勞揚
摘要:脂肪是食品檢測中常見的項目。大多作為營養(yǎng)指標(biāo)。在特殊食品中也作為限制指標(biāo)。因此。掌握脂肪的分析測定方法對于食品檢測尤為重要。通過總結(jié)比較目前常用的幾種脂肪測定方法的原理和特點。并對其改進(jìn)措施進(jìn)行探討。為不同食品中脂肪的檢測應(yīng)用和發(fā)展提供一定參考。
關(guān)鍵詞:食品 脂肪 檢測
一、主要測定方法及其原理
(一)索氏提取法
脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸結(jié)合成的脂類化合物,能溶于脂溶性有機(jī)溶劑。將經(jīng)前處理而分散且干燥的樣品用無水乙醚或石油醚等溶劑回流提取,使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物,即為脂肪(或粗脂肪)。一般食品用有機(jī)溶劑提取,揮干有機(jī)溶劑后稱得的重量主要是游離脂肪,此外,還含有磷脂、色素、樹脂、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì),所以用此法測得的脂肪,也稱粗脂肪。
粗脂肪含量是糧食、油料、飼料等產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中重要的質(zhì)量指標(biāo),是評價產(chǎn)品品質(zhì),組織生產(chǎn)的重要依據(jù)之一。國內(nèi)外測定粗脂肪含量的方法有十余種之多,索氏抽提法是目前應(yīng)用最廣泛的測定方法,是公認(rèn)的脂肪含量測定的經(jīng)典方法。
(二)酸水解法
在對食品脂肪的檢驗方法中,酸水解法是用得較多的方法,原因是它操作簡單,對操作環(huán)境的污染較小。其原理是:將試樣與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解,使結(jié)合或包藏在組織里的脂肪游離出來,再用乙醚和石油醚提取脂肪,回收溶劑,干燥后稱量,提取物的重量即為脂肪含量。
本方法對固體、半固態(tài)、粘稠體或液體食品,特別是加工后的混合食品,容易吸濕、結(jié)塊,不易烘干的食品,不能采用索氏抽提法時,用此法效果較好。但不宜測定含有大量磷脂和含糖量高的食品,因為磷脂遇酸加熱時會分解為脂肪酸和堿,而糖類遇強(qiáng)酸易碳化而影響測定結(jié)果。
(三)哥特里-羅紫法
原理:利用氨-乙醇溶液破壞乳的膠體性狀及脂肪球膜,使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中,而脂肪游離出來,再用乙醚-石油醚提取出脂肪,蒸餾去除溶劑后,殘留物即為乳脂肪。
本方法是測定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)分析法,準(zhǔn)確度高于巴布科克法和蓋勃法。
(四)巴布科克法和蓋勃法
原理:用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì)等非脂成分,將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的乳糖和蛋白質(zhì),使脂肪球膜被破壞,脂肪游離出來,再利用加熱離心,使脂肪完全迅速分離,直接讀取脂肪層的數(shù)值,便可知被測乳的含脂率。
這兩種方法都是測定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)方法,適用于鮮乳及乳制品的測定。對含糖多的乳品采用此方法時糖易焦化,使結(jié)果誤差較大,故不適宜。另外,巴布科克法的準(zhǔn)確度比蓋勃法稍高。
(五)自動化儀器分析方法
目前,測定牛奶中脂肪較先進(jìn)的方法包括乳脂快速測定儀、牛乳成分綜合分析儀等。
乳脂快速測定儀是利用比濁分析測定脂肪含量,其原理是:用螯合劑破壞牛奶中懸浮的酪蛋白膠束,使其溶解,使懸浮物中只有脂肪球,用均質(zhì)機(jī)將脂肪球大小調(diào)整均勻,再稀釋達(dá)到能夠應(yīng)用朗伯一比爾定律測定的濃度范圍,因而可以和通常的光吸收分析一樣測定脂肪的濃度。
牛乳成分綜合分析儀是利用紅外線分光分析測定牛乳中的脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖及固體成分(或水分)。
二、研究進(jìn)展
(一)索氏抽提法的改進(jìn)
在實際工作中,索氏抽提法存在的問題主要是抽提時間過長和抽提結(jié)束后抽提瓶不易恒重。圍繞這些問題,鐘艷梅等人對索氏抽提法進(jìn)行了改進(jìn)與探討,在最后的脂肪定量中改接收瓶烘干增重法為樣品烘干減重法,同時將抽提筒內(nèi)放置的樣品包數(shù)量,由原方法的1個改為3個,實現(xiàn)了多個樣品同時檢測,不僅節(jié)約試劑和節(jié)省時間,還減少了檢測工作量,提高了工作效率。精密度試驗和差異顯著性檢驗結(jié)果表明,該法完全可替代原方法。
潘能斌利用食品中脂肪易被乙醚或石油醚等有機(jī)溶劑浸出提取的原理,改用將試樣用乙醚或石油醚浸泡過夜,過濾、振搖、洗滌并回收溶劑的方法,測定食品中的脂肪含量,結(jié)果表明,其準(zhǔn)確度和精密度均符合檢驗要求。
索氏抽提法會受到索氏抽提裝置的局限,不能同時做多份樣品,給檢測工作帶來不便。而采用此方法可大大縮短檢測時間,提高工作效率。此方法可以防止有機(jī)溶劑的大量揮發(fā)損失,防止污染實驗室環(huán)境。
(二)乳及乳制品中脂肪的檢測方法
脂肪是評價乳品質(zhì)量優(yōu)劣的重要衛(wèi)生學(xué)指標(biāo),測定乳制品中脂肪方法較多,有哥特里-羅紫法、蓋勃氏法、巴布科克氏法等。目前,針對前面幾種方法存在的缺點,提出了很多的改進(jìn)方法,同時也新的測定方法出現(xiàn)。
黃曉東等人提出通過確定了硫酸的滴加速度,改變離心條件來對巴氏法測定牛乳脂肪進(jìn)行改進(jìn)。
實驗發(fā)現(xiàn),濃硫酸在3~5min內(nèi)均勻滴加到乳脂瓶中時,溶液呈棕黑色,脂肪層上下液面比較清晰,讀數(shù)穩(wěn)定,且耗時適中。實驗得到的最佳的離心條件為離心轉(zhuǎn)速1500r/nin,離心時間14min,水浴溫度70℃。
另外,胡培勤等人通過建立一種用FOSS的酸水解一索氏總脂肪分析系統(tǒng)對液體乳制品中總脂肪的測定方法。方法為樣品經(jīng)soxcap杯式酸水解儀用鹽酸水解處理,然后經(jīng)soxteCM2050索氏提取儀用石油醚,乙醇混合溶劑提取脂肪,直接提取出來的脂肪獲得結(jié)果。
(三)展望
食品中脂肪的測定一般采用國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法,但這種方法存在操作時間長,步驟繁瑣等問題。為了縮短測定時間,實現(xiàn)快速檢測,近年來研究出許多利用新技術(shù)對食品中脂肪進(jìn)行檢測的新方法,例如超聲提取快速測定法,近紅外光譜快速無損檢測法。另外,利用高效液相色譜、氣相色譜的方法還可以對脂肪中的成分進(jìn)行定性和定量分析。