呂 玥，雷鈞濤

(1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；2.吉林醫(yī)藥學(xué)院,吉林 吉林 132013)

黑米是名貴珍稀稻種，屬于秈米或粳米，根據(jù)顏色不同，可分為黑、紫、紅雙色等品系[1]。黑米營養(yǎng)豐富，含有蛋白質(zhì)、維生素C、人體所必需的氨基酸以及鈣、鐵、鋅等礦物元素。其色素也具有極高的藥用價(jià)值，素來就有“藥米”“長壽米”“補(bǔ)血米”的美譽(yù)。

黑米色素為花色苷色素[2]，屬植物多酚類化合物，主要為花青素-3-鼠李葡萄糖苷和花青素-3-葡萄糖苷[3]，易溶于水、甲醇、乙醇等極性較大的溶劑，已用于食品的著色[4]。本研究采用浸提法，對(duì)影響黑米色素的提取因素進(jìn)行研究，并確定了其最佳提取工藝，為黑米色素的后續(xù)開發(fā)研究奠定理論基礎(chǔ)[5]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

黑米，吉林市售。黑米除雜，粉碎，過50目篩得黑米粉，備用。

蒸餾水、甲醇、無水乙醇，均為分析純。

AK-1000A型500克搖擺式中藥粉碎機(jī)；TD20002型電子天平；R201D型恒溫水浴鍋；SHZ-D(Ⅲ)型循環(huán)水式真空泵；80-1臺(tái)式電動(dòng)離心機(jī)；98-1-B型電子調(diào)溫電熱套；UV-1800紫外可見分光光度計(jì)。

1.2 提取工藝流程

黑米粉末→浸提(蒸餾水、甲醇、乙醇)→抽濾→離心→上清液濃縮→干燥→膏狀色素粗品。吸光度測定最大吸收波長為490 nm。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

采用浸提法提取黑米色素。以吸光度為考察指標(biāo)，分別考察浸提溫度、浸提時(shí)間、料液比各單因素在不同水平下對(duì)色素提取效果的影響，利用正交試驗(yàn)法確定黑米色素提取的最佳工藝。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同提取劑對(duì)黑米色素提取效果的影響

準(zhǔn)確稱取3份黑米粉末各5 g，按料液體積質(zhì)量比30∶1(mL/g)分別加入到蒸餾水、甲醇、無水乙醇提取劑中，于室溫回流浸提60 min。提取液3000 r/min離心15 min，取上清液。觀察顏色可見，水、乙醇浸提液為暗紫色，甲醇浸提液為紫紅色。表明提取劑不同對(duì)于黑米色素的提取效果也有不同，以水、乙醇為提取劑時(shí)顏色較甲醇更深。結(jié)合經(jīng)濟(jì)因素，選擇蒸餾水為浸提溶劑。

2.2 單因素試驗(yàn)

2.2.1浸提溫度對(duì)黑米色素提取效果的影響

準(zhǔn)確稱取7份黑米粉末各5 g，按料液比1∶30(g/mL)加入蒸餾水，分別于30、40、50、60、70、80、90 ℃的水浴鍋中回流浸提60 min。浸提液在490 nm處測吸光度，結(jié)果浸提溫度在30～80 ℃范圍內(nèi)時(shí)，溫度對(duì)黑米色素提取影響較為顯著。隨著溫度的升高，吸光度值也逐漸增大，80 ℃時(shí)達(dá)到峰值，隨后下降。因此，初步選擇80 ℃為最佳浸提溫度。

2.2.2料液比對(duì)黑米色素提取效果的影響

準(zhǔn)確稱取6份黑米粉末各5 g，分別按料液比1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶40(g/mL)加入蒸餾水，于80 ℃水浴鍋中回流浸提60 min。浸提液在490 nm處測吸光度。結(jié)果料液比在1∶10～1∶15(g/mL)時(shí)，吸光度值隨料液比的增大而增大，1∶15(g/mL)達(dá)到峰值，在1∶15～1∶40(g/mL)時(shí)，吸光度值逐漸下降。因此，初步選擇1∶15(g/mL)為最佳料液比。

2.2.3浸提時(shí)間對(duì)黑米色素提取效果的影響

準(zhǔn)確稱取6份黑米粉末各5 g，按料液比1∶15(g/mL)加入蒸餾水，分別于80 ℃水浴鍋中回流浸提10、30、60、90、120、150 min。浸提液在490 nm處測吸光度。結(jié)果浸提時(shí)間在10～30 min時(shí)，浸提時(shí)間越長，吸光度值越大，30 min達(dá)到峰值，此后，吸光度值急劇下降，120 min后下降減緩。因此，初步選擇30 min為最佳浸提時(shí)間。

2.3 正交試驗(yàn)

通過單因素試驗(yàn)，初步確定了浸提溫度、料液比及浸提時(shí)間，為得到最佳提取工藝，以上述3個(gè)因素為考察對(duì)象，以浸提液吸光度值為指標(biāo)，按L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)。因素水平設(shè)計(jì)見表1，正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。

由表2可見，各考察因素對(duì)黑米色素提取效果影響的主次順序?yàn)?A>C>B，即浸提溫度>料液比>浸提時(shí)間。方差分析結(jié)果為PA=0.015，PC=0.021，均小于0.05，PB=0.111>0.05?？烧J(rèn)為浸提溫度、料液比條件下各水平間總體均數(shù)不等。因此，最佳工藝組合為A3B2C2，即浸提溫度90 ℃，料液比1∶15(g/mL)，浸提時(shí)間30 min。在此工藝條件下進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，3次測得吸光度平均值為0.679。

表 1 因素水平表

表 2 正交試驗(yàn)結(jié)果

3 討 論

本研究通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，優(yōu)化黑米色素提取工藝，最終確定最佳提取工藝為:以蒸餾水浸提，浸提溫度90 ℃，料液比1∶15(g/mL)，浸提時(shí)間30 min。此條件下黑米色素吸光度平均值為0.679。

黑米色素是一種無毒無害的天然色素。周培劍[4]等利用黑米花色苷色素對(duì)絲織品進(jìn)行同浴染色，獲得較好的染色效果。說明黑米色素可作為一種不錯(cuò)的染色劑原料，用于紡織品、頭發(fā)的染色。其染色工藝還有待研究。