邱 燕 梅廣海
嗜水氣單胞菌廣泛分布于池水、淤泥等自然環(huán)境,常引起魚、鱉、鰻、牛蛙等水生動(dòng)物敗血癥或局部感染,導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物大量死亡,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成經(jīng)濟(jì)損失。目前對(duì)嗜水氣單胞菌引起的疾病多采用抗生素防治,本文通過藥物敏感試驗(yàn),選擇性使用抗生素,從而減少藥物殘留、降低細(xì)菌耐藥性以及對(duì)水環(huán)境的污染等。
1.1.1 病料的采集。取病體鱖魚4個(gè)樣、鱖魚養(yǎng)殖池水樣16份,2016年9月2日在海安縣雅周鎮(zhèn)迥垛村鱖魚養(yǎng)殖基地采集。
1.1.2 主要試劑。培養(yǎng)基、BD Crystal陰性板條及藥敏試驗(yàn)板條均購自南京菲恩醫(yī)療科技有限公司。
1.2.1 病魚的剖檢。肉眼觀察鱖魚體表變化,解剖病死鱖魚,分析各內(nèi)臟的病癥。
1.2.2 病原菌的分離培養(yǎng)。無菌采取鱖魚表面和內(nèi)臟組織以及養(yǎng)殖水樣,分別接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,28℃恒溫培養(yǎng)24h,挑取單個(gè)菌落進(jìn)一步純化。
1.2.3 病原菌的鑒定。根據(jù)革蘭氏染色結(jié)果,使用BD Crystal陰性板條來鑒定其生化特性,從而確定鑒定菌種。
1.2.4 藥敏試驗(yàn)。對(duì)分離的四株嗜水氣單胞菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),將分離菌株制成0.5麥?zhǔn)系木鷳乙海?.1mL注入藥敏板條,28℃恒溫培養(yǎng)24h,觀察細(xì)菌生長情況。使用藥物為:硫酸新霉素、氟苯尼考、恩諾沙星、甲砜霉素、鹽酸環(huán)丙沙星、紅霉素、鹽酸土霉素和強(qiáng)力霉素。
2.1 病死鱖魚的剖檢結(jié)果。病魚體表出血,剖開后內(nèi)臟正常,內(nèi)容物較少。
2.2 病原菌鑒定結(jié)果。共分離四種菌株,鑒定結(jié)果均為嗜水氣單胞菌。
2.3 藥敏試驗(yàn)結(jié)果。試驗(yàn)結(jié)果如表1顯示,氟苯尼考和鹽酸環(huán)丙沙星對(duì)嗜水氣單胞菌顯示出較強(qiáng)的抑菌效果,紅霉素和鹽酸土霉素抑菌效果不明顯。
表1 各種抗菌藥物對(duì)嗜水氣單胞菌的最低抑菌濃度(MIC值)mg/L
本試驗(yàn)中通過病原菌分離培養(yǎng),分離出四種菌株,生化鑒定初步鑒定為嗜水氣單胞菌,通過對(duì)四種菌株的藥敏試驗(yàn),氟苯尼考和鹽酸環(huán)丙沙星對(duì)嗜水氣單胞菌有較強(qiáng)的抑菌效果,由于鹽酸環(huán)丙沙星屬于禁用漁藥,實(shí)際應(yīng)用中可采用氟苯尼考。由于不同的養(yǎng)殖區(qū)域、養(yǎng)殖品種、用藥方法都會(huì)使病原菌因藥物環(huán)境不同而產(chǎn)生耐藥性差異,給疾病的預(yù)防帶來了困難,因此對(duì)嗜水氣單胞菌等引起的細(xì)菌性疾病的防治既要考慮病原菌對(duì)藥物的敏感性,也要根據(jù)水產(chǎn)用藥的相關(guān)規(guī)定合理用藥。