沈素晶，鄧超，李靄文，譚俊青

(廣東省第二中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 廣州 510095)

同一醫(yī)院同一項(xiàng)目有多套檢測(cè)系統(tǒng)已是相當(dāng)普遍的現(xiàn)象，各個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)同一份標(biāo)本的同一項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果應(yīng)具有可比性，這是檢驗(yàn)人員、所有廠商等共同努力的方向，追求檢驗(yàn)結(jié)果具有可比性是最實(shí)在的質(zhì)量[1]。降鈣素原（PCT）作為炎癥標(biāo)志物，在鑒別細(xì)菌性與非細(xì)菌性感染中相對(duì)其他炎癥標(biāo)志物有較高的靈敏度和特異性，具有極大的早期診斷價(jià)值[2，3]。PCT的檢測(cè)也日漸成為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，為了能夠使檢測(cè)方法更加規(guī)范，檢驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確，我們?cè)诒驹簩?shí)驗(yàn)室2套化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)間進(jìn)行了PCT的相關(guān)性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1．1 檢測(cè)標(biāo)本 第三方質(zhì)控品由郎道公司提供，批號(hào) 23745190 和 23748190，有效期均為 2018．9．30；患者血清163例，空腹采集靜脈血，及時(shí)分離血清檢測(cè)，經(jīng)羅氏Cobas e 602系統(tǒng)檢測(cè)所選血清標(biāo)本的降鈣素原的濃度范圍在0．01～100ng/ml之間。

1．2 檢測(cè)系統(tǒng) 新產(chǎn)業(yè)生物的Maglumi 2000 Plus全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀Snibe系統(tǒng)及其配套校準(zhǔn)品，Snibe 系統(tǒng)檢測(cè) PCT 的范圍是 0．01～100nmol/L。羅氏Cobas 602電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)及Elecsys BRAHMS PCT試劑盒及其配套校準(zhǔn)品

1．3 檢測(cè)方法 新產(chǎn)業(yè)Maglumi 2000 Plus檢測(cè)系統(tǒng)Snibe，采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，發(fā)光標(biāo)記物異魯米諾及其衍生物直接被激發(fā)發(fā)光，通過(guò)測(cè)定光強(qiáng)檢測(cè)待測(cè)物質(zhì)。羅氏Cobas 602采用電化學(xué)發(fā)光法，通過(guò)光電倍增器測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度，Elecsys軟件自動(dòng)通過(guò)校準(zhǔn)曲線計(jì)算得到檢測(cè)結(jié)果。

以實(shí)驗(yàn)室日常使用的兩個(gè)水平的質(zhì)控物來(lái)比較兩個(gè)系統(tǒng)的精密度，每天檢測(cè)1次，連續(xù)檢測(cè)20d。另外，以羅氏廠家提供的兩個(gè)濃度的定值參考物質(zhì)做回收實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證準(zhǔn)確度。取定值樣本互相配比稀釋兩個(gè)濃度連續(xù)檢測(cè)取定值樣本互相配比稀釋三個(gè)濃度連續(xù)檢測(cè)3次去平均值，計(jì)算其回收率R。

以羅氏cobas 602系統(tǒng)檢測(cè)從門診，體檢和住院患者的血清標(biāo)本，從中選擇低中高值標(biāo)本163例，濃度包含 0．01～100ng/ml。 比較兩個(gè)系統(tǒng)的相關(guān)性，及評(píng)價(jià)新產(chǎn)業(yè)系統(tǒng)的臨床滿足程度。

1．4 判斷標(biāo)準(zhǔn) 以澳大利亞室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)T±4或T±20%作為日間CV的允許范圍；以%SE小于澳大利亞室間質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的允許誤差為臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)，以參考值上限、標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)本次不同濃度標(biāo)本檢測(cè)均值和醫(yī)學(xué)決定水平處的系統(tǒng)誤差來(lái)判斷檢測(cè)系統(tǒng)間是否可以接受[4，5]。準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)以回收率R在90%～110%為可接受范圍。

