陳時(shí)維， 葉志成， 付 盼， 李 巍， 楊 丹， 徐 錦

（復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，上海 201102）

檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間是疾病診斷、檢驗(yàn)結(jié)果分析與解釋的重要依據(jù)。因此，實(shí)驗(yàn)室為臨床提供一個(gè)準(zhǔn)確、可靠的參考區(qū)間極為重要[1]。目前，臨床實(shí)驗(yàn)室中大多數(shù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考區(qū)間引用自行業(yè)指南、儀器試劑說(shuō)明書(shū)或國(guó)內(nèi)成人標(biāo)準(zhǔn)，這些參考區(qū)間大多不分年齡、性別，且較少針對(duì)兒童群體。由于兒童和成人在免疫狀態(tài)、生長(zhǎng)發(fā)育水平等方面均有差異，因此成人參考區(qū)間無(wú)法適用于兒童。兒童各項(xiàng)指標(biāo)的參考區(qū)間亟待建立并規(guī)范，以利于兒童疾病的有效診治。為此，本研究按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）及國(guó)際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）聯(lián)合發(fā)布的C28-A3文件標(biāo)準(zhǔn)[2]，建立上海地區(qū)兒童腎功能項(xiàng)目[尿素、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、總蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，Alb）]的參考區(qū)間，填補(bǔ)本地區(qū)兒童腎功能項(xiàng)目參考區(qū)間的空白。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2015年7月—2017年5月復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院特需門(mén)診體檢中心進(jìn)行健康體檢的兒童。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）正在治療性服藥；（2）近1個(gè)月內(nèi)有發(fā)熱、感染、創(chuàng)傷的情況；（3）近6個(gè)月內(nèi)有住院史，近4個(gè)月內(nèi)有輸血史；（4）兒童常規(guī)體檢的各項(xiàng)身體指標(biāo)及體重指數(shù)不在參考區(qū)間內(nèi)。入組兒童進(jìn)一步進(jìn)行血常規(guī)、尿常規(guī)和糞常規(guī)檢測(cè)，結(jié)果均正常。共納入滿(mǎn)足上述條件的兒童1 038名，其中男543名（52.31%）、女495名（47.69%），年齡3～17歲。按年齡分為3組：3～6歲組（345名，其中男147名、女198名）、7～12歲組（434名，其中男267名、女167名）、13～17歲組（259名，其中男129名、女130名）。本研究經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，由接診醫(yī)生當(dāng)面告知兒童家長(zhǎng)本研究的相關(guān)情況并簽署知情同意書(shū)。

1.2 儀器與試劑

采用日立7180全自動(dòng)生化分析儀（日本日立公司）及配套試劑、校準(zhǔn)品檢測(cè)尿素（尿素酶紫外波長(zhǎng)測(cè)定法）、Cr（酶法）、UA（尿酸酶-過(guò)氧化物酶法）、TP（雙縮脲比色法）、Alb（溴甲酚綠法）。質(zhì)控品（2015年批號(hào)為M401011、M401012、M401013，2016年批號(hào)為M407081、M407082、M407083，2017年批號(hào)為M507471、M507472、M507473）由美國(guó)Beckman-Coulter公司提供。

1.3 方法

采集所有研究對(duì)象安靜狀態(tài)下的坐姿空腹12 h靜脈血3 mL，2 h內(nèi)以2 200×g離心5 min分離血清，4 h 內(nèi)完成檢測(cè)。所有樣本均無(wú)溶血、黃疸和脂血。嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，在質(zhì)控在控的情況下進(jìn)行樣本檢測(cè)。每年進(jìn)行1次儀器校準(zhǔn)，試劑更換批號(hào)或儀器校準(zhǔn)后進(jìn)行留樣復(fù)查及質(zhì)控品檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件和Excel 2007軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。離群值的判斷方法參照CLSI C28-A3文件[2]，將各項(xiàng)目的數(shù)據(jù)按男、女升序排列，檢測(cè)數(shù)據(jù)中若有疑似離群值，則將疑似離群值與相鄰值的差值（D）和數(shù)據(jù)全距（R）相除，若D/R≥1/3則為離群值，應(yīng)剔除。采用 K-S檢驗(yàn)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以s表示，多組間比較采用單因素ANOVA分析，兩兩比較采用q檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡組之間腎功能項(xiàng)目的比較

不同年齡組之間除血清尿素差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）外，血清Cr、UA、TP、Alb水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且隨年齡的增長(zhǎng)，血清Cr、UA、TP、Alb水平呈上升趨勢(shì)。見(jiàn)表1。

表1 不同年齡組尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表1 不同年齡組尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

注：與7～12歲比較，*P＜0.05；與13～17歲比較，#P＜0.05

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2.2 不同性別之間腎功能項(xiàng)目的比較

在3～6歲組中，男、女童之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；在 7～12歲組中，男、女童之間血清UA、Cr水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；在13～17歲組中，男、女童之間血清Cr、UA水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2～表4。

表2 3～6歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表2 3～6歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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表3 7～12歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表3 7～12歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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表4 13～17歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表4 13～17歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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2.3 上海地區(qū)兒童腎功能項(xiàng)目參考區(qū)間的建立

表5 不同年齡兒童Cr、UA、TP、Alb的參考區(qū)間

3 討論

參考區(qū)間在臨床疾病的診斷中起重要的指導(dǎo)作用，判斷檢測(cè)指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果有無(wú)臨床意義通常是基于其與參考區(qū)間的比較。兒童作為一個(gè)特殊的群體，由于其生理特性使得某些檢測(cè)項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果與成人相差較大，導(dǎo)致成人的參考區(qū)間在兒童群體中應(yīng)用有一定的局限性，而目前國(guó)內(nèi)尚未建立一套針對(duì)兒童檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考區(qū)間，因此實(shí)驗(yàn)室為臨床提供正確、適用的兒童參考區(qū)間顯得極為重要。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)此作了一些研究[3-4]，并建立了某些項(xiàng)目的參考區(qū)間，但大樣本、多項(xiàng)目的系統(tǒng)研究仍然是空白。為此，本研究建立了上海地區(qū)健康兒童腎功能多種生化指標(biāo)的參考區(qū)間。

將本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)同類(lèi)研究[5-6]進(jìn)行比較，5項(xiàng)參考區(qū)間的結(jié)果并不完全一致，特別是血清UA和Cr水平在7～12歲組和13～17歲組中呈現(xiàn)出明顯的性別差異。導(dǎo)致參考區(qū)間出現(xiàn)差異的原因可能是：（1）儀器檢測(cè)方法或原理不同；（2）研究對(duì)象年齡、地域不同。目前，我國(guó)尚未發(fā)布全國(guó)性的兒童檢驗(yàn)項(xiàng)目的參考區(qū)間，因此臨床實(shí)驗(yàn)室有必要建立本地區(qū)的兒童檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間。進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)計(jì)的大樣本參考區(qū)間調(diào)查是建立參考區(qū)間的理想方法[5]，但由于需要大量的人力、物力而不易開(kāi)展，而利用已有的實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫(kù)建立參考區(qū)間是值得探索的替代方法[7]。本研究利用實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫(kù)導(dǎo)出2015年7月—2017年5月篩查組合結(jié)果，根據(jù)篩選標(biāo)準(zhǔn)得到1 038名健康兒童作為本研究的入組人群。因1 038名兒童在需要區(qū)分性別和年齡的情況下樣本還不夠大，所以本研究還存在一定的局限性，需在以后的研究工作中進(jìn)一步細(xì)化和完善。