劉 濤 漆一鳴

(1. 延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，陜西延安 716000;2. 貴州醫(yī)科大學(xué)生物學(xué)教研室，貴州貴陽 550004)

蚤是重要的醫(yī)學(xué)昆蟲，是鼠疫、鼠源性斑疹傷寒等疾病的重要媒介(吳厚永等，1999)。印鼠客蚤Xenopsyllacheopis(Rothschild, 1903)屬于蚤科，客蚤屬。在我國滇粵閩黃胸鼠鼠疫疫源地，主要媒介為印鼠客蚤(貴州省衛(wèi)生防疫站，2002)。因此，尋求一種殺滅印鼠客蚤的藥物對(duì)防治鼠疫的流行有重要意義。苯醚威(又名雙氧威，F(xiàn)enoxycarb)化學(xué)名稱為：乙基氨基甲酸酯，是第3代殺蟲劑，屬于非萜烯類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，其殺蟲作用是非神經(jīng)性的，是具有保幼激素活性的昆蟲生長調(diào)節(jié)劑。它具有安全性高、毒性低、選擇性強(qiáng)、殺蟲譜廣、持效長、對(duì)環(huán)境無污染，可殺滅成蟲的卵，但作用較緩慢(程暄生，1996； 姜志寬等，2001；張宏超等，2002)。氯氰菊酯毒力強(qiáng)、作用速度快，但蚤類對(duì)其可產(chǎn)生抗性(吳鶴松等，2005)。苯醚威與氯氰菊酯混配，其一、由于它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的特殊性(張友軍，2003)不僅會(huì)彌補(bǔ)苯醚威藥效較為遲緩的缺陷和蚤類對(duì)氯氰菊酯產(chǎn)生抗性的不足，而且有可能表現(xiàn)出增效作用。其二、對(duì)成蟲和卵都有殺滅作用，增強(qiáng)殺蟲效果。為此，本實(shí)驗(yàn)取長補(bǔ)短，將兩種殺蟲劑配伍，尋求最佳混配濃度，為蚤的防治提供重要的基礎(chǔ)資料(李曉東，1999)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源及獲取

印鼠客蚤大理株2002年從云南省地方病防治所引種，在貴州醫(yī)科大學(xué)蚤類飼養(yǎng)室繁殖傳代。將幼蟲飼料過20目篩，篩出的蚤繭轉(zhuǎn)入干凈試管內(nèi)，雙層綢布封口，置于養(yǎng)蚤室內(nèi)的玻璃缸內(nèi)待其羽化。

1.2 藥物梯度、對(duì)照設(shè)置及制作藥膜

氯氰菊酯原藥從貴州省疾病預(yù)防控制中心獲取，制備氯氰菊酯1 000 mg/L (丙酮為溶劑)儲(chǔ)備液，再稀釋儲(chǔ)備液得到濃度為3.12、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 mg/L的測(cè)試液，苯醚威制備1 200 mg/L、1 400、1 600、1 800、2 000 mg/L的測(cè)試液，以空白和丙酮為對(duì)照(蔣志勝，1997；張宏超等，2002)。準(zhǔn)確吸取300 μL測(cè)試液入500 mL三角燒瓶輕搖使均勻布滿瓶底，自然通風(fēng)4 h揮干丙酮得到藥膜(趙善歡，1993；吳鶴松等，2005)。

1.3 試蚤毒效觀察及獲得苯醚威、氯氰菊酯半數(shù)致死濃度和相關(guān)系數(shù)

按照不同濃度測(cè)試，取本室飼養(yǎng)印鼠客蚤新羽化未吸血成蟲，一種濃度同時(shí)倒入500 mL三角燒瓶?jī)?nèi)(30只成蟲、3瓶、10只/瓶)，待30 min后將試蚤轉(zhuǎn)到潔凈的50 mL三角燒瓶?jī)?nèi)，觀察并記錄24 h死亡數(shù)，重復(fù)3次。死亡標(biāo)準(zhǔn)：中毒蚤側(cè)臥、六足伸直，無活力、無任何反應(yīng)或足雖有微弱抽動(dòng)，但不能站立、復(fù)活，即為死亡(慕立義，1994)。

1.4 設(shè)置混配試劑及試蚤毒效觀察

將每個(gè)濃度溶液制成藥膜(制膜方法同1.2)，取本室飼養(yǎng)印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲，同時(shí)倒入500 mL三角燒瓶?jī)?nèi)(10只/瓶)，待30 min后將試蚤轉(zhuǎn)到潔凈的50 mL三角燒瓶?jī)?nèi)，觀察24 h死亡率。實(shí)驗(yàn)條件：實(shí)驗(yàn)溫度(21±2)℃、濕度(75±5)%，每次實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次，間隔1周以上重復(fù)進(jìn)行(每次實(shí)驗(yàn)均重新配制儲(chǔ)備液和測(cè)試液)。如對(duì)照組死亡率<20%用Abbott公式校正，對(duì)照組死亡率>20%則實(shí)驗(yàn)重做(吳鶴松，2005)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過SPSS軟件用直線回歸法計(jì)算苯醚威、氯氰菊酯半數(shù)致死濃度和相關(guān)系數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 試蚤毒效觀察及獲得苯醚威、氯氰菊酯半數(shù)致死濃度和相關(guān)系數(shù)

2.2 試蚤毒效觀察

按不同比例混合法將苯醚威、氯氰菊酯混配，結(jié)果詳見表1，表明：混配試劑3毒效最佳 (苯醚威6 mg、1000 mg/L氯氰菊酯溶液51 μL、丙酮9. 949 mL)。24 h死亡率70.0%，校正死亡率69.3%；混配試劑2、4、5： 24 h死亡率分別為58.9%、61.1%、53.3%，24 h校正死亡率分別為58.0%、60.2%、52.2%。均超過了苯醚威、氯氰菊酯單獨(dú)使用的毒效，表現(xiàn)出明顯的增效作用。

表1 苯醚威、氯氰菊酯混配劑對(duì)印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲的毒力Tab.1 Toxicity of combined insecticides of fenoxycard, cypermethrin to the newly emerged fleas X. cheopis

圖1 苯醚威、氯氰菊酯混配劑對(duì)印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲的毒力Fig.1 Toxicity of combined insecticides of fenoxycard, cypermethrin to the newly emerged fleas X. cheopis

3 討論

本次實(shí)驗(yàn)是用藥膜法來研究苯醚威、氯氰菊酯及二者混配劑對(duì)印鼠客蚤的毒效，苯醚威、氯氰菊酯對(duì)未吸血新羽化成蟲的LC50分別為1647.9752 mg/L、8.4861 mg/L。表明苯醚威需大劑量才對(duì)印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲有較明顯直接致死作用。按比例混合法將二者混配，結(jié)果表明，混配試劑組的毒效均超過了苯醚威、氯氰菊酯單獨(dú)使用的毒效，其中，混配試劑3毒效最佳 (苯醚威6 mg、1000 mg/L氯氰菊酯溶液51 μL、丙酮9. 949 mL)；24小時(shí)死亡率70.0%，校正死亡率69.3%；表現(xiàn)出明顯的增效作用。