NCCLS的EP－9A2文件規(guī)定：兩方法的相關(guān)系數(shù)R2≥0．95，則兩方法結(jié)果一致。中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械審評(píng)中心的 《體外診斷試劑分析性能評(píng)估（準(zhǔn)確度－方法學(xué)比對(duì)）指導(dǎo)原則》規(guī)定：免疫類產(chǎn)品兩方法學(xué)的相關(guān)系數(shù)R2≥0．90，則兩方法測(cè)定結(jié)果為一致。本文按照上述兩標(biāo)準(zhǔn)對(duì)新產(chǎn)業(yè)系統(tǒng)和羅氏系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果一致性進(jìn)行判斷。

3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性分析采用線性回歸分析，以兩方法相關(guān)系數(shù)R作為判斷2種方法一致性的標(biāo)準(zhǔn)。檢測(cè)數(shù)據(jù)采用Excel軟件和SPSS 20．0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)可比性分析、線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)R值。

4 檢測(cè)結(jié)果

4．1 兩套檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定2個(gè)水平PCT質(zhì)控物測(cè)定結(jié)果見表1，其日間CV及總CV均小于T±20%的日間CV允許范圍。表1可見新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)在測(cè)定PCT質(zhì)控物時(shí)均值與羅氏C602相近，且精密度在允許范圍內(nèi)。

表1 不同檢測(cè)系統(tǒng)2個(gè)水平PCT質(zhì)控物測(cè)定結(jié)果

4．2 兩套系統(tǒng)正確度比較 選用的兩個(gè)定值校準(zhǔn)品濃度分別為 0．562ng/ml和 42．165ng/ml， 分別以1：4和4：1的比例混合為兩個(gè)濃度的配制樣本，以Snibe系統(tǒng)和C602系統(tǒng)測(cè)定3次求平均值計(jì)算回收率，結(jié)果如下：

表2 Snibe準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

表3 C602準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果

從表2表3可見兩個(gè)系統(tǒng)的回收率均在90%～110%范圍內(nèi)，表明兩個(gè)系統(tǒng)的準(zhǔn)確度在臨床可接受范圍內(nèi)。

4．3 PCT檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析 用新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)和羅氏coba 602電化學(xué)發(fā)光法同時(shí)對(duì)受檢血清標(biāo)本進(jìn)行定量分析見表4。結(jié)果表明，兩種方法檢測(cè)結(jié)果的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）。

4．4 新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602系統(tǒng)比對(duì)的敏感度、相對(duì)特異性、總體符合率結(jié)果：新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)的相對(duì)敏感度為98．8%，相對(duì)特異性為100%，與羅氏C602系統(tǒng)測(cè)定結(jié)果的總體符合率為99．3%，兩者一致性很好，結(jié)果見表5。

表4 兩個(gè)系統(tǒng)測(cè)定不同濃度的新鮮血清PCT結(jié)果（ng/ml）

表5 新產(chǎn)業(yè)Snibe與羅氏C602比對(duì)結(jié)果（例數(shù)）

4．5 新產(chǎn)業(yè)Maglumi Snibe系統(tǒng)與羅氏C602系統(tǒng)在陰性結(jié)果（PCT＜0．05ng/ml）內(nèi)的符合率結(jié)果：新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602系統(tǒng)測(cè)定結(jié)果的符合率為97．1%，相關(guān)系數(shù)R2為0．968兩者一致性較好，見圖1。

圖1 新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602在PCT＜0.05ng/ml檢測(cè)區(qū)間內(nèi)的相關(guān)性

4．6 新產(chǎn)業(yè)Snibe系統(tǒng)與羅氏602系統(tǒng)在低、高風(fēng)險(xiǎn)膿毒血癥范圍內(nèi)的相關(guān)性比對(duì) 德國(guó)重癥學(xué)會(huì)在膿毒血癥診斷中提出 0．5ng/ml和 2．0ng/ml作為診斷截點(diǎn)，PCT＜0．5ng/ml表明膿毒癥不可能；PCT＞2．0ng/ml表明膿毒癥高風(fēng)險(xiǎn)，非常有可能成為嚴(yán)重膿毒癥或膿毒血癥休克。

