許 超，洪衛(wèi)星，蔣 珍，黃徐根

1.銅陵學院體育部，銅陵，244000；2.安徽師范大學體育學院，蕪湖，241002

自由基客觀存在于機體中，正常情況下自由基的產生與清除處于動態(tài)平衡的狀態(tài)；然而平衡一旦被打破，過多的自由基對人體組織細胞等產生毒害作用，且與多種疾病息息相關［1］。研究表明：肥胖可致自由基清除速率下降［2］，適宜的低氧訓練可有效改善機體的抗氧化能力［3，4］。近年來，傳統(tǒng)中藥的研究取得了長足進步，利用天然藥物提取物來提高人體抗氧化能力以及抗衰老、抗腫瘤能力等［5-7］成為研究熱點。本文以傳統(tǒng)中藥玉竹提取物玉竹多糖對低氧訓練過程中的肥胖大鼠進行干預，研究其血清自由基變化情況，為玉竹多糖在運動訓練、大眾健身中的開發(fā)利用提供理論依據。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

6周齡健康雄性SD大鼠203只（購自上海實驗動物中心，許可證號：SCXK（滬）2013-0006），SPF級，體重172.15±11.94 g。分籠飼養(yǎng)，自由飲食，自然采光，通風條件良好，溫度（23±2）℃，相對濕度40%～60%。實驗期間嚴格控制飼養(yǎng)條件。

1.2 研究方法

1.2.1 實驗條件

采用美國進口的小型低氧發(fā)生器（MAG-10）組建低氧帳篷（低氧帳篷面積約6.75 m2，空間體積約9.45 m3），建立氧濃度為13.6%（模擬海拔3500米高度），壓強為101 KPa的常壓低氧環(huán)境；利用動物跑臺創(chuàng)造訓練條件。

1.2.2 肥胖大鼠模型建立

203只雄性SD大鼠經適應性飼養(yǎng)7天后，隨機挑選25只普通飼料飼養(yǎng)，178只高脂飼料飼養(yǎng)（高脂飼料配方為：豬油12%、蛋黃粉8%、白砂糖5%、全脂奶粉8%、膽固醇1%、膽鹽0.2%、普通飼料65.8%）。飼養(yǎng)第 18周末，按肥胖標準［8］（體重增量大于普通飼料飼養(yǎng)組體重增量均值加上1倍標準差）篩選肥胖大鼠112只。

1.2.3 適應性訓練及實驗大鼠篩選

篩選出的肥胖大鼠隨后進行1周低氧倉適應后，進行為期2周逐漸增加強度的適應訓練（訓練方案參照趙鵬［4］并稍加修改，第1周適應訓練時間為20 min，強度為12～18 m／min；第2周適應訓練時間為40 min，強度為18～22 m／min）。經過適應性訓練后，對于運動能力極好和極差以及有傷病的大鼠進行剔除，且剔除體重過重和過輕的大鼠，保留56只肥胖大鼠隨機分為7組，并從25只普通飼料飼養(yǎng)的大鼠中挑選8只作為正常安靜對照組（C組），具體分組安排如表1所示。

1.2.4 大鼠實驗分組安排

各訓練組大鼠在水平動物實驗跑臺上進行耐力性練習。低氧條件下進行60 min／d×5d／w×4w的訓練，訓練強度為20 m／min；常氧條件下進行60 min／d×5 d／w×4w的訓練，速度為22m／min。具體實驗分組安排見表1。

1.2.5 給藥方案

FHLP和FLHP大鼠灌服玉竹多糖溶液（河南中冠建業(yè)生物科技有限公司）1 g·kg-1（灌胃方案參照謝建軍［7］并稍加修改），其余各訓練組大鼠灌服等量的生理鹽水，上午訓練后1 h灌胃，一周灌胃5次，共4周。

1.2.6 血清自由基指標的測定

4周實驗后大鼠采用腹主動脈取血，放入離心管中，37℃水浴箱水浴60 min，3 000 r／min離心20 min，取上層血清，根據南京建成生物工程研究所試劑盒說明，測定血清超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶 （CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛 （MDA）指標。主要儀器：分光光度計（7200型，尤尼柯（上海）儀器有限公司）、酶標儀（A-6半自動生化儀，上海華巖儀器設備有限公司）。

