張迎春，崔 鑫，朱廣藝，蘭鄒然，宋健穎，胡建軍

（1. 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第一師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆阿拉爾 843300；2. 塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，新疆阿拉爾 843300；3. 山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟(jì)南 250022）

牛傳染性鼻氣管炎（Infectious bovine rhinotracheitis，IBR）又稱壞死性鼻炎（Necroticrhinitis）、紅鼻?。≧ed nose disease）、傳染性膿皰外陰-陰道炎，是由牛傳染性鼻氣管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus，IBRV）或稱牛皰疹病毒Ⅰ型（Bovine herpes virus，BHV-1）所引起的一種牛接觸性傳染病，以上呼吸道炎癥、鼻炎、竇炎、高熱、呼吸困難、流鼻液等為主要臨床表現(xiàn)，亦可表現(xiàn)為母牛流產(chǎn)或產(chǎn)死胎、腸炎、小牛腦炎，以及結(jié)膜炎、乳房炎等病癥，新生犢?？蔀槿硇约膊。⒖砂橛心X炎。秋冬季是本病的高發(fā)季節(jié)，病變組織、分泌物、隱性帶毒牛為最危險(xiǎn)傳染源，這給本病防治和凈化帶來極大困難[1-3]。

20世紀(jì)70年代，我國從進(jìn)口種牛中發(fā)現(xiàn)本病并分離和鑒定了該病毒。20世紀(jì)80年代，封啟民等[4]開展了國內(nèi)部分省區(qū)的血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)多數(shù)地區(qū)的黑白花乳牛、黃牛和水牛中都有不同程度的IBRV 感染。目前，國內(nèi)大部分省（自治區(qū)、直轄市）的各種牛群中均存在此病毒感染，且感染程度不一[5-11]。近年來，隨著新疆奶牛業(yè)的發(fā)展，IBR發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。本研究應(yīng)用血清學(xué)方法，對(duì)新疆南疆部分規(guī)模牛場(chǎng)IBR進(jìn)行了血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查，以期為該病的綜合防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病例定義 IBR抗體陽性場(chǎng)：經(jīng)檢測(cè)，場(chǎng)內(nèi)有1頭或1頭以上IBR抗體陽性個(gè)體的奶牛場(chǎng)；IBR抗體陰性場(chǎng)：經(jīng)檢測(cè)，場(chǎng)內(nèi)未檢測(cè)到IBR抗體陽性個(gè)體的奶牛場(chǎng)；IBR抗體陽性個(gè)體：經(jīng)IBR-Ab-ELISA抗體試劑盒檢測(cè)，為IBR抗體陽性的奶牛。

1.1.2 研究類型與對(duì)象 本研究的目標(biāo)群體是新疆南疆某地區(qū)所有規(guī)?；膛?chǎng)的奶牛，所有奶牛場(chǎng)都列入抽樣框。

1.1.3 樣本來源及抽樣原則 以預(yù)期流行率抽樣原則，根據(jù)文獻(xiàn)及專家建議，成年牛和犢牛分別采用分階段抽樣原則。第一階段，采取普查的方法，14個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)全部作為抽樣單元；第二階段，抽樣場(chǎng)內(nèi)按照95%置信水平（CI）、10%可接受誤差、50%預(yù)期流行率進(jìn)行抽樣。共采集1 157份成年血清樣本、640份犢牛血清樣本，?20 ℃保存?zhèn)溆谩Ｋ蓸悠访庖弑尘扒宄?，均未免疫IBR疫苗。

1.1.4 主要試劑 牛傳染性鼻氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒，購自SVANOVIR? IBR-Ab ELISA瑞典生物科技公司。

1.1.5 儀器設(shè)備 小型高速冷凍離心機(jī)（Centrifuge 5415R，Eppendorf公司），單道微量移液器（Finnpipette F3/Thermo科技有限公司），多孔道微量移液器（Research plus/Eppendorf科技有限公司），37 ℃培養(yǎng)箱（GSP-9080MBE/上海博訊有限公司），多功能全波長(zhǎng)96孔酶標(biāo)儀（xMarkTM/美國Bio-Rad公司），潔凈無菌工作臺(tái)。

1.1.6 牛傳染性鼻氣管炎抗體ELISA檢測(cè) 參照IBR抗體檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行ELISA試驗(yàn)。

1.1.7 數(shù)據(jù)分析 對(duì)IBR抗體檢測(cè)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，用 Excel進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 規(guī)模奶牛場(chǎng)IBR抗體檢測(cè)

2.1.1 規(guī)模奶牛場(chǎng)成年母牛IBR抗體檢測(cè) 14個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)按照預(yù)期流行率抽樣原則，共采集1 157份成年母牛血清樣品，IBR抗體ELISA檢測(cè)結(jié)果如表1所示。14個(gè)場(chǎng)內(nèi)，成年母牛IBR抗體陽性率為1.25%～95.00%（圖1）。

