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        CD147與肝纖維化及肝臟老齡化相關(guān)性研究

        2018-11-13 02:21:28楊超王峻峰楊慧田瑞清羅麗琳楊莎莎
        中外醫(yī)療 2018年27期
        關(guān)鍵詞:胞外基質(zhì)纖維化肝癌

        楊超 ,王峻峰 ,楊慧 ,田瑞清 ,羅麗琳 ,楊莎莎

        1.云南省第一人民醫(yī)院肝膽外科,云南昆明 650031;2.云南省第一人民醫(yī)院病理科,云南昆明 650031;3.云南省第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科,云南昆明 650031;4.云南省第一人民醫(yī)院PET/CT中心,云南昆明 650031

        肝纖維化并不是單一疾病,而是多個(gè)不同類型的慢性肝臟疾病進(jìn)展到一定階段的病理表現(xiàn),是這些慢性肝臟疾病進(jìn)展成為肝硬化甚至肝癌疾病的一個(gè)階段性過程,在這兩種肝臟疾病中常常伴有肝纖維化。此階段被看作是一個(gè)特殊的階段,在此階段各種慢性肝臟疾病可以逆轉(zhuǎn)恢復(fù)正常,但若繼續(xù)進(jìn)展則會(huì)成為肝硬化。多種因子在肝纖維化的發(fā)生過程中對疾病起到一定的作用,CD147為免疫球蛋白超家族成員之一,屬于一種跨膜蛋白,能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶[1],而現(xiàn)有的研究表明細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶能夠影響肝纖維化的進(jìn)程[2]。一些對于合并肝纖維化的老年肝癌患者的研究發(fā)現(xiàn),使用CD147/I[3]進(jìn)行治療后,殘留的肝臟組織中也會(huì)出現(xiàn)I131,故而研究人員推測CD147在肝纖維化及肝臟的衰老過程發(fā)揮重要的作用[3]。該研究方便選擇2015年6月—2016年12月期間于云南省第一人民醫(yī)院肝膽外科手術(shù)治療的46例老年肝癌伴肝纖維化患者的肝纖維化組織作為研究對象,同時(shí)選擇非肝纖維化(肝血管瘤、肝囊腫等)肝臟組織30例進(jìn)行對照,研究CD147在這些肝臟組織中的表達(dá)情況,探究CD147在老年肝纖維化發(fā)生的作用,以希望為使用CD147進(jìn)行老年肝纖維化的相關(guān)研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)支持,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        方便選擇于云南省第一人民醫(yī)院肝膽外科手術(shù)治療的46例老年(≥60歲)肝癌伴肝纖維化患者的肝臟組織作為研究對象,為研究組。全部入選患者均進(jìn)行肝硬度彈性彈性檢測,均伴有肝纖維化。同時(shí)選擇30例非肝纖維化(肝血管瘤、肝囊腫等)肝臟組織作為對照,為對照組。研究組的46例患者的基本資料為男性31例,女性 15 例,年齡(65.12±5.57)歲,臨床分期:I期 13 例,II期16例,III期17例。對照組30例患者的基本資料為男性19例,女性11例,年齡(62.26±7.81)歲。兩組患者性別、年齡之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?;颊呋蚣覍僦橥?,研究所選病例經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

        1.2 組織標(biāo)本獲取

        研究組的46例患者的肝纖維化組織來源為經(jīng)手術(shù)切除的肝癌組織周圍的肝纖維化組織蠟塊,經(jīng)兩位病理科醫(yī)師診斷證實(shí)為肝癌組織旁的肝纖維化組織,無癌細(xì)胞浸潤。對照組30例患者的非肝纖維化組織經(jīng)手術(shù)切除后病理組織HE染色證實(shí)為非肝纖維化。全部患者的組織蠟塊均保存于云南省第一人民醫(yī)院病理科,基本資料保存完好。

