潘本友,宋靜芳,張海濤
(1.貴州省貴陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,貴州 貴陽 550002;2.貴州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系,貴州 貴陽 550004)
在臨床檢驗(yàn)工作中,臨床醫(yī)生經(jīng)常會(huì)質(zhì)疑檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。作為檢驗(yàn)人員,我們不僅要提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,還要考慮臨床用藥對(duì)我們檢驗(yàn)結(jié)果的影響。還原型谷胱甘肽(GSH)對(duì)基于Trinder反應(yīng)的氧化酶法檢驗(yàn)項(xiàng)目的負(fù)面影響也是眾所周知,但是具體的影響程度報(bào)告較少[1-2],且各不相同。本實(shí)驗(yàn)就GSH對(duì)部分氧化酶法檢測項(xiàng)目的影響進(jìn)行研究,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 儀器及試劑
1.1.1 儀器:HITACHI7600全自動(dòng)生化分析儀。
1.1.2 試劑
(1)還原型谷胱甘肽鈉:昆明積大制藥股份有限公司生產(chǎn),規(guī)格:1.2g/瓶,批號(hào)161205,生產(chǎn)日期:2016年12月5日,有效期至:2019年12月4日。
(2)TC(批號(hào)16-0913)、TG(批號(hào)16-1011)、UA(批號(hào)16-1215)、Cre(批號(hào)16-0919)、GLU(批號(hào) 16-1012)、HDL-C(批號(hào)16-0906)、LDL-C(批號(hào)16-0606):由北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。
1.2 校準(zhǔn)品:
1.2.1 TC、TG、UA、Cre、GLU:由英國朗道有限公司生產(chǎn),批號(hào)1001UN。
1.2.2 HDL-C、LDL-C:由北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)16-0706。
1.3 質(zhì)控品
1.3.1 UA、Cre、GLU:由英國朗道有限公司生產(chǎn),批號(hào)764UE、1027UN。
1.3.2 TC、TG、HDL-C、LDL-C:由上海昆淶生物科技有限公司生產(chǎn),批號(hào)592-2、592-3。
1.4 方法 將注射用還原型谷胱甘肽鈉凍干粉用4 ml生理鹽水溶解至外觀澄清,配成濃度300 mg/ml GSH液體。收集本院當(dāng)日體檢血清混勻作為基礎(chǔ)血清,并與300 mg/ml GSH溶液配成實(shí)驗(yàn)所需濃度,即0.00 mg/ml、0.15 mg/ml、0.30 mg/ml、0.45 mg/ml、0.60 mg/ml、1.20 mg/ml、1.50 mg/ml、3.00 mg/ml、4.50 mg/ml、6.00 mg/ml、7.50 mg/ml,混勻后進(jìn)行TC、TG、UA、Cre、GLU、HDL-C、LDL-C等項(xiàng)目檢測,所有項(xiàng)目均在實(shí)驗(yàn)室控制范圍內(nèi),每個(gè)項(xiàng)目平行測定三次并計(jì)算均值(X),以上均盡量避光操作。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,每組計(jì)量用“±s”表示,采用單因素方差(one-way ANOVA)進(jìn)行組內(nèi)比較。
2.1 不同GSH濃度時(shí),各項(xiàng)目檢測結(jié)果均值GSH濃度為0.30 mg/ml時(shí),對(duì)GLU、UA的檢測結(jié)果影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GSH濃度為0.45 mg/ml時(shí),對(duì)TG的檢測結(jié)果影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GSH濃度為0.60 mg/ml時(shí),對(duì)TC的檢測結(jié)果影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GSH濃度為1.20 mg/ml時(shí),對(duì)Cre的檢測結(jié)果影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GSH濃度為3.00 mg/ml時(shí),對(duì)HDL-C的檢測結(jié)果影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);GSH濃度為6.00 mg/ml時(shí),對(duì)LDL-C的檢測結(jié)果影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。