表1 實驗大鼠分組情況 n＝8

1.2.7 統(tǒng)計分析

采用Office Excel 2010版軟件錄入以均值±標準差(）表示的實驗數據，建立數據庫。實驗數據的統(tǒng)計分析均運用SPSS 22.0軟件進行。利用單因素方差分析檢驗分析樣本，其中P＜0.05表示顯著性差異水平，P＜0.01表示極顯著性差異水平。

2 結果與分析

2.1 玉竹多糖結合低氧訓練對肥胖大鼠血清MDA含量的影響

4周實驗后各組大鼠血清MDA含量見表2。從表2可見，正常安靜對照組大鼠血清MDA含量與肥胖低住安靜對照組相比沒有顯著性差異（P＞0.05）；肥胖高住安靜對照組大鼠血清MDA含量顯著高于肥胖低住安靜組、正常安靜對照組和肥胖低住低練組（P＜0.05）；肥胖低住高練組大鼠血清MDA含量與肥胖高住低練組相比組間無顯著性差異（P＞0.05），但二者均顯著高于各肥胖安靜對照組和肥胖低住低練組（P＜0.05）；補充玉竹多糖的各低氧訓練組大鼠血清MDA含量均顯著低于其對應的各訓練組（P ＜0.05）。

表2 各組大鼠血清抗氧化物酶活性一覽表 n＝8，

表2 各組大鼠血清抗氧化物酶活性一覽表 n＝8，

組別 MDA／（nmol·mL-1）SOD／（U·mL-1）GSH-Px／（U·mL-1）CAT／（U·mL-1）C 3.22±0.69c 20.52±0.17c 1.98±0.22b 26.64±5.35b FLC 3.06±0.93c 20.83±0.25c 1.75±0.15b 20.67±4.50c FHC 5.68±1.71b 20.58±0.25c 1.93±0.32b 35.93±2.26a FLL 3.31±0.75c 20.28±1.01c 1.77±0.18b 22.15±4.81c FLH 9.15±2.08a 20.44±0.85c 1.90±0.22b 17.90±3.92c FHL 8.92±1.60a 20.77±0.38c 2.01±0.19b 27.74±3.53b FLHP 3.00±0.78c 26.56±3.28a 1.90±0.29b 29.70±6.81b FHLP 2.02±0.45c 24.12±3.35b 2.47±0.36a 30.45±5.12b

注：應用單因素方差分析中的Duncan檢驗不同組同一指標，以P＜0.05為顯著性水平，不同上標間差異顯著，且a＞b＞c。

2.2 玉竹多糖結合低氧訓練對肥胖大鼠血清抗氧化物酶活性的影響

4周實驗后各組大鼠血清抗氧化物酶活性見表2?？梢钥闯?，與正常安靜對照組相比，各肥胖安靜對照組大鼠血清SOD活性無顯著性差異（P＞0.05）；與各肥胖安靜對照組和肥胖低住低練組相比，肥胖低住高練玉竹組和肥胖高住低練玉竹組大鼠血清SOD活性均顯著較高（P＜0.05）；補充玉竹多糖的各低氧訓練組大鼠血清SOD活性顯著高于其對應的各訓練組（P＜0.05）。

通過比較發(fā)現（表2），各安靜對照組大鼠GSH-Px活性組間差異不顯著（P＞0.05）；肥胖高住低練玉竹組大鼠GSH-Px活性顯著高于各安靜組和肥胖低住低練組（P＜0.05）；各訓練組除肥胖高住低練玉竹組外，其余各組組間無顯著差異（P＞0.05）。

由表2可看出，肥胖高住安靜對照組大鼠血清CAT活性顯著高于肥胖低住安靜對照組、正常安靜對照組和肥胖低住低練組（P＜0.05）；各肥胖低氧訓練組除肥胖低住高練組外，其余各低氧訓練組顯著高于肥胖低住低練組（P＜0.05）；補充玉竹多糖的肥胖高住低練組與其對應的低氧訓練組組間無顯著性差異（P＞0.05）；肥胖低住高練玉竹組大鼠血清CAT活性顯著高于肥胖低住高練組（P＜0.05）。

3 結論

本實驗中，低氧暴露的大鼠MDA含量明顯升高，在低氧環(huán)境中訓練可使氧化應激現象更為劇烈；通過給予玉竹多糖干預，其低氧訓練組MDA含量明顯減少，SOD，CAT和GSH-PX活性均有所升高。說明玉竹多糖能夠干預低氧訓練引起的機體脂質過氧化作用，增強脂質過氧化產物的代謝能力，有效提高了高脂飲食大鼠血清中自由基清除能力。