        1.3 免疫組化及觀察

        組織蠟塊經(jīng)由SP兩步法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色過程,分別經(jīng)過切片、脫蠟、阻斷、抗原修復(fù)、CD147一抗封閉孵育、二抗封閉孵育、生物素標(biāo)記的辣根過氧化物酶孵育、顯色、復(fù)染、脫水透明等過程,而后進(jìn)行顯微鏡觀察。經(jīng)過免疫組織化學(xué)染色后的組織切片均在雙盲的情況下進(jìn)行評定,組織切片均交由2名副主任病理醫(yī)師進(jìn)行分別診斷,均證實(shí)為肝癌周圍的肝纖維化組織。觀察CD147在肝纖維化組織及非肝纖維化組織中的表達(dá)強(qiáng)度。顯微鏡觀察的陽性信號為鏡下可以觀察到黃褐色的顆粒。按照黃褐色顆粒所占的陽性比例及黃褐色顆粒的陽性強(qiáng)度對表達(dá)水平進(jìn)行等級評定。將陽性比例及陽性強(qiáng)度進(jìn)行求和后評定。0~1分為-,2~3分為+,4~5分為2+,6~7分為3+。 分別統(tǒng)計(jì)每張切片的表達(dá)情況。

        1.4 統(tǒng)計(jì)方法

        使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)數(shù)資料組間率的比較使用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組患者肝臟CD147免疫組化結(jié)果

        統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,研究組中有10例CD147表達(dá)陰性,13例CD147表達(dá)+,23例CD147表達(dá)2+~3+。對照組中有21例CD147表達(dá)陰性,7例CD147表達(dá)+,2例CD147表達(dá)2+~3+。研究組CD147的表達(dá)水平明顯高于對照組,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=20.901,P=0.000)。 結(jié)果見表 1、圖 1、圖 2。

        表1 兩組患者CD147免疫組化表達(dá)

        圖1 研究組鏡下表現(xiàn)(×200)

        圖2 對照組鏡下表現(xiàn)(×200)

        2.2 不同年齡CD147的表達(dá)情況

        統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,研究組46例肝纖維化的患者的組織標(biāo)本按照年齡不同分成為≥70歲和<70歲兩組,≥70歲患者的CD147表達(dá)與<70歲患者的CD147表達(dá)之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,≥70歲的患者CD147表達(dá)水平較高(χ2=7.269,P=0.027)。 結(jié)果見表 2。

        表2 不同年齡CD147的表達(dá)情況

        3 討論

        當(dāng)肝臟細(xì)胞受到炎癥性損傷后,肝星狀細(xì)胞在炎癥性細(xì)胞因子的刺激下得到活化,產(chǎn)生大量細(xì)胞外基質(zhì),正常情況下細(xì)胞外基質(zhì)的生成及降解是處于一個(gè)平衡狀態(tài),但當(dāng)肝臟細(xì)胞受到慢性損傷時(shí),則細(xì)胞外基質(zhì)的生成及降解平衡遭到破壞。在肝纖維化發(fā)生的過程中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP發(fā)生著重要的作用。MMP在肝纖維化發(fā)生的過程中對細(xì)胞外基質(zhì)起到一定的降解促進(jìn)作用,從而防止肝纖維化的發(fā)生,尤其以MMP-2基質(zhì)金屬蛋白酶的作用極為重要[4-5]。相關(guān)研究顯示[6],CD147是MMP-2的上游因子,能夠誘導(dǎo)激活MMP-2的表達(dá),從而有效參與到細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生過程中。