表1 2017年規(guī)模奶牛場(chǎng)成年母牛IBR抗體檢測(cè)結(jié)果

圖1 規(guī)模奶牛場(chǎng)成年母牛IBR抗體陽性率變化情況

2.1.2 規(guī)模奶牛場(chǎng)犢牛IBR抗體檢測(cè)結(jié)果 14個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)按照預(yù)期流行率抽樣原則，共采集640份犢牛血清樣品，IBR抗體ELISA檢測(cè)結(jié)果如表2所示。14個(gè)場(chǎng)內(nèi)犢牛IBR抗體陽性率在8.70%～95.83%之間（圖2）。

表2 2017年規(guī)模奶牛場(chǎng)犢牛IBR抗體檢測(cè)結(jié)果

圖2 規(guī)模奶牛場(chǎng)犢牛IBR抗體陽性率變化情況

3 分析與討論

3.1 規(guī)?；膛?chǎng)IBR血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查

采用血清流行病學(xué)調(diào)查，可以在較大范圍內(nèi)快速了解規(guī)模奶牛場(chǎng)IBR感染狀況。本調(diào)查基于預(yù)期流行率的抽樣策略，開展了IBR感染抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)群間抗體陽性率為100%，證實(shí)在新疆南疆地區(qū)2017年期間14個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)均有IBR感染，群間感染比例較高，表明IBR在該地分布已經(jīng)十分廣泛。

對(duì)14個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)群內(nèi)個(gè)體感染率進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)IBR抗體ELISA檢測(cè)，14個(gè)場(chǎng)內(nèi)，成年母牛IBR抗體陽性率在1.25%～95.00%之間，犢牛IBR抗體陽性率在8.70%～95.83%之間。通過比較分析發(fā)現(xiàn)，14個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)中，A、B、L、M、N等場(chǎng)成年母牛IBR抗體陽性率在1.25%～9.41%之間，H、F在15.00%～25.00%之間，C、D、E、G、I、J、K均在55.29%～95.00%之間，說明場(chǎng)內(nèi)個(gè)體感染程度比較嚴(yán)重，需引起高度重視。

犢牛IBR抗體陽性，一方面與母源抗體有關(guān)，另一方面與感染性抗體有關(guān)。本調(diào)查中，該地區(qū)規(guī)模牛場(chǎng)犢牛IBR抗體陽性率在8.70%～95.83%之間，也進(jìn)一步說明該地區(qū)規(guī)模奶牛場(chǎng)IBR感染形勢(shì)較為嚴(yán)峻。

IBR 呈世界性分布，在養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達(dá)的地區(qū)，該病流行更為嚴(yán)重，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)健康發(fā)展。流行病學(xué)調(diào)查表明，幾乎所有國家的牛群都能不同程度地檢出 IBRV 抗體。國內(nèi)大多數(shù)省份的各種牛群中均存在IBR感染。在新疆南北疆地區(qū)牛場(chǎng)亦出現(xiàn)IBR發(fā)病情況。季新成等[13]對(duì)新疆15個(gè)不同地區(qū)的635份牛血清進(jìn)行了IBR抗體血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)最高感染率達(dá)90%，最低感染率為5%，平均感染率達(dá)到51.8%。李靜等[14]對(duì)新疆部分地區(qū)奶牛場(chǎng)進(jìn)行IBR血清學(xué)抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)平均陽性率為82.5%。劉潔瓊等[15]在新疆5個(gè)規(guī)模奶牛場(chǎng)進(jìn)行IBR血清學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)陽性率為80.7%，同時(shí)對(duì)新疆天山牧區(qū)的牦牛也進(jìn)行了IBR抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)陽性率達(dá)到68.3%。殷濤等[16]對(duì)采自新疆南北疆6個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)IBR抗體檢測(cè)陽性率為88.4%。經(jīng)上述流行病學(xué)調(diào)查分析證實(shí)，新疆南北疆地區(qū)規(guī)模牛場(chǎng)已普遍感染IBR。

本調(diào)查的局限性在于，部分規(guī)模場(chǎng)采血量少，無法分離出血清，或者分離的血清樣本出現(xiàn)了溶血現(xiàn)象，因此血清樣本略少于50%的預(yù)計(jì)流行率抽樣要求。該地區(qū)14個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)場(chǎng)群數(shù)量相對(duì)較少，未開展不同牛場(chǎng)牛感染IBR風(fēng)險(xiǎn)因素的調(diào)查研究。

4 結(jié)論與建議

從血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果來看，該地區(qū)規(guī)模牛場(chǎng)已普遍存在IBR感染，不同規(guī)模牛場(chǎng)的IBR抗體陽性率高低不一。對(duì)于IBR抗體陽性率高的規(guī)模牛場(chǎng)應(yīng)該加強(qiáng)檢疫，降低飼養(yǎng)密度，隔離病畜、犢牛，加強(qiáng)生物安全措施，適時(shí)進(jìn)行疫苗免疫接種；對(duì)于IBR抗體陽性率低的規(guī)模牛場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)生物安全措施，隔離、淘汰病畜，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)。在引種/引進(jìn)精液前，需要進(jìn)行IBR抗體/抗原檢測(cè)，不從高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)牛場(chǎng)調(diào)入牛只。另外，秋、冬季是IBR高發(fā)季節(jié)，應(yīng)加強(qiáng)御寒措施，防止因氣溫變化太大而出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)。