陳時維， 葉志成， 付 盼， 李 巍， 楊 丹， 徐 錦

（復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院臨床檢驗中心，上海 201102）

檢驗項目參考區(qū)間是疾病診斷、檢驗結(jié)果分析與解釋的重要依據(jù)。因此，實驗室為臨床提供一個準確、可靠的參考區(qū)間極為重要[1]。目前，臨床實驗室中大多數(shù)檢驗項目的參考區(qū)間引用自行業(yè)指南、儀器試劑說明書或國內(nèi)成人標準，這些參考區(qū)間大多不分年齡、性別，且較少針對兒童群體。由于兒童和成人在免疫狀態(tài)、生長發(fā)育水平等方面均有差異，因此成人參考區(qū)間無法適用于兒童。兒童各項指標的參考區(qū)間亟待建立并規(guī)范，以利于兒童疾病的有效診治。為此，本研究按照美國臨床實驗室標準化協(xié)會（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）及國際臨床化學(xué)和檢驗醫(yī)學(xué)聯(lián)合會（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）聯(lián)合發(fā)布的C28-A3文件標準[2]，建立上海地區(qū)兒童腎功能項目[尿素、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、總蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，Alb）]的參考區(qū)間，填補本地區(qū)兒童腎功能項目參考區(qū)間的空白。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2015年7月—2017年5月復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院特需門診體檢中心進行健康體檢的兒童。排除標準：（1）正在治療性服藥；（2）近1個月內(nèi)有發(fā)熱、感染、創(chuàng)傷的情況；（3）近6個月內(nèi)有住院史，近4個月內(nèi)有輸血史；（4）兒童常規(guī)體檢的各項身體指標及體重指數(shù)不在參考區(qū)間內(nèi)。入組兒童進一步進行血常規(guī)、尿常規(guī)和糞常規(guī)檢測，結(jié)果均正常。共納入滿足上述條件的兒童1 038名，其中男543名（52.31%）、女495名（47.69%），年齡3～17歲。按年齡分為3組：3～6歲組（345名，其中男147名、女198名）、7～12歲組（434名，其中男267名、女167名）、13～17歲組（259名，其中男129名、女130名）。本研究經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院倫理委員會批準，由接診醫(yī)生當面告知兒童家長本研究的相關(guān)情況并簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑

采用日立7180全自動生化分析儀（日本日立公司）及配套試劑、校準品檢測尿素（尿素酶紫外波長測定法）、Cr（酶法）、UA（尿酸酶-過氧化物酶法）、TP（雙縮脲比色法）、Alb（溴甲酚綠法）。質(zhì)控品（2015年批號為M401011、M401012、M401013，2016年批號為M407081、M407082、M407083，2017年批號為M507471、M507472、M507473）由美國Beckman-Coulter公司提供。

1.3 方法

采集所有研究對象安靜狀態(tài)下的坐姿空腹12 h靜脈血3 mL，2 h內(nèi)以2 200×g離心5 min分離血清，4 h 內(nèi)完成檢測。所有樣本均無溶血、黃疸和脂血。嚴格按標準操作規(guī)程進行操作，在質(zhì)控在控的情況下進行樣本檢測。每年進行1次儀器校準，試劑更換批號或儀器校準后進行留樣復(fù)查及質(zhì)控品檢測。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件和Excel 2007軟件進行統(tǒng)計分析。離群值的判斷方法參照CLSI C28-A3文件[2]，將各項目的數(shù)據(jù)按男、女升序排列，檢測數(shù)據(jù)中若有疑似離群值，則將疑似離群值與相鄰值的差值（D）和數(shù)據(jù)全距（R）相除，若D/R≥1/3則為離群值，應(yīng)剔除。采用 K-S檢驗進行正態(tài)性檢驗。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以s表示，多組間比較采用單因素ANOVA分析，兩兩比較采用q檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡組之間腎功能項目的比較

不同年齡組之間除血清尿素差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）外，血清Cr、UA、TP、Alb水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），且隨年齡的增長，血清Cr、UA、TP、Alb水平呈上升趨勢。見表1。

表1 不同年齡組尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表1 不同年齡組尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

注：與7～12歲比較，*P＜0.05；與13～17歲比較，#P＜0.05

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2.2 不同性別之間腎功能項目的比較

在3～6歲組中，男、女童之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；在 7～12歲組中，男、女童之間血清UA、Cr水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；在13～17歲組中，男、女童之間血清Cr、UA水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2～表4。

表2 3～6歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表2 3～6歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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表3 7～12歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表3 7～12歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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表4 13～17歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表4 13～17歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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2.3 上海地區(qū)兒童腎功能項目參考區(qū)間的建立

表5 不同年齡兒童Cr、UA、TP、Alb的參考區(qū)間

3 討論

參考區(qū)間在臨床疾病的診斷中起重要的指導(dǎo)作用，判斷檢測指標的測定結(jié)果有無臨床意義通常是基于其與參考區(qū)間的比較。兒童作為一個特殊的群體，由于其生理特性使得某些檢測項目的測定結(jié)果與成人相差較大，導(dǎo)致成人的參考區(qū)間在兒童群體中應(yīng)用有一定的局限性，而目前國內(nèi)尚未建立一套針對兒童檢驗項目的參考區(qū)間，因此實驗室為臨床提供正確、適用的兒童參考區(qū)間顯得極為重要。近年來，國內(nèi)學(xué)者對此作了一些研究[3-4]，并建立了某些項目的參考區(qū)間，但大樣本、多項目的系統(tǒng)研究仍然是空白。為此，本研究建立了上海地區(qū)健康兒童腎功能多種生化指標的參考區(qū)間。

將本研究結(jié)果與國內(nèi)同類研究[5-6]進行比較，5項參考區(qū)間的結(jié)果并不完全一致，特別是血清UA和Cr水平在7～12歲組和13～17歲組中呈現(xiàn)出明顯的性別差異。導(dǎo)致參考區(qū)間出現(xiàn)差異的原因可能是：（1）儀器檢測方法或原理不同；（2）研究對象年齡、地域不同。目前，我國尚未發(fā)布全國性的兒童檢驗項目的參考區(qū)間，因此臨床實驗室有必要建立本地區(qū)的兒童檢驗項目參考區(qū)間。進行標準化設(shè)計的大樣本參考區(qū)間調(diào)查是建立參考區(qū)間的理想方法[5]，但由于需要大量的人力、物力而不易開展，而利用已有的實驗室信息系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫建立參考區(qū)間是值得探索的替代方法[7]。本研究利用實驗室信息系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫導(dǎo)出2015年7月—2017年5月篩查組合結(jié)果，根據(jù)篩選標準得到1 038名健康兒童作為本研究的入組人群。因1 038名兒童在需要區(qū)分性別和年齡的情況下樣本還不夠大，所以本研究還存在一定的局限性，需在以后的研究工作中進一步細化和完善。