李新鋒，劉 健，姚國(guó)佳，楊建平，史洪濤

(1. 河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 河南省飼料資源開(kāi)發(fā)及安全評(píng)價(jià)工程技術(shù)研究中心，河南 鄭州450046；2. 河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 實(shí)驗(yàn)研究中心，河南 鄭州 450046)

卷心菜(Cabbage)是十字花科植物，學(xué)名結(jié)球甘藍(lán)，為甘藍(lán)的變種。卷心菜產(chǎn)量高、易貯耐運(yùn)、品質(zhì)好，而且卷心菜富含糖、脂肪、蛋白質(zhì)、膳食纖維、微量元素等多種營(yíng)養(yǎng)元素[1]。此外，卷心菜含有多種有機(jī)酸，如吲哚-3-乙酸、綠原酸、黃酮醇、花白甙等活性物質(zhì)；經(jīng)常食用卷心菜能防治心血管病、糖尿病，可以延緩衰老、解毒、增強(qiáng)免疫力[2]。枯草芽孢桿菌是我國(guó)農(nóng)業(yè)部公布的可直接飼喂動(dòng)物且被允許使用的益生菌菌種之一，具有替代抗生素，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，提高飼料效率的功能[3]，能促進(jìn)厭氧性有益菌的繁殖，抑制需氧性有害菌的增殖[4]。卷心菜的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和枯草芽孢桿菌在畜禽中的應(yīng)用已廣為報(bào)道，但是兩者以復(fù)合物形式在畜禽健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用還未見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)研究了飼糧中添加卷心菜漿液與枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)21 d肉仔雞生長(zhǎng)性能和腸道發(fā)育指標(biāo)的影響，為提高卷心菜的利用價(jià)值、減少卷心菜廢棄物對(duì)環(huán)境的污染、開(kāi)發(fā)綠色飼料添加劑及其在養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 卷心菜枯草芽孢桿菌復(fù)合物的制備

從蔬菜市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)新鮮的卷心菜，剝開(kāi)其葉片后粉碎打漿，現(xiàn)用現(xiàn)制；在卷心菜漿液中添加枯草芽孢桿菌使其活菌數(shù)為0.08×109CFU/g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取1日齡的健康羅斯308肉仔雞200只，公母各半，使其體重相近；將其隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞，每個(gè)重復(fù)間體重接近，公母各半。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)飼糧且添加20 g/kg卷心菜漿液，試驗(yàn)Ⅱ組在基礎(chǔ)飼糧中添加枯草芽孢桿菌(活菌數(shù)為1.6×109CFU/g)的試驗(yàn)飼糧，試驗(yàn)Ⅲ組在基礎(chǔ)飼糧中添加卷心菜漿液(20 g/kg)與枯草芽孢桿菌(活菌數(shù)為1.6×109CFU/g)復(fù)合物的試驗(yàn)飼糧，各個(gè)組試驗(yàn)飼糧均現(xiàn)拌現(xiàn)喂。肉仔雞基礎(chǔ)飼糧參照中國(guó)肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T33-2004)和NRC(1994)配制，飼糧營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

本次試驗(yàn)在鄭州市中亞禽業(yè)公司養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，按重復(fù)分籠飼養(yǎng)肉仔雞，雞舍每天人工光照24 h，人工定時(shí)喂料，自由飲水；飼養(yǎng)管理、消毒和免疫均按常規(guī)方法進(jìn)行，試驗(yàn)期21 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

注：預(yù)混料為每千克飼糧提供：VA 10 000 IU，VD 2 500 IU，VE 50 mg，VK32 mg，VB12 mg，VB210 mg，VB61 mg，VB125 g，生物素25 μg，煙酸50 mg，泛酸10 mg，葉酸2 mg，膽堿1 200 mg，Ca 156 g，F(xiàn)e 20 mg，Cu 10 mg，Mn 100 mg，Zn 100 mg，Se 0.25mg，I 2 mg，Co 1 mg，飼糧中粗蛋白、粗纖維、氨基酸、鈣磷為實(shí)測(cè)值，其余為計(jì)算值

