杜阿妮，趙智凝，曹 蓉

咳嗽是最常見的呼吸道癥狀之一，咳嗽變異性哮喘（CVA）是指以慢性咳嗽為唯一或主要臨床表現(xiàn)的一種特殊類型哮喘，存在氣道高反應性[1-2]。CVA的病因及發(fā)病機制尚不完全清楚，其常發(fā)生于夜間及清晨[3]。研究表明，CVA具有氣道重構、氣道高反應性及嗜酸粒細胞性氣道炎癥等典型哮喘的特征[4]。嗜酸性粒細胞（EOS）是來源于骨髓的非分裂細胞，可分泌活性氧介質、脂質介質、顆粒介質等，在CVA氣道炎癥反應中發(fā)揮最終效應作用[5]。嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（ECP）是由EOS釋放的毒性蛋白顆粒，會導致哮喘患者氣道上皮損傷、誘導肥大細胞釋放組胺等，從而引起氣道高反應性[6]。IgE是血清中的最少抗體族，哮喘患者在發(fā)病過程中，IgE可引起肥大細胞脫顆粒，介導了早期反應和晚期反應[7]。EOS、ECP和IgE均可作為檢測CVA和哮喘的指標，但在以往的研究中，對于三者聯(lián)合檢測在CVA與哮喘鑒別診斷中的應用很少，且CVA沒有明顯的喘息癥狀，很容易被漏診或誤診。因此，本研究通過檢測CVA患兒、哮喘患兒及正常兒童的血清ECP、IgE和外周血EOS水平，了解這些指標與CVA和哮喘發(fā)作的關系，探究血清ECP、IgE和外周血EOS聯(lián)合檢測對CVA與哮喘的鑒別診斷價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 以2015年5月～2018年1月筆者收治的CVA患兒60例作為CVA組，納入標準：年齡6～14歲，符合CVA的診斷標準(以咳嗽為主要癥狀，夜間、清晨明顯，病程≥1個月，胸部X線檢查未見異常)；停用所有可能影響激發(fā)試驗及誘導痰等檢查項目的藥物。以同期筆者收治的哮喘患兒60例作為哮喘組，納入標準：年齡6～14歲；符合哮喘的診斷標準，近4 w內未用激素治療；病程≤2年。另選擇同期在本院體檢的正常兒童160例作為正常組，均無哮喘、CVA史，無個人及家族過敏史。

3組排除標準：纖毛不動綜合征、支氣管肺發(fā)育不良、肺結核等疾病患兒；不愿意或不能配合研究者；合并其他系統(tǒng)嚴重疾病影響本研究正常進行者；入選時有呼吸道感染或日?？诜に氐人幬镎?；合并有其他免疫性疾病患者。

本研究得到了3組入選者家長的知情同意，醫(yī)院倫理委員會也批準了本研究。3組入選者的身高、體重、性別、年齡等比較均無顯著差異(P＞0.05，表1)。

1.2 樣本采集 分別留取3組入選者的空腹靜脈血4 ml(避免溶血)，室溫靜置2 h，2000 r/min離心15 min，分離血清，-80℃冰箱保存，統(tǒng)一檢測。

1.3 檢測指標 采用ELISA法測定血清ECP與IgE濃度，試劑盒來自上海銳聰實驗室設備有限公司和美國賽默飛世爾公司；使用ACTS血細胞分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）檢測外周血EOS計數(shù)。參考婁慶[8]的方法，采用受試者工作特征曲線（ROC曲線）確定診斷臨界值。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS22.00統(tǒng)計軟件分析，計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，計數(shù)數(shù)據(jù)以例和百分率表示，3組間數(shù)據(jù)的比較采用方差分析，兩組間數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗或t檢驗，假設檢驗水平為α=0.05。

2 結果

2.1 3組血清ECP、IgE和外周血EOS水平比較3組ECP、IgE和外周血EOS水平均表現(xiàn)為哮喘組＞CVA 組＞正常組(P＜ 0.05，表 2)。

表13 組一般資料比較

表23 組血清ECP、IgE和外周血EOS水平比較

2.2 鑒別診斷 在CVA與哮喘組患兒中，以ECP 15 μg/L、IgE 500 ng/ml和 EOS 計數(shù) 0.20×109/L 作為診斷臨界值，血清ECP、IgE和外周血EOS聯(lián)合檢測鑒別診斷CVA與哮喘的敏感性、特異性、準確性分別為91.6%、90.0%和86.7%。

3 討論

咳嗽具有防御功能，是機體的保護性反射，但長期咳嗽可導致各種并發(fā)癥的發(fā)生。CVA是兒科常見的就診原因之一，也是主要的咳嗽類型。CVA的發(fā)生機制與哮喘相似，如果不對CVA進行早期干預，大約有30%的CVA患兒會出現(xiàn)喘息癥狀，并發(fā)展為典型哮喘[9-10]。ECP是一組分子量為21～29 kD的單鏈堿性含糖蛋白質，可引起多種病理生理改變，導致氣道反應性增高，而檢測血清ECP可直接反映氣道內EOS的活化程度。哮喘是由外源性致敏原引發(fā)的，屬于IgE介導的Ⅰ型變態(tài)反應性疾病。IgE通過與免疫細胞結合，使之致敏，當致敏原再次進入機體時，可以使致敏細胞釋放炎癥介質而導致CVA發(fā)作，并有可能發(fā)展為哮喘[11]。

盡管目前CVA的發(fā)病機制尚沒有完全明了，但是氣道重構是機體對損傷性刺激的一種修復反應，可表現(xiàn)為細胞外基質的沉積以及肺彈性支持力的喪失。EOS具有吞噬作用，是引起氣道變態(tài)反應、氣道高反應性的關鍵細胞。本研究顯示，3組的EOS計數(shù)為哮喘組＞CVA組＞正常組(P＜0.05)，表明CVA與哮喘是同一病變過程的不同表現(xiàn)形式?；颊呦l(fā)作時，其機體處于高度敏感致炎的狀態(tài)，能夠刺激機體分泌大量EOS；CVA只是沒有明顯氣道痙攣，而患者的特應性體質沒有改變，因此，EOS計數(shù)少于哮喘組。

CVA與哮喘都是由EOS、T淋巴細胞、肥大細胞等效應細胞分泌一系列炎癥介質而誘發(fā)的氣道慢性炎癥[12-14]。IgE與肥大細胞等炎癥細胞結合，可引起氣道乃至全身的炎癥；ECP主要是由活化的EOS分泌的，其在變態(tài)反應中起重要作用[15-17]。本研究發(fā)現(xiàn)，以 ECP 15 μg/L、IgE 500 ng/ml和 EOS 計數(shù)0.20×109/L作為診斷臨界值，血清ECP、IgE和外周血EOS聯(lián)合檢測鑒別診斷CVA與哮喘的敏感性、特異性、準確性分別為91.6%、90.0%和86.7%，表明三者聯(lián)合檢測，可有效鑒別診斷CVA與哮喘。

綜上所述，CVA與哮喘患兒血清ECP、IgE和外周血EOS水平均高于正常值，且哮喘患兒上述指標均高于CVA患兒。血清ECP、IgE和外周血EOS聯(lián)合檢測可有效鑒別診斷CVA與哮喘。