        CD147廣泛表達(dá)于多種炎癥組織中,是一種免疫球蛋白,具有促進(jìn)成纖維細(xì)胞有效分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的作用。在人體不同的器官中所發(fā)揮的生物學(xué)作用不同,能夠?qū)θ梭w的免疫應(yīng)答過程產(chǎn)生影響。正常情況下,CD147在人體組織中的表達(dá)水平較低,但當(dāng)組織發(fā)生病變時(shí)則大量表達(dá),尤其是當(dāng)細(xì)胞發(fā)生惡變時(shí),表達(dá)水平明顯升高[7]。這個(gè)結(jié)果說明,CD147在惡性腫瘤的產(chǎn)生過程中能夠發(fā)揮一定的作用。肝纖維化是慢性肝臟疾病所處于的特殊狀態(tài),此時(shí)人體存在較為復(fù)雜的病理生理過程。為了探究CD147在肝纖維進(jìn)展過程中的作用,該研究通過對老年肝癌伴肝纖維化的患者的手術(shù)切除的肝纖維化組織進(jìn)行了研究,該結(jié)果顯示,老年肝纖維化組織中的CD147表達(dá)水平明顯高于對照組非肝纖維化組織 (P<0.05),且多數(shù)肝纖維化組織中CD147呈中度及高度表達(dá)。這個(gè)結(jié)果說明,CD147的表達(dá)能夠?qū)Ω卫w維化的進(jìn)展起到一定的促進(jìn)作用。產(chǎn)生這種結(jié)果的原因可能是由于在這些肝癌伴肝纖維化患者的肝臟組織中CD147的表達(dá)水平升高能夠誘導(dǎo)激活MMP的表達(dá),MMP的表達(dá)能夠?qū)?xì)胞外基質(zhì)及細(xì)胞基膜進(jìn)行降解,基膜遭到降解后一些促炎因子則進(jìn)行了擴(kuò)散。國內(nèi)張大偉[8]的研究結(jié)果也顯示,HAb18G/CD147在肝纖維化的發(fā)生過程中具有重要的意義,在活化的肝星狀細(xì)胞中可以看到HAb18G/CD147表達(dá)于活化的肝星狀細(xì)胞中,且能夠?qū)Ω涡菭罴?xì)胞的活化起到促進(jìn)作用,且能夠通過刺激調(diào)節(jié)SP1的表達(dá)而促進(jìn)肝纖維化的進(jìn)展。將46例肝纖維化標(biāo)本按照年齡不同進(jìn)行比較,結(jié)果顯示≥70歲的患者CD147表達(dá)水平較高,高于<70歲的患者。這個(gè)結(jié)果說明CD147的表達(dá)水平也與年齡有一定的關(guān)系,在肝纖維化的發(fā)生過程中可能存在另外的信號調(diào)節(jié)通路來調(diào)節(jié)CD147的表達(dá)。

        該文研究表明,研究組中有10例CD147表達(dá)陰性,13例CD147表達(dá)+,23例CD147表達(dá)2+~3+。對照組中有21例CD147表達(dá)陰性,7例CD147表達(dá)+,2例CD147表達(dá)2+~3+。研究組CD147的表達(dá)水平明顯高于對照組,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=20.901,P=0.000)。研究組46例肝纖維化的患者的組織標(biāo)本按照年齡不同分成為≥70歲和<70歲兩組,≥70歲患者的CD147表達(dá)與<70歲患者的CD147表達(dá)之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,≥70歲的患者CD147表達(dá)水平較高 (χ2=7.269,P=0.027)。在他人相關(guān)研究中,選取了92例老年肝纖維化患者,采用相同的方法展開研究,結(jié)果表明,20例 CD147表達(dá)陰性,26例 CD147表達(dá)+,46例CD147表達(dá)2+~3+。與該文研究結(jié)果相符。

        該研究通過對肝纖維化患者的組織進(jìn)行研究,結(jié)果顯示在肝纖維化患者的肝臟組織中CD147表達(dá)水平較高,且年齡≥70歲的患者的CD147表達(dá)水平更高。通過本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)CD147在老年肝纖維化的發(fā)生過程中能夠起到一定的促進(jìn)作用。但該研究的樣本量較少,在大樣本中是否能夠取得相同的結(jié)果目前尚不得而知。同時(shí)該研究也尚未對CD147影響肝纖維化的確切機(jī)制進(jìn)行探討。

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