王嘉琛，葉 花，劉 培，王鵬飛，劉炳辰，段秀俊

（山西中醫(yī)藥大學(xué)，山西太原030024）

“十八反”是中藥的傳統(tǒng)配伍禁忌，自張子和在《儒門事親》總結(jié)“十八反”以來，一直沿用至今，但自古以來破禁者屢見不鮮，如醫(yī)圣張仲景、藥王孫思邈、國醫(yī)大師朱良春等。甘草配伍甘遂是十八反藥對之一，張仲景《金匱要略》中的甘遂半夏湯即含有甘草與甘遂，功在濬痰逐飲，用于治療留飲脈伏，其人欲自利，利后雖自覺輕快，但心下仍然堅滿者?，F(xiàn)代常用于治療肝硬化腹水、腫瘤等重癥急癥，也有獨特的療效［1］。

本實驗選甘草與甘遂藥對及其相應(yīng)經(jīng)方甘遂半夏湯作為研究對象，通過考察甘草與甘遂配伍前后及其回歸到方劑對大鼠臟器指數(shù)及血清生化指標的影響，循單藥→對藥→全方的路徑探究十八反藥對配伍的毒性變化情況，以期為十八反藥對的配伍研究及臨床應(yīng)用提供一定的實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 清潔級健康8 w齡Wistar大鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量180～220 g，由山西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)動物中心提供，合格證：SCXK2009-0001。

1.1.2 儀器與試劑 FB124型分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）、HC-2518高速離心機（科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司）、BCD-196TMBA冰箱（青島海爾股份有限公司）、移液器（購自上海盛創(chuàng)醫(yī)療器械有限公司椒江分公司），DNM-9602酶標分析儀（北京普朗新技術(shù)有限公司）、TU-1810型紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）及白蛋白（ALb）試劑盒均由中生北控生物科技股份有限公司提供。

1.1.3 實驗藥材 甘遂為大戟科多年生草本植物甘遂的塊根，購自安國市康達中藥材有限公司；甘草為豆科植物甘草的干燥根，購自安國市康達中藥材有限公司；半夏為天南星科植物半夏的干燥塊莖，購自亳州市萬珍中藥飲片廠；白芍為毛茛科植物芍藥的干燥根，購自安國市神禾中藥材飲片有限責(zé)任公司。以上藥材均由山西中醫(yī)藥大學(xué)裴香萍副教授鑒定為正品。

1.2 實驗方法

1.2.1 藥液的制備 按甘遂半夏湯處方比例（炙甘草、甘遂、半夏、芍藥質(zhì)量比為 2∶1∶3∶5），精密稱取甘草、甘遂單味藥、甘草與甘遂對藥、甘遂半夏湯全方，分別加水煎煮2次，每次30 min，合并煎液，分別濃縮至甘草2 kg/L，甘遂1 kg/L，甘草+甘遂3 kg/L，甘遂半夏湯11 kg/L，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 分組與給藥 健康Wistar大鼠50只，自由取食飲水，室內(nèi)溫度20℃～25℃，相對濕度40%～65%。適應(yīng)性飼養(yǎng)2 d。采用隨機區(qū)組法分為5組，每組10只，分別為生理鹽水組（對照組）、甘草組、甘遂組、甘遂+甘草組及甘遂半夏湯組。每天以0.2 mL/10 g的給藥體積灌胃各組藥液1次，連續(xù)灌服7 d，之后腹腔注射水合氯醛麻醉，腹腔主動脈取血，以3 000 rpm離心15 min，分離血清。按照試劑盒方法檢測血清肝功能指標。同時取心、肝、腎、脾稱重，計算臟器指數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（±s）表示，采用方差分析，t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 對臟器指數(shù)的影響

各組之間大鼠心、肝、腎、脾臟器指數(shù)相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表1。

表1 對大鼠各臟器指數(shù)的影響 （g/100 g，±s）

表1 對大鼠各臟器指數(shù)的影響 （g/100 g，±s）

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2.2 對血清生化指標的影響

甘草+甘遂組與對照組及甘遂半夏湯組比較，ALT 和 AST 明顯增高（P＜0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。ALP、TP及ALb各組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表2。

表2 對大鼠血清生化指標的影響 （±s）

表2 對大鼠血清生化指標的影響 （±s）

注：與對照組比較，1）P＜0.05；與甘遂半夏湯組比較，2）P＜0.05

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3 討 論

甘遂，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，因其有毒，被列為下品。具有瀉水逐飲、破積通便功效，臨床上廣泛用于治療手術(shù)后粘連性腸梗阻［2］、重癥急性胰腺炎［3］、肝硬化所致腹水［4］等。然而甘遂對口腔、胃腸道、眼、皮膚黏膜等具有嚴重的刺激性，并有促發(fā)炎癥［5］、肝毒性［6］等副作用，尤其是在與甘草的合用中，常有爭議［7-9］。故實驗選擇了甘草-甘遂作為研究對象，考察其于配伍前后及回歸到方劑中的毒性變化情況。

由實驗結(jié)果可見甘遂單味藥組中各項結(jié)果與對照組結(jié)果相差不大，可以推測甘遂單味藥在適宜劑量內(nèi)對臟器影響并不明顯；甘草組中TP與對照組比較變化較明顯，可能與甘草的甜膩作用，使血液中的水分相對量減少相關(guān)［10］；甘草+甘遂組與對照組相比血清ALT和AST含量顯著增高，而甘遂半夏湯組與甘草+甘遂組相比血清ALT和AST含量顯著降低，表明十八反藥對甘遂、甘草配伍對大鼠肝細胞有損傷作用，配伍之后毒性增加，屬于配伍禁忌，與傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論相吻合。但甘遂半夏湯的全方配伍又可顯著降低十八反藥對甘草配伍甘遂對肝細胞的損傷，也從實驗的角度說明十八反藥對只要合理配伍也可用于臨床，研究結(jié)果也為十八反藥對自古至今的廣泛使用提供了一定的實驗依據(jù)。

肝臟作為人體最大的解毒器官，對于蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、維生素等多種物質(zhì)的代謝起著重要的作用，是維持機體內(nèi)環(huán)境平衡必不可少的環(huán)節(jié)。因此實驗除采用臟器指數(shù)來表征十八反藥對甘草-甘遂及甘遂半夏湯對動物臟器的毒性影響外，主要采用多種生化指標來表征對肝臟的毒性影響。實驗選擇臟器指數(shù)作為考察指標主要是通過考察其是否有增生、充血、肥大等現(xiàn)象和萎縮、退化性行為等來評價甘草對甘遂及甘遂半夏湯對各臟器的毒性影響，實驗采用ALT表征肝細胞的損傷程度，AST表征對肝細胞能量代謝的影響，ALP來表征肝外膽管等部位是否有水腫、梗阻等情況，用TP和ALb來表征血液中蛋白含量的變化。如此通過臟器指數(shù)及血清生化指標綜合評價甘草對甘遂及甘遂半夏湯對大鼠的毒性，實驗結(jié)果的說服力較強。