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        速度向量成像技術(shù)在評價甲狀腺功能亢進(jìn)性心臟病大鼠心功能中的應(yīng)用*

        2018-11-07 11:21:00侯睿金鉉順高藝花金成子鄭斯琴馬偉平
        關(guān)鍵詞:血清評價模型

        侯睿,金鉉順,高藝花,金成子,鄭斯琴,馬偉平

        (延邊大學(xué)附屬醫(yī)院 1.影像二科,2.心內(nèi)科,吉林 延吉 133000;3.延邊大學(xué) 藥理學(xué)教研室,吉林 延吉 133000)

        甲狀腺功能亢進(jìn)性心臟?。╤yperthyroidism heart disease,HHD)是甲狀腺功能亢進(jìn)癥(簡稱甲亢)的嚴(yán)重并發(fā)癥之一。高水平甲狀腺素長期作用下,心血管系統(tǒng)會受到如心肌肥厚、心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變及心肌纖維化等嚴(yán)重?fù)p傷[1]。超聲速度向量成像(velocity vector imaging, VVI)是無創(chuàng)跟蹤分析心肌運動的一項技術(shù)。相比二維圖像追蹤組織運動軌跡增加了速度的信息,與組織多普勒相比可以減少角度的依賴性[2-4]。目前,其多用于在四腔心切面基礎(chǔ)上評價人類心肌運動,對動物基于心尖四腔心切面的研究甚少。臨床上多采用Simpson法評價心功能,但有研究表明Simpson法評價動物心功能有一定局限性,故本研究通過HHD大鼠模型,探究心尖四腔心切面基礎(chǔ)上VVI技術(shù)評價大鼠心功能的可行性。

        1 材料與方法

        1.1 實驗動物及模型復(fù)制

        5~6周齡SD(Sprague-Dawley)大鼠20只,體重180~200 g,購自延邊大學(xué)實驗動物中心。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,按體重隨機(jī)分為對照組和模型組,自由飲食、水。參照文獻(xiàn)[5]的方法復(fù)制甲亢大鼠模型,模型組每天皮下注射甲狀腺素(L-thyroxin)0.5 mg/kg,對照組每天皮下注射等量的生理鹽水。28 d后停止藥物干預(yù)。記錄兩組大鼠體重,對照組最高體重達(dá)360 g,模型組最高體重達(dá)290 g。用ELISA檢測大鼠血清中總?cè)饧谞钤彼幔╰otal triiodothyronine, TT3)、總甲狀腺素(total thyroxine, TT4)的含量。超聲心動技術(shù)檢測模型組大鼠心率,可達(dá)500次/min或以上。HHD大鼠模型復(fù)制成功。

        1.2 方法

        1.2.1 超聲速度向量技術(shù) 于VVI檢測前1天,禁食水。脫去大鼠前胸鼠毛,腹腔注射30%烏拉坦麻醉,采用西門子Acuson S2000彩色多普勒超聲儀,10V4探頭(頻率10 MHz),經(jīng)心尖四腔心切面對大鼠行超聲心動圖檢查并保存數(shù)據(jù),脫機(jī)進(jìn)行VVI分析。描記左心室心內(nèi)膜,VVI系統(tǒng)讀取縱向峰值速度(velocity)(cm/s)、縱向峰值應(yīng)變(strain, Sr)(%)和縱向峰值應(yīng)變率(strain rate, SRr)(1/s)。見圖 1。

        1.2.2 血液檢測 用30%烏拉坦腹腔注射對大鼠進(jìn)行麻醉,腹主動脈取血后,用ELISA檢測大鼠血清中TT3、TT4的含量。

        圖1 VVI分析系統(tǒng)

        1.2.3 病理學(xué)檢查 開胸取心臟,取左心室心肌組織處理后于電鏡下觀察心肌組織細(xì)胞及線粒體形態(tài)。

        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

        數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件,計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,獨立樣本用t檢驗,計數(shù)資料以率(%)表示,行χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組大鼠VVI各項指標(biāo)比較

        VVI讀取的收縮期縱向峰值速度(systolic velocity, Vs)和舒張期縱向峰值速度(diastolic velocity, Vd)、Sr和收縮期縱向峰值應(yīng)變率(systolic strain rate, sSRr)及舒張期縱向峰值應(yīng)變率(diastolic strain rate, dSRr)(1/s)中,與對照組比較,模型組Vs、Vd、Sr、sSRr和dSRr 5項指標(biāo)均低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

        2.2 兩組大鼠血清中TT3、TT4含量比較

        與對照組比較,模型組大鼠血清中TT3、TT4濃度增高(P<0.05)。見表 2。

        2.3 兩組大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)比較

        對照組心肌纖維結(jié)構(gòu)排列整齊,線粒體致密。模型組心肌纖維結(jié)構(gòu)排列紊亂、部分肌纖維斷裂,線粒體腫脹、破裂。見圖2。

        表1 大鼠VVI各項指標(biāo)結(jié)果 (n =10,±s)

