)證，有2支藥品染菌需重新進(jìn)行驗(yàn)證?！?】

3.3在實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程中得到的陰性對(duì)照物中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)微生物現(xiàn)象，與此同時(shí)全部的陽(yáng)性對(duì)照物中都有比較明顯的微生物生長(zhǎng)現(xiàn)象的發(fā)生，滿足結(jié)果條件。由此可以得到模擬分裝的樣品中都沒(méi)有出現(xiàn)微生物生長(zhǎng)現(xiàn)象。

3.4實(shí)驗(yàn)前在塵埃粒子檢測(cè)、沉降菌檢測(cè)上滿足工藝生產(chǎn)的要求，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)結(jié)果之后在操作設(shè)備、墻面等物質(zhì)上進(jìn)行表面微生物的檢測(cè)，同樣符合相關(guān)條件，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生不良影響。

本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中針對(duì)粉針劑的無(wú)菌分裝時(shí)，實(shí)驗(yàn)操作人員都滿足相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)條件，以無(wú)菌的條件進(jìn)行工作，嚴(yán)格按照相關(guān)的操作流程逐步進(jìn)行，最終生產(chǎn)出來(lái)的產(chǎn)品都符合無(wú)菌條件，合格。

4.結(jié)束語(yǔ)

本次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用無(wú)菌乳糖替代無(wú)菌原料藥進(jìn)行模擬試驗(yàn)，從實(shí)際生產(chǎn)環(huán)境中的各個(gè)條件出發(fā)設(shè)計(jì)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)操作方法與實(shí)驗(yàn)環(huán)境，使得實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驖M足相關(guān)的條件，具有很強(qiáng)的可靠性，最終驗(yàn)證了產(chǎn)品的合格性。

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