白雄偉，張科

(漢中市人民醫(yī)院骨科，陜西 漢中 723000)

強直性脊柱炎(ankylosing Spondyilits,AS)屬風濕病范疇，為世界性疑難雜癥，與HLA-B27呈強關(guān)聯(lián)，其臨床表現(xiàn)為關(guān)節(jié)強直性病變，主要累及骶髂關(guān)節(jié)、脊柱及肌腱附著點。目前，AS病因尚未完全明確。遺傳、環(huán)境、免疫均與之相關(guān)，其中以細胞因子網(wǎng)絡(luò)異常為核心的免疫紊亂假說逐漸被臨床研究者所認同[1]，白介素(IL)作為免疫細胞間相互作用的淋巴因子,在信息傳遞，免疫細胞激活與調(diào)節(jié)， T、B細胞活化、增殖與分化的介導(dǎo)以及炎癥反應(yīng)中均起重要的作用[2]。IL-1家族細胞因子包括IL-lα、IL-lβ、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra、IL-36α、IL-37、IL-36β、IL-36γ、IL-38及IL-33，由多種細胞表達，為先天免疫及炎癥的中樞介質(zhì)，在免疫調(diào)節(jié)中起重要的作用。IL-34由241個氨基酸殘基組成，與單核細胞生長分化及破骨細胞的形成有關(guān)。本研究回顧性分析2016年1月至2018年1月本院收治的36例AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34檢測情況，旨在探討IL-1家族細胞因子及IL-34與AS發(fā)病機制的聯(lián)系，以及AS患者IL-1家族細胞因子和IL-34檢測的臨床應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年1月至2018年1月漢中市人民醫(yī)院確診的36例AS患者為研究對象，設(shè)為AS組，其中男性21例，女性15例，年齡28～47歲，平均(33.2±6.3)歲，病程3～7年，平均(5.8±1.2)年；選擇同期48名健康志愿者為對照組，其中男性28名，女性20名，年齡30～45歲，平均(33.6±6.8)歲。兩組研究對象性別、年齡構(gòu)成上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。AS患者在6個月內(nèi)均未接受免疫抑制、生物及激素治療，排除腫瘤、感染患者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理會批準通過，患者享有知情權(quán)。

1.2 診斷標準

AS診斷參考2001年我國《強直性脊柱炎診斷標準》，臨床表現(xiàn)：腰、脊柱、下肢關(guān)節(jié)炎、不對稱外周關(guān)節(jié)炎癥狀持續(xù)≥6周；夜間痛、晨僵≥0.5 h；家族史或HLA-B27陽性；虹膜睫狀體炎；足跟痛及其他肌腱附著點痛；非甾體抗炎藥可迅速緩解，符合上述臨床表現(xiàn)中的一項及相關(guān)的病理、影像學(xué)診斷支持可確診。

1.3 研究方法

受試者清晨空腹取血檢測血沉(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、IL-lα、IL-lβ、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra、IL-36α、IL-37、IL-36β、IL-36γ、IL-38、IL-33及IL-34。ESR采用魏氏法，CRP采用免疫比濁法，全自動生化分析儀為HITACHI7600，試劑由寧波美康生物有限公司提供，IL-1家族細胞因子采用蛋白芯片法，AAH—CYT-G1000試劑盒購自美國Raybiotech公司，IL-34采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，試劑由Bio-Legend公司提供。比較兩組研究對象各項檢測指標的差異性，并研究IL-1家族細胞因子、IL-34與ESR、CRP的關(guān)聯(lián)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

研究數(shù)據(jù)的分析處理采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 19.0，組間均值的比較采用t檢驗分析，相關(guān)性分析采用Pearson直線相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平比較

兩組研究對象IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平經(jīng)t檢驗分析比較見表1， ESR、CRP、IL-lα、IL-lβ、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra、IL-36α、IL-37、IL-34、ESR及CRP均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與對照組比較AS患者IL-lα、IL-18、IL-36α、IL-37、IL-34、ESR及CRP升高，IL-lβ、IL-1Ra、IL-36Ra降低。

表1 兩組研究對象IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平比較

2.2 AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平與ESR、CRP的相關(guān)性分析

AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平與ESR、CRP經(jīng)pearson相關(guān)性分析詳見表2，IL-lα、IL-34與ESR、CRP呈正相關(guān)，IL-1Ra與ESR、CRP呈負相關(guān)，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 AS患者IL-1家族細胞因子及IL-34血清水平與ESR、CRP的相關(guān)性分析

項目ESRr值P值CRPr值P值IL-lα0.3650.0140.4590.007IL-lβ-0.2970.098-0.3650.072IL-1Ra-0.3830.018-0.4280.034IL-180.2450.0680.3190.059IL-36Ra-0.4320.127-0.5430.095IL-36α0.2830.0930.3550.067IL-370.3160.0820.4690.061IL-340.3750.0320.4810.025