結(jié)果表明，兩種方法檢測(cè)結(jié)果的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），當(dāng)在 PCT＜0．5 ng/ml范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù) R2=0．949 （見圖 2）；在 PCT＞2．0 ng/ml，相關(guān)系數(shù) R2=0．977（圖 3）。 根據(jù) NCCLS 的 EP－9A 規(guī)定，兩種方法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性良好。表明新產(chǎn)業(yè)檢測(cè)降鈣素原在預(yù)測(cè)臨床疾病效果與羅氏相當(dāng)。

圖2 新產(chǎn)業(yè)Snibe與羅氏602檢測(cè)PCT結(jié)果在膿毒癥低風(fēng)險(xiǎn)范圍PCT＜0.5ng/ml內(nèi)比對(duì)結(jié)果

圖3 新產(chǎn)業(yè)Snibe與羅氏602檢測(cè)PCT結(jié)果在膿毒癥高風(fēng)險(xiǎn)范PCT＞2.0ng/ml比對(duì)結(jié)果

5 討論

PCT作為感染性疾病的診斷指標(biāo)，具有敏感度高、特異度好、操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確快速等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)逐漸被臨床所接受并廣泛應(yīng)用，在感染性疾病的早期診斷、治療效果監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷等方面有重要的臨床意義。隨著臨床研究的不斷進(jìn)展，PCT也得到廣泛應(yīng)用[6]。如在肝衰竭合并感染[7]、人中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染診斷[8]、克羅恩病[9]及指導(dǎo)抗生素的使用等[10]。目前檢測(cè)PCT的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法包括：放射免疫法[11]、雙抗夾心免疫熒光法[12]、膠體金標(biāo)法[13，14]、透射免疫濁度法[15]。目前最常用的檢測(cè)方法是電化學(xué)發(fā)光法[16]，而且這種免疫檢測(cè)系統(tǒng)不會(huì)受到溶血、脂血和黃疸標(biāo)本的影響。但其中的相關(guān)性仍未有全面的相關(guān)性分析。

新產(chǎn)業(yè)Maglumi系統(tǒng)采用化學(xué)發(fā)光免疫標(biāo)記的方法檢測(cè)降鈣素原。近年來(lái)，化學(xué)發(fā)光免疫分析發(fā)展速度極快，結(jié)合化學(xué)發(fā)光的高靈敏度和抗體技術(shù)的高特異性，以靈敏度高、分離效果好、測(cè)定時(shí)間短、批間誤差小、無(wú)放射污染等特點(diǎn)，已經(jīng)從實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入臨床醫(yī)學(xué)的常規(guī)應(yīng)用逐步發(fā)揮主流作用。加之其檢測(cè)成本比羅氏系統(tǒng)低，檢測(cè)時(shí)間僅19min，可大大減少患者的經(jīng)濟(jì)壓力和縮短檢測(cè)時(shí)間。

本試驗(yàn)中，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，新產(chǎn)業(yè)的化學(xué)發(fā)光法與羅氏的電化學(xué)法在檢測(cè)PCT時(shí)精密度和準(zhǔn)確度均能滿足臨床要求并能達(dá)到比較高的水平。新產(chǎn)業(yè)在檢測(cè)病人血清標(biāo)本與羅氏系統(tǒng)相關(guān)性達(dá)99%以上，在預(yù)測(cè)膿毒血癥的相關(guān)性也達(dá)95%。表明新產(chǎn)業(yè)系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)化的羅氏系統(tǒng)具有良好的等效性，并且能滿足臨床需求。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)新引進(jìn)的新產(chǎn)業(yè)Maglumi 2000 Plus在檢測(cè)PCT時(shí)敏感度，精密度和相關(guān)性均可滿足臨床需求，可投入臨床使用。但因所選臨床病例不夠大量，日后使用過(guò)程中仍需密切觀察其性能，及時(shí)做好校準(zhǔn)和維護(hù)，以便更好服務(wù)于臨床。