陳派強(qiáng) ,王學(xué)忠 ,董海波 ,周旭 ,武婉君
(河南大學(xué)附屬鄭州頤和醫(yī)院,1、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心;2、神經(jīng)外科,河南 鄭州 450000)
急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)是臨床常見的腦血管系統(tǒng)疾病,其發(fā)病率約占全部腦血管疾病的70%,由于早期發(fā)病較為隱匿,發(fā)病突然,常發(fā)生在休息或睡眠狀態(tài)下,發(fā)病后病情進(jìn)展迅速,病情兇險(xiǎn),治療后效果較差,后期生活質(zhì)量較低,對患者的身心健康造成嚴(yán)重威脅[1]。隨著人口老年化的加劇,ACI的發(fā)病形式、發(fā)病年齡趨于年輕化,因此,早期診斷、治療腦梗死已成為臨床研究的重點(diǎn)。發(fā)病早期因腦組織缺血、缺氧,誘發(fā)機(jī)體炎癥介質(zhì)、趨化因子表達(dá)異常,刺激免疫系統(tǒng)抗原,激活大量炎性細(xì)胞浸潤,損傷腦組織。臨床發(fā)現(xiàn),神經(jīng)特異性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)水平的變化能夠與測腦內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)損傷程度;S100b 蛋白(S-100 protein,S-100b)的水平隨腦梗死患者神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞損傷而升高;高遷移率族蛋白 1(high mobility group box-1,HMGB1)會加重腦梗死患者腦內(nèi)的炎癥反應(yīng),從而加重患者的病情;不規(guī)則趨化因子(fractalkine/CX3CL1,F(xiàn)KN)水平變化改變神經(jīng)或血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附功能和趨化作用,從而參與到ACI的發(fā)病過程中[2]。本研究對我院120例ACI患者與60例健康志愿者檢測血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 水平, 并分析上述指標(biāo)與ACI患者NIHSS評分、腦水腫程度的關(guān)系。
1.1 一般資料 選取我院收集的120例ACI患者(ACI組),收治時(shí)間2014年1月-2017年1月,選取我院體檢中心健康體檢對象60例作為對照組。ACI組,男 64例、女 56例,年齡 46~79歲,平均63.1±10.2 歲,起病至入院時(shí)間 4~24h,平均 10.6±7.4h;NIHSS 評分 12.8±6.9 分,入院時(shí)患者收縮壓/舒張壓 140.2±11.7/81.4±9.2mmHg。 對照組, 男 33例、女 27 例,年齡 43~79 歲,平均 62.2±9.0 歲。 兩組的年齡、性別比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);本研究取得醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn),與研究對象均簽署知情同意書。
1.2 納入排除標(biāo)準(zhǔn)
1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴ACI患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考1996年全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3];⑵患者年齡≤79歲;⑶患者入院后經(jīng)頭顱CTA、MRI檢測確診為急性腦梗死;⑷患者起病后24h內(nèi)入院;⑸對照組來源于本院體檢中心的健康研究對象。
1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴腦出血、顱內(nèi)腫瘤、顱內(nèi)動脈瘤破裂;⑵伴有凝血功能疾?。虎秋B腦外傷患者;⑷急慢性感染性疾病、免疫性疾病。
1.3 血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 檢測方法 所有患者入院后第二天早晨8時(shí)空腹抽取3ml肘靜脈血分別放置在3個(gè)含有肝素的抗凝管中,以3000r/min進(jìn)行15min離心,分離上層血清,保存至-20℃待檢。采用羅氏全自動電化學(xué)發(fā)光檢測NSE、S100水平,試劑盒購于上海吉瑪制藥技術(shù)有限公司。采用酶聯(lián)免疫吸附法 (ELISA)檢測HMGB1、FKN水平,試劑盒由深圳匹基生物工程有限公司提供。所有樣品檢測3次,取平均值。
1.4 腦梗死病情分級 根據(jù)美國國立衛(wèi)生院卒中量表(NIHSS)評分標(biāo)準(zhǔn)[4],該量表主要包括:意識水平、凝視、視野、面癱、左右上肢運(yùn)動、左右下肢運(yùn)動、肢體共濟(jì)失調(diào)、感覺、語言、構(gòu)音障礙、消退和不注意,將患者分為輕度組40例(NIHSS評分<4分)、中度組 50 例(NIHSS 評分 4~15 分)、重度組30例(NIHSS評分>15分)。