        表1 大鼠VVI各項指標(biāo)結(jié)果 (n =10,±s)

        組別 Vs/(cm/s) Vd/(cm/s) Sr/% sSRr/(1/s) dSRr/(1/s)對照組 0.270±0.132 0.248±0.108 8.851±6.887 1.270±1.033 1.222±0.864模型組 0.102±0.050 0.119±0.064 1.604±1.178 0.516±0.328 0.512±0.290 t值 3.590 3.137 3.429 2.285 2.559 P值 0.002 0.006 0.006 0.041 0.024

        表2 兩組大鼠血清TT3、TT4水平(n =10,ng/L,±s)

        表2 兩組大鼠血清TT3、TT4水平(n =10,ng/L,±s)

        組別 TT3 TT4對照組 68.866±7.336 123.560±22.827模型組 87.700±12.015 166.446±45.347 t值 3.675 2.276 P值 0.002 0.039

        圖2 兩組大鼠左心室心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)(電鏡×6 000)

        3 討論

        HHD是甲亢的常見且嚴(yán)重并發(fā)癥之一。它的病程長,臨床癥狀表現(xiàn)較晚,容易誤診,影響患者預(yù)后。HHD是在高水平甲狀腺素長期作用下,心臟發(fā)生如心肌肥厚、肌纖維束增加及心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變等嚴(yán)重病理學(xué)改變[6]。而心肌纖維化會導(dǎo)致心力衰竭、心肌梗死或心律失常等常見心血管疾病[7-8]。因此更早期更準(zhǔn)確的診斷HHD,對提高該病患者預(yù)后有著重要的意義。

        Simpson法計算LVEF值是臨床評價左心室功能的常用方法,能夠較準(zhǔn)確的反映心室功能[9]。但已有文獻(xiàn)證明,Simpson法用于大鼠左心室功能測定誤差較大,應(yīng)用Simpson法評價大鼠左心室功能具有一定局限性[10]。而VVI分析系統(tǒng)是一種利用超聲斑點示蹤技術(shù)的新型超聲心動圖技術(shù)。其能夠克服標(biāo)準(zhǔn)切面的局限性,描記心內(nèi)膜運動軌跡,提供心肌運動速度、心肌應(yīng)變及心肌應(yīng)變率等指標(biāo),更加客觀、全面的評價心肌的運動[11]。心肌應(yīng)變是心臟搏動時引起的心肌長度的變化,采用應(yīng)變和應(yīng)變率評價心肌運動可以區(qū)分心臟整體運動和心室壁運動,普遍認(rèn)為心肌應(yīng)變評價心肌運動的穩(wěn)定性較好。但應(yīng)用傳統(tǒng)組織多普勒法衡量心肌應(yīng)變,記錄位置有限,具有一定的角度依賴性。VVI技術(shù)不依賴于多普勒,應(yīng)用超聲二維灰階成像為基礎(chǔ),對目標(biāo)心肌進(jìn)行斑點及邊界追蹤,采集相位信息,以矢量方式表示心肌運動變化。VVI用于人類心尖四腔心切面的研究有很多[12-13],而動物方面的研究僅限于大動脈短軸切面或左室長軸切面[14-16],用于大鼠心尖四腔心切面相關(guān)研究結(jié)果甚少。本研究在大鼠心尖四腔心切面進(jìn)行左心室心內(nèi)膜描記,利用VVI技術(shù)觀察大鼠左心室功能變化,結(jié)果表明模型組Vs、Vd、Sr、sSRr及dSRr,均低于對照組。該結(jié)果和心肌硬度與心肌運動速度、心肌應(yīng)變及心肌應(yīng)變率成正比相吻合。根據(jù)KIM等人的研究[17],HHD模型大鼠的心率高出正常大鼠心率,可達(dá)到500次/min或以上,結(jié)合本實驗結(jié)果,快速心率下所得HHD大鼠VVI數(shù)據(jù)有差異,表明在快速心率條件下,VVI技術(shù)可以評價左心室功能。結(jié)合血清TT3、TT4及電鏡結(jié)果所顯示的HHD病理學(xué)改變即模型組血清TT3、TT4濃度高于對照組(P<0.05),且電鏡下觀察大鼠的心肌組織示模型組較對照組心肌出現(xiàn)纖維化改變相吻合,證明成功復(fù)制了HHD大鼠模型,且在心尖四腔心切面上應(yīng)用VVI技術(shù)能夠評價HHD大鼠的心肌運動,為心臟病大鼠模型提供新的超聲評價手段,對臨床探究HHD提供新的評價方法。而鑒于HHD較多累及右心室病變,還需進(jìn)一步完善VVI技術(shù)評價右心室功能的研究。

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