表1 不同GSH濃度時(shí)各項(xiàng)目測定均值(±s)
表1 不同GSH濃度時(shí)各項(xiàng)目測定均值(±s)
注:與GSH濃度為零時(shí)進(jìn)行比較,aP<0.05,aaP<0.01
GSH(mg/ml)0.00 0.15 0.30 0.45 0.60 1.20 1.50 3.00 4.50 6.00 7.50 TC(mmol/L)4.72 4.59 4.30 4.14 4.03a 3.41a 3.33a 1.99aa 1.30aa 0.95aa 0.67aa TG(mmol/L)1.12 1.05 0.96 0.89a 0.80a 0.58aa 0.51aa 0.20aa 0.10aa 0.08aa 0.06aa GLU(mmol/L)5.39 4.64 4.51a 4.47a 4.13a 3.63a 3.42a 2.32aa 1.70aa 1.34aa 1.09aa Cre(mmol/L)63.30 60.53 57.37 55.33 55.27 49.90a 45.00a 34.90a 26.93aa 20.90aa 16.80aa UA(mmol/L)260.80 233.40 200.10a 174.73a 153.50a 77.12aa 65.15aa 8.47aa-2.67aa-8.53aa-11.40aa HDL-C(mmol/L)1.48 1.48 1.48 1.47 1.45 1.42 1.37 1.19a 0.95a 0.79a 0.62aa LDL-C(mmol/L)3.19 3.13 3.12 3.11 3.10 3.09 3.05 2.92 2.76 2.53a 2.11a
2.2 不同GSH濃度時(shí),各項(xiàng)目結(jié)果影響具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義走勢,見圖1。
圖1 各項(xiàng)目結(jié)果影響具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義走勢圖
GSH是機(jī)體重要的生物活性物質(zhì),廣泛分布于人體各組織器官內(nèi),由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成。正常情況下以硫醇還原型存在,在許多生命活動(dòng)中起直接或間接作用,參與體內(nèi)三羧酸循環(huán)及糖代謝,為機(jī)體提供能量[3]。GSH具有廣泛的生理和藥理活性[4],臨床上主要用于藥物性肝腎損傷、病毒性肝炎、膽汁淤積、化療患者、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺疾病、以及中毒等疾病的治療[5-8]。有研究報(bào)告[9],健康者隨著給藥方式及劑量的不同,給藥后GSH在血液中的濃度在2 h內(nèi)達(dá)到峰值,但達(dá)峰時(shí)間是各不相同的,有較大的個(gè)體差異。
在臨床生化檢驗(yàn)方法中,氧化酶法測定的最終原理是過氧化氫與4-氨基安替比林及酚類在過氧化物酶的作用下生產(chǎn)紅色的醌亞胺化合物。而許多還原性物質(zhì)(如:還原型谷胱甘肽、維生素C、尿酸、抗壞血酸、膽紅素等)與過氧化氫反應(yīng),使氧化酶法反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的過氧化氫濃度降低,從而干擾了氧化酶法的最終反應(yīng),使檢測結(jié)果偏低[10]。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們得知:GSH濃度對(duì)部分氧化酶法項(xiàng)目的影響程度各不相同,其中最大的是UA和GLU,最小的是LDL-C。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的自動(dòng)化檢測參數(shù),盡管Cre、UA、HDL-C和LDL-C的分析方法及測光點(diǎn)一致,但GSH對(duì)各項(xiàng)目的影響均不一樣。GLU、TC和TG的分析方法及測光點(diǎn)一致,GSH對(duì)各項(xiàng)目的影響也不一樣。而相同的GSH濃度,對(duì)各項(xiàng)目的影響為什么不同呢?本研究認(rèn)為:可能是各試劑添加的抗干擾成分及量的不同,或者在各個(gè)反應(yīng)過程中過氧化氫產(chǎn)生的時(shí)間及速度的不同。具體原因有待進(jìn)一步研究證實(shí)。而本次實(shí)驗(yàn)與其他研究[1-2]相比也存在差異,主要是GSH對(duì)各檢測項(xiàng)目的影響不同。這可能是檢測系統(tǒng)之間的差異,特別是檢測試劑的抗干擾性不同引起。
隨著GSH的廣泛應(yīng)用,對(duì)檢測結(jié)果的影響已不容忽視,應(yīng)引起大家的重視。盡管目前各試劑廠家都加強(qiáng)了試劑的抗干擾性,但是沒有徹底解決藥物對(duì)檢測的干擾問題。因此,為減少或避免藥物對(duì)檢測結(jié)果的影響,臨床醫(yī)護(hù)人員要根據(jù)各藥物代謝動(dòng)力學(xué)規(guī)律,在合適的時(shí)間進(jìn)行抽血檢驗(yàn),從而避免對(duì)患者病情作出錯(cuò)誤判斷。