3 討論

AS又稱竹節(jié)狀脊椎屬結(jié)締組織疾病，早期病情隱匿，好發(fā)于青壯年男性，致殘率較高[3]，其基本病理病變?yōu)榧棺淀g帶的風濕性炎癥[4]。炎性病變由關(guān)節(jié)累及骨質(zhì)形成強直性病變。研究[5]發(fā)現(xiàn)AS患者機體存在多種細胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)的紊亂，多細胞因子諸如干擾素、血管內(nèi)皮生長因子等均參與了AS疾病的發(fā)病過程，且部分細胞因子與疾病的活動性關(guān)系密切。在骨關(guān)節(jié)炎性致病機制中，IL-1家族細胞因子為重要的決定因子，具有多效性及高效性。有研究[6]指出IL-1家族細胞因子及其受體拮抗蛋白與關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)分解、合成代謝平衡關(guān)系密切，本研究著重于IL-1家族細胞因子及IL-33與AS發(fā)病機制的關(guān)系探討。

IL-1家族細胞因子多數(shù)為細胞外分泌，為先天免疫與炎癥的中樞介質(zhì)，對機體免疫穩(wěn)態(tài)的維持作用較為關(guān)鍵[7]。其中IL-lα、IL-lβ、IL-18、IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-33具有促炎作用，而IL-1Ra、IL-36Ra、 IL-37、IL-38具有抑炎作用。本研究數(shù)據(jù)顯示：AS患者相對于對照組血清IL-lα、IL-18、IL-36α、IL-37、IL-34、ESR及CRP升高，IL-lβ、IL-1Ra、IL-36Ra降低。IL-1早期被稱為人白細胞致熱原，在結(jié)締組織中IL-1可促進成纖維細胞、角質(zhì)細胞增生及組織重建，促進骨質(zhì)吸收及膠原酶合成。IL-1骨代謝有重要的影響作用，IL-1為骨吸收因子，可促進骨髓細胞形成破骨細胞。IL-1主要包含IL-lα、IL-lβ兩種蛋白質(zhì)，IL-lα源自壞死細胞可促進炎癥的發(fā)展，IL-lβ則主要與炎癥細胞從血液到組織的浸潤有關(guān)[8]，IL-1Ra為IL-1的受體拮抗劑可下調(diào)IL-1介導(dǎo)的炎癥過程，抑制IL-1的生理活性。研究中AS患者血清IL-lα升高，IL-lβ、IL-1Ra 降低，反映了AS患者機體的炎性狀態(tài)。IL-18、IL-37屬于IL-18亞家族成員，IL-18可由成骨細胞、角質(zhì)化細胞產(chǎn)生，并可引發(fā)強烈的Th1炎癥反應(yīng)，有研究[9]發(fā)現(xiàn)AS患者存在嚴重的Th1/Th2失衡。IL-18可激活巨噬細胞及T細胞，促進炎性細胞因子及黏附因子的分泌，導(dǎo)致骨質(zhì)的損傷。AS患者的抑炎因子IL-37的升高源于機體免疫調(diào)節(jié)過程中的反饋性增高，IL-37可減少炎性因子IL-lα、TNF的產(chǎn)生。

IL-36亞族由單核細胞及B細胞分泌，包括IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-36Ra多種細胞因子。有研究[10]報道：在AS患者中IL-36α作為重要的促炎因子可出現(xiàn)升高。本研究數(shù)據(jù)符合上述觀點，IL-36Ra為IL-36的受體拮抗劑具有抗炎效能，在AS患者血清多呈現(xiàn)降低。IL-34存在于機體多種組織，目前臨床對IL-34的研究較為少見，其生理效能主要與巨噬細胞的分化增殖有關(guān)，在風濕性疾病中IL-34普遍增高，IL-34與巨噬細胞集落刺激因子擁有共同的受體，可誘導(dǎo)多種細胞因子及趨化因子的表達[11]。在AS患者IL-34出現(xiàn)升高，動物實驗[12]顯示：IL-34對破骨細胞具有分化作用。目前尚不了解IL-34與AS發(fā)病機制的關(guān)系，仍需進一步深入研究。CRP為急性實相反應(yīng)蛋白與ESR相似均與疾病的活動性相關(guān)，本研究相關(guān)性分析顯示：IL-lα、IL-34與ESR、CRP呈正相關(guān)，IL-1Ra與ESR、CRP呈負相關(guān)，均具統(tǒng)計學(xué)意義。

綜上所述，IL-1家族細胞因子和IL-34與AS關(guān)系密切，IL-1家族細胞因子和IL-34的檢測對AS的診斷及疾病的活動性有重要的臨床意義。