1.5 腦電阻抗擾電系數(shù) (CEI) 的測定方法 采用BORN-BE無創(chuàng)腦水腫動態(tài)監(jiān)護(hù)儀對ACI患者患側(cè)的大腦半球腦電阻抗擾動系數(shù)(CEI)進(jìn)行監(jiān)測,均進(jìn)行2次連續(xù)監(jiān)測,25min/次,選擇兩次腦水腫指數(shù)平均值作為最終結(jié)果。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS 16.0,采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述,兩組間比較采用t檢驗(yàn)法,三組間比較采用單因素方差分析法;相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析法;P值<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 ACI組和對照組的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值比較 ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值均顯著的高于對照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);見表 1。
2.2 不 同病 情程 度的 ACI組患者血 清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及 CEI值比較 重度組的ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值均高于輕度組、中度組(P<0.05),中度組的 ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI 值均高于輕度組(P<0.05);見表 2。
2.3 ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN水平與CEI值、NIHSS評分的關(guān)系 ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 與 NIHSS 評分均呈顯著的正相關(guān)關(guān)系 (P<0.05);ACI組患者的血清NSE、S100b與 CEI值呈顯著的正相關(guān)關(guān)系 (P<0.05);ACI組患者的血清 HMGB1、FKN 與 CEI值的相關(guān)性不顯著(P>0.05);見表 3。
表 1 ACI組和對照組的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值比較(±s)
表 1 ACI組和對照組的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值比較(±s)
組別 n ACI組對照組t值P值120 60 NSE(pg/ml) S100b(pg/ml) HMGB1(pg/ml) FKN(pg/ml) CEI 2.89±0.64 1.15±0.16 20.711<0.001 1.03±0.36 0.19±0.07 17.882<0.001 33.82±11.70 2.95±0.92 20.376<0.001 94.10±22.64 8.96±3.13 28.952<0.001 7.94±0.55 6.50±0.39 18.119<0.001
表2 不同病情程度的ACI組和對照組的血清NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值比較(±s)
表2 不同病情程度的ACI組和對照組的血清NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值比較(±s)
注:與輕度組比較 *P<0.05,與中度組比較 #P<0.05。
病情程度 n輕度組中度組重度組F值P值40 50 30 NSE(pg/ml) S100b(pg/ml) HMGB1(pg/ml) FKN(pg/ml) CEI 2.20±0.52 2.67±0.61*3.81±0.44*#14.209<0.001 0.78±0.32 1.00±0.34*1.32±0.30*#22.876<0.001 17.95±9.63 31.68±9.81*54.20±10.52*#29.173<0.001 54.92±16.81 100.81±21.33*148.26±19.52*#25.772<0.001 7.13±0.50 7.86±0.52*8.74±0.54*#17.08<0.001
表3 相關(guān)性分析結(jié)果
ACI作為一種常見腦血管疾病,局部腦組織因各種因素導(dǎo)致血液循環(huán)障礙,腦組織缺血、缺氧而誘發(fā)細(xì)胞軟化、壞死,具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特征,以頭暈、頭痛、言語障礙為主要病癥,對患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅[5]。因此,早期發(fā)現(xiàn)、治療是提高治療效果、改善預(yù)后的重要環(huán)節(jié)[6]。