1.3 試驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 生長(zhǎng)性能

每天喂料前，以每個(gè)重復(fù)的10只肉仔雞為單位收集剩余的飼料，并稱重，每組的采食量以喂料量減去剩余料量計(jì)算，于試驗(yàn)第21 d稱取肉仔雞體重。根據(jù)1 d～21 d 采食量記錄，計(jì)算平均日采食量、平均日增重、耗料增重比。

1.3.2 腸道發(fā)育指標(biāo)

于試驗(yàn)第21d，每個(gè)處理組隨機(jī)選5只體重接近平均體重的肉仔雞，空腹12 h，稱重后屠宰。剪取肉仔雞十二指腸、空腸和回腸中間部位的腸管各3 cm，用生理鹽水沖洗除去內(nèi)容物，放入10%的福爾馬林溶液中固定。取固定保存好的腸段，制作石蠟切片。每張切片選擇10根完整且伸展良好的絨毛，于顯微鏡下測(cè)量其絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度。腸道發(fā)育指標(biāo)檢測(cè)在河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院解剖實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.3.3 免疫器官指數(shù)的測(cè)定

稱重后屠宰，摘取法氏囊、脾臟、胸腺。用濾紙吸去表面的水分后，用分析天平稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)，公式如下：免疫器官指數(shù)=免疫器官質(zhì)量(mg)/動(dòng)物體質(zhì)量(g)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析(One-way ANOVA)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和多重比較，P<0.05為差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，試驗(yàn)Ⅱ組、Ⅲ組的耗料增重比與對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組相比增加，但差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ組、Ⅲ組的日采食量和日增重顯著增加(P<0.05)，與對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組相比，試驗(yàn)Ⅱ組、Ⅲ組第21 d仔雞體重顯著增加(P<0.05)。

表2 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞21 d生長(zhǎng)性能的影響

注：同一行不同字母代表差異顯著(P<0.05)，相同字母代表差異不顯著(P>0.05)，下表同

2.2 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞小腸腸道發(fā)育的影響

由表3可以看出，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組的十二指腸腸絨毛長(zhǎng)度和平滑肌厚度均增加，但差異不顯著(P>0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組、Ⅲ組的十二指腸腸絨毛長(zhǎng)度和平滑肌厚度顯著增加(P<0.05)。與對(duì)照組相比，3個(gè)試驗(yàn)組的隱窩深度無(wú)顯著差異(P>0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組的空腸腸絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度均增加，但差異不顯著(P>0.05)，平滑肌厚度顯著增加(P<0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組的空腸腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和平滑肌厚度顯著增加(P<0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅲ組的空腸腸絨毛長(zhǎng)度顯著增加(P<0.05)，隱窩深度和平滑肌厚度均增加，但是差異不顯著(P>0.05)；與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組的回腸腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和平滑肌厚度均增加，但差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組的回腸腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和平滑肌厚度均增加，但差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅲ組的回腸腸絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和平滑肌厚度均增加，但差異不顯著(P>0.05)。

2.3 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)21 d肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表4可以看出，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅰ組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著增加(P<0.05)，法氏囊指數(shù)差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組的胸腺指數(shù)顯著增加(P<0.05)，脾臟指數(shù)增加，法氏囊指數(shù)減少，但差異均不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)Ⅲ組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著增加(P<0.05)，法氏囊指數(shù)增加但差異不顯著(P>0.05)。

表3 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞21 d小腸腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響 μm

表4 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)21 d肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

