林盛靜
EB病毒(EBV)又稱人類皰疹病毒4型(HHV-4),是1964年Epstein等在研究非洲兒童霍奇金病時發(fā)現(xiàn)的一種人類B淋巴細胞病毒,1968年人們證實EBV為傳染性單核細胞增多癥的常見病原體之一,主要通過呼吸道傳播?;純号R床表現(xiàn)主要為發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大,也可累及多個器官造成損傷,尤其以肝損傷最為常見,易與其他原因所致肝功能損傷混淆,增加臨床醫(yī)生對疾病診斷與治療的難度。筆者通過對EBV相關(guān)肝功能損傷進行分析,探索EBV感染后血清峰值DNA載量與肝功能損傷的關(guān)系,旨在協(xié)助臨床準確診斷與治療。
1.1 對象 選擇2016年1月至2017年11月因EBV感染致傳染性單核細胞增多癥收入我院的患兒114例,男 67例(41.20%),女 47例(58.80%),年齡 8個月~15歲。
1.2 診斷與排除標準 傳染性單細胞增多癥診斷標準:根據(jù)流行情況、典型臨床表現(xiàn)(發(fā)熱、咽痛、肝脾及淋巴結(jié)腫大)、外周血異性淋巴細胞>10%、EBV特異性抗體(VCA-IgM、EA-IgG)和EBV-DNA檢測可作出臨床診斷。排除標準:(1)EBV以外的細菌、病毒、支原體、衣原體感染者;(2)近期服用肝損傷藥物者;(3)除傳染性單細胞增多癥外患其他原發(fā)性或繼發(fā)性致肝損傷疾病者。
1.3 方法 患兒入院后抽取靜脈血5ml,置于黃頭管內(nèi),3 000r/min離心10min,取上層血清。使用美國ABI7500及其配套試劑檢驗血清中EBV-DNA載量。采用Beckman AU5800及其配套試劑檢測ALT與AST水平。按EBV-DNA峰值載量將患兒分為低載量組[EBVDNA 載量<2(lg Copies/ml)]17 例,中載量組[EBV-DNA載量 2~4(lg Copies/ml)]81 例,高載量組[EBV-DNA 載量>4(lg Copies/ml)]16例。按年齡將患兒分為低齡組(8個月~4歲)69例,中年齡組(5~8歲)35例,高年齡組(9~15歲)10例。按性別將患兒分為男性組67例,女性組47例。以ALT≥50U/L或AST>60U/L為界判定為肝功能異常。
1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,EBVDNA載量數(shù)據(jù)以()logCopies/ml表示,其中兩個獨立樣本均數(shù)的比較采用t檢驗,多個獨立樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析。偏正態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)(P50)與四分位間距(QR)描述,并且多個獨立樣本中位數(shù)的比較采用Kruskal-Wallis檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 EBV-DNA峰值載量與肝功能的關(guān)系 肝功能異常率隨著EBV-DNA峰值載量的升高而升高,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=9.447,P=0.009),肝功能損傷程度隨著EBV-DNA峰值載量的升高而升高,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=14.372,P=0.001),詳見表 1、2。
表1 EBV-DNA峰值載量與肝功能損傷的關(guān)系[例(%)]
表2 EBV-DNA峰值載量與肝功能損傷程度的關(guān)系
2.2 不同性別患兒的EBV-DNA峰值載量比較 男性患兒 EBV-DNA 峰值載量為(3.54±0.50)lg Copies/ml,女性患兒 EBV-DNA 峰值載量為(3.40±0.55)lg Copies/ml,不同性別患兒的EBV-DNA峰值載量差異無統(tǒng)計學意義(t=1.04,P=0.300)。
2.3 不同年齡組EBV-DNA峰值載量比較 不同年齡組的EBV-DNA峰值載量無統(tǒng)計學差異(F=0.13,P=0.880),患兒主要集中在低、中年齡組,達91.23%,見表4。
表4 不同年齡組DNA載量比較
低齡兒童由于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善,易導致EBV感染后不能徹底清除,造成潛伏或者長期感染,引起病毒復制入血。長期的EBV活動性感染易引起多種疾病如傳染性單核細胞增多癥、淋巴瘤及類風濕關(guān)節(jié)炎等[1]。EBV感染引起的傳染性單核細胞增多癥患兒起病常隱匿,典型表現(xiàn)為發(fā)熱、淋巴結(jié)大、咽峽炎“三聯(lián)癥”[2],也可累及各個器官造成損傷,而肝臟是EBV感染侵犯的主要器官之一[3]。據(jù)研究發(fā)現(xiàn),EBV感染的CD8+T細胞可選擇性的被肝臟捕獲。肝KUPPERFER細胞表達可溶性分子,包括Fas配體、IFNγ和TNF-α從而導致肝臟損傷[4]。
已有研究提示EBV感染可以通過誘發(fā)與機體免疫能力相關(guān)的因子從而導致機體各臟器功能的損傷,主要表現(xiàn)為細胞的凋亡[5]。目前研究認為,T淋巴細胞免疫對控制EBV感染起決定性作用。B淋巴細胞是EBV攻擊的靶細胞,其表面有EBV受體,故先受累,導致B淋巴細胞抗原性改變,激活T淋巴細胞轉(zhuǎn)化為T淋巴細胞效應(yīng)細胞(CTL),直接破壞攜帶EBV的B淋巴細胞。而EBV原發(fā)性肝損傷的機制是通過EBV感染細胞后的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)生的自由基亢進,從而產(chǎn)生毒性反應(yīng)導致肝細胞的損傷。
本研究114例EBV感染引起的傳染性單核細胞增多癥患兒中,肝損傷56例,占49.12%,并隨著血清中EBV-DNA的載量升高而逐漸增高。肝損傷的程度也隨著血清中EBV-DNA的載量升高而逐漸加重。結(jié)合已有的研究推測可能與Th1/Th2比例失衡及T淋巴細胞過度激活有關(guān)系。故臨床應(yīng)及時關(guān)注EBV-DNA載量與肝功能的變化,以及時對癥治療。本研究中,所有患兒中,中、低年齡組患兒占比達到91.23%,高年齡組患兒占比僅為8.77%,可能與機體的不斷發(fā)育與免疫系統(tǒng)的完善有關(guān),與國內(nèi)流行病學調(diào)查基本相符[6],但不同年齡組EBV-DNA載量并無統(tǒng)計學差異。本研究中,不同性別患兒EBV-DNA載量并無統(tǒng)計學差異。
EBV感染致傳染性單核細胞增多癥患兒在臨床多起病隱匿,易漏診、誤診,并且容易造成肝臟的損傷,甚至肝功能衰竭。而EBV-DNA載量與患兒肝功能有著緊密的聯(lián)系,及時監(jiān)測EBV-DNA載量以及肝功能,對臨床的治療及患兒的預后都有著非常重要的意義。