臨床研究指出,NSE、S100b、HMGB1、FKN 在ACI發(fā)病過程中出現(xiàn)異常表達(dá),其發(fā)病機(jī)制尚未明確[7]。NSE是一種酸性可溶性蛋白質(zhì),屬于烯醇化酶基因超家族成員,主要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元細(xì)胞與神經(jīng)分泌細(xì)胞所分泌,是神經(jīng)元損傷的敏感性標(biāo)志物[8]。S100b作為一種酸性鈣結(jié)合蛋白,主要由活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌,可以有效調(diào)控復(fù)雜神經(jīng)元,保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞,其水平變化可以反應(yīng)膠質(zhì)細(xì)胞的正常狀況[9]。HMGB1是一種高度保守的核蛋白,屬于高遷移率族蛋白家族,主要分布在細(xì)胞核中,當(dāng)組織在受到刺激后會釋放至細(xì)胞外,與受體相結(jié)合,介導(dǎo)多種細(xì)胞合成與炎性介質(zhì),激發(fā)炎癥反應(yīng),加重腦組織缺血再灌注損傷[10]。FKN是一種趨化因子,屬于CX3C家族,常表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞與神經(jīng)細(xì)胞表面,具有介導(dǎo)細(xì)胞黏附與趨化的雙重生物學(xué)作用[11]。臨床發(fā)現(xiàn),NSE、S100b、HMGB1、FKN在血液中的含量較低,由于血腦屏障被破壞,中樞神經(jīng)系統(tǒng)釋放以上物質(zhì)至外周血,其水平變化能夠反映患者腦損傷程度[12,13]。
本研究中 ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值均顯著的高于對照組 (P<0.05),表明 NSE、S100b、HMGB1、FKN 水平與 ACI患病具有正相關(guān)性,可能由于ACI發(fā)病后,神經(jīng)元細(xì)胞膜完整性被破壞,神經(jīng)細(xì)胞所釋放的NSE、S100b、HMGB1、FKN水平增加,通過破壞的毛細(xì)血管進(jìn)入血液循環(huán)中,使得外周血中蛋白含量高于正常水平,同時(shí)HMGB1促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生,使患者病情加重。本研究發(fā)現(xiàn),輕度組、中度組及重度組的 ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN及 CEI值組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且隨著病情程度的加重,患者的血清NSE、S100b、HMGB1、FKN及CEI值均呈顯著的上升趨勢,這提示 NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI 值升高會增加患者機(jī)體炎癥反應(yīng),加重血管和神經(jīng)細(xì)胞的損傷程度,從而加劇斑塊破裂,促進(jìn)動脈粥樣硬化形成,使腦組織的損傷程度加重,因此監(jiān)測NSE、S100b、HMGB1、FKN 及 CEI值水平的變化,可以有效監(jiān)測病情的動態(tài)變化,對腦梗死進(jìn)展具有預(yù)測意義。
CEI作為一種新型無創(chuàng)監(jiān)測技術(shù),將低頻安全電流注入患者大腦左右半球,經(jīng)檢測兩半球電阻抗系數(shù)之差,反應(yīng)腦組織水腫的嚴(yán)重程度,一般而言,CEI數(shù)值越高,腦梗死面積越大,腦水腫越嚴(yán)重[14,15]。
本研究跟蹤觀察以上指標(biāo)與CEI、NIHSS評分, 結(jié)果顯示,ACI患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN與NIHSS評分均呈顯著的正相關(guān)關(guān)系(P<0.05);ACI組患者的血清 NSE、S100b 與 CEI值呈顯著的正相關(guān)關(guān)系 (P<0.05), 這說明 NSE、S100b、HMGB1、FKN可作為腦損傷的標(biāo)志物,與NIHSS、CEI具有密切聯(lián)系,可通過檢測其水平變化評價(jià)腦損傷的嚴(yán)重程度、治療效果。
綜上所述,本研究在傳統(tǒng)的檢測ACI血清指標(biāo)的基礎(chǔ)上加入 NSE、S100b、HMGB1、FKN, 同時(shí)分析血清蛋白、因子在ACI不同病情患者的表達(dá)水平變化,及其與NIHSS、CEI的相關(guān)性,以具體的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)了 NSE、S100b、HMGB1、FKN 在 ACI發(fā)生、病情發(fā)展及預(yù)后的顯著價(jià)值。表明ACI組患者的血清 NSE、S100b、HMGB1、FKN 顯著升高,與患者病情程度、腦水腫程度關(guān)系密切。