林盛靜

EB病毒（EBV）又稱人類皰疹病毒4型（HHV-4），是1964年Epstein等在研究非洲兒童霍奇金病時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種人類B淋巴細(xì)胞病毒，1968年人們證實(shí)EBV為傳染性單核細(xì)胞增多癥的常見病原體之一，主要通過呼吸道傳播?；純号R床表現(xiàn)主要為發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大，也可累及多個(gè)器官造成損傷，尤其以肝損傷最為常見，易與其他原因所致肝功能損傷混淆，增加臨床醫(yī)生對(duì)疾病診斷與治療的難度。筆者通過對(duì)EBV相關(guān)肝功能損傷進(jìn)行分析，探索EBV感染后血清峰值DNA載量與肝功能損傷的關(guān)系，旨在協(xié)助臨床準(zhǔn)確診斷與治療。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選擇2016年1月至2017年11月因EBV感染致傳染性單核細(xì)胞增多癥收入我院的患兒114例，男 67例（41.20%），女 47例（58.80%），年齡 8個(gè)月~15歲。

1.2 診斷與排除標(biāo)準(zhǔn) 傳染性單細(xì)胞增多癥診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)流行情況、典型臨床表現(xiàn)（發(fā)熱、咽痛、肝脾及淋巴結(jié)腫大）、外周血異性淋巴細(xì)胞＞10%、EBV特異性抗體（VCA-IgM、EA-IgG）和EBV-DNA檢測(cè)可作出臨床診斷。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）EBV以外的細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體感染者；（2）近期服用肝損傷藥物者；（3）除傳染性單細(xì)胞增多癥外患其他原發(fā)性或繼發(fā)性致肝損傷疾病者。

1.3 方法 患兒入院后抽取靜脈血5ml，置于黃頭管內(nèi)，3 000r/min離心10min，取上層血清。使用美國ABI7500及其配套試劑檢驗(yàn)血清中EBV-DNA載量。采用Beckman AU5800及其配套試劑檢測(cè)ALT與AST水平。按EBV-DNA峰值載量將患兒分為低載量組[EBVDNA 載量＜2（lg Copies/ml）]17 例，中載量組[EBV-DNA載量 2~4（lg Copies/ml）]81 例，高載量組[EBV-DNA 載量＞4（lg Copies/ml）]16例。按年齡將患兒分為低齡組（8個(gè)月~4歲）69例，中年齡組（5~8歲）35例，高年齡組（9~15歲）10例。按性別將患兒分為男性組67例，女性組47例。以ALT≥50U/L或AST＞60U/L為界判定為肝功能異常。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，EBVDNA載量數(shù)據(jù)以（）logCopies/ml表示，其中兩個(gè)獨(dú)立樣本均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，多個(gè)獨(dú)立樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析。偏正態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)（P50）與四分位間距（QR）描述，并且多個(gè)獨(dú)立樣本中位數(shù)的比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EBV-DNA峰值載量與肝功能的關(guān)系 肝功能異常率隨著EBV-DNA峰值載量的升高而升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.447，P=0.009），肝功能損傷程度隨著EBV-DNA峰值載量的升高而升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=14.372，P=0.001），詳見表 1、2。

表1 EBV-DNA峰值載量與肝功能損傷的關(guān)系[例（%）]

表2 EBV-DNA峰值載量與肝功能損傷程度的關(guān)系

2.2 不同性別患兒的EBV-DNA峰值載量比較 男性患兒 EBV-DNA 峰值載量為（3.54±0.50）lg Copies/ml，女性患兒 EBV-DNA 峰值載量為（3.40±0.55）lg Copies/ml，不同性別患兒的EBV-DNA峰值載量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.04，P=0.300）。

2.3 不同年齡組EBV-DNA峰值載量比較 不同年齡組的EBV-DNA峰值載量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=0.13，P=0.880），患兒主要集中在低、中年齡組，達(dá)91.23%，見表4。

表4 不同年齡組DNA載量比較

3 討論

低齡兒童由于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，易導(dǎo)致EBV感染后不能徹底清除，造成潛伏或者長(zhǎng)期感染，引起病毒復(fù)制入血。長(zhǎng)期的EBV活動(dòng)性感染易引起多種疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、淋巴瘤及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等[1]。EBV感染引起的傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒起病常隱匿，典型表現(xiàn)為發(fā)熱、淋巴結(jié)大、咽峽炎“三聯(lián)癥”[2]，也可累及各個(gè)器官造成損傷，而肝臟是EBV感染侵犯的主要器官之一[3]。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，EBV感染的CD8+T細(xì)胞可選擇性的被肝臟捕獲。肝KUPPERFER細(xì)胞表達(dá)可溶性分子，包括Fas配體、IFNγ和TNF-α從而導(dǎo)致肝臟損傷[4]。

已有研究提示EBV感染可以通過誘發(fā)與機(jī)體免疫能力相關(guān)的因子從而導(dǎo)致機(jī)體各臟器功能的損傷，主要表現(xiàn)為細(xì)胞的凋亡[5]。目前研究認(rèn)為，T淋巴細(xì)胞免疫對(duì)控制EBV感染起決定性作用。B淋巴細(xì)胞是EBV攻擊的靶細(xì)胞，其表面有EBV受體，故先受累，導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞抗原性改變，激活T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為T淋巴細(xì)胞效應(yīng)細(xì)胞（CTL），直接破壞攜帶EBV的B淋巴細(xì)胞。而EBV原發(fā)性肝損傷的機(jī)制是通過EBV感染細(xì)胞后的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)生的自由基亢進(jìn)，從而產(chǎn)生毒性反應(yīng)導(dǎo)致肝細(xì)胞的損傷。

本研究114例EBV感染引起的傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒中，肝損傷56例，占49.12%，并隨著血清中EBV-DNA的載量升高而逐漸增高。肝損傷的程度也隨著血清中EBV-DNA的載量升高而逐漸加重。結(jié)合已有的研究推測(cè)可能與Th1/Th2比例失衡及T淋巴細(xì)胞過度激活有關(guān)系。故臨床應(yīng)及時(shí)關(guān)注EBV-DNA載量與肝功能的變化，以及時(shí)對(duì)癥治療。本研究中，所有患兒中，中、低年齡組患兒占比達(dá)到91.23%，高年齡組患兒占比僅為8.77%，可能與機(jī)體的不斷發(fā)育與免疫系統(tǒng)的完善有關(guān)，與國內(nèi)流行病學(xué)調(diào)查基本相符[6]，但不同年齡組EBV-DNA載量并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究中，不同性別患兒EBV-DNA載量并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

EBV感染致傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒在臨床多起病隱匿，易漏診、誤診，并且容易造成肝臟的損傷，甚至肝功能衰竭。而EBV-DNA載量與患兒肝功能有著緊密的聯(lián)系，及時(shí)監(jiān)測(cè)EBV-DNA載量以及肝功能，對(duì)臨床的治療及患兒的預(yù)后都有著非常重要的意義。