3 討論

3.1 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

卷心菜富含多種生物活性物質(zhì)，具有抗氧化、抗菌消炎等多種功能[5]，能夠改善胃腸道健康，促進(jìn)新陳代謝，提高肉仔雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，枯草芽孢桿菌是我國(guó)農(nóng)業(yè)部公布的可直接飼喂動(dòng)物且允許使用的益生菌菌種之一，具有促進(jìn)厭氧性有益菌如乳酸桿菌的繁殖，抑制需氧性有害菌如大腸桿菌的增殖功能[6]，具有替代部分抗生素，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，提高飼料效率的功能[3]。本實(shí)驗(yàn)條件下，與對(duì)照組相比，肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌的試驗(yàn)Ⅱ組或添加卷心菜漿液和枯草芽孢桿菌的復(fù)合物的試驗(yàn)Ⅲ組對(duì)1 d～21 d肉仔雞生長(zhǎng)性能產(chǎn)生影響，不同的添加物對(duì)生產(chǎn)性能的影響也不盡相同。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌與卷心菜復(fù)合物，能夠顯著提高肉仔雞的日采食量、日增重和21 d體重。該復(fù)合物對(duì)生產(chǎn)性能產(chǎn)生影響的原因可能是兩種添加物共同作用的結(jié)果，既提高了肉仔雞的抗氧化能力[7]，減少了自由基對(duì)腸道組織學(xué)結(jié)構(gòu)的氧化損傷，又提高了肉仔雞消化道產(chǎn)生多種消化酶對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力[8]。

3.2 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞腸道發(fā)育的影響

消化道是動(dòng)物機(jī)體消化、吸收和代謝營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要器官，十二指腸、空腸和回腸的絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和平滑肌厚度是衡量腸道消化吸收功能的重要指標(biāo)[9]。隨著十二指腸、空腸和回腸的絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度和平滑肌厚度的增加，腸道黏膜與腸道中食糜的接觸面積也會(huì)相應(yīng)增加，從而增強(qiáng)腸道的消化、吸收和代謝功能。張曉慧[10]研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌能增強(qiáng)AA雞的免疫功能，提高消化酶活性，降低腸道病原菌數(shù)量，改善腸道組織結(jié)構(gòu)，并提高十二指腸總蛋白酶活性，卷心菜含有豐富的維生素U，也稱為抗?jié)円蜃?，能夠修?fù)胃腸道黏膜，促進(jìn)腸道絨毛發(fā)育[11]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌和卷心菜復(fù)合物能夠?qū)δc道發(fā)育產(chǎn)生影響；在肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌，與對(duì)照組相比能夠顯著提高其十二指腸和空腸的絨毛長(zhǎng)度及平滑肌厚度。添加卷心菜漿液與枯草芽孢桿菌復(fù)合物，能夠顯著提高肉仔雞的十二指腸、空腸和回腸的絨毛長(zhǎng)度，顯著增加十二指腸平滑肌厚度。

3.3 卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

脾臟是禽類最大的外周免疫器官，參與體液免疫，分泌抗體，產(chǎn)生豐富多樣的淋巴細(xì)胞和B細(xì)胞。胸腺參與動(dòng)物機(jī)體的細(xì)胞免疫，主要產(chǎn)生T淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等。法氏囊是禽類特有的免疫器官，類似與哺乳動(dòng)物的骨髓造血系統(tǒng)，主導(dǎo)體液免疫。胸腺、法氏囊和脾臟這三個(gè)免疫器官的指數(shù)反映了動(dòng)物機(jī)體主要免疫器官的發(fā)育程度，從免疫器官發(fā)育來(lái)評(píng)價(jià)機(jī)體免疫狀態(tài)，免疫器官指數(shù)越高，說(shuō)明動(dòng)物機(jī)體的免疫機(jī)能越強(qiáng)，抵抗病原微生物感染和抗應(yīng)激能力越高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌、卷心菜漿液及兩者復(fù)合物能夠?qū)θ庾须u的免疫器官指數(shù)產(chǎn)生影響。與對(duì)照組相比，在飼料中添加卷心菜漿液使肉仔雞的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著增加，但是法氏囊指數(shù)增加不顯著；在飼料中添加枯草芽孢桿菌能夠顯著增加肉仔雞的胸腺指數(shù)；在飼料中添加卷心菜-枯草芽孢桿菌的復(fù)合物，使肉仔雞的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均顯著增加，但是法氏囊指數(shù)增加不顯著。

4 結(jié)論

肉仔雞飼糧中添加卷心菜-枯草芽孢桿菌復(fù)合物，能夠顯著改善肉仔雞的生產(chǎn)性能，提高肉仔雞十二指腸、空腸和回腸的腸絨毛長(zhǎng)度和平滑肌厚度，顯著提高肉仔雞胸腺和脾臟指數(shù)。