魏良勝

摘要 采用高效液相色譜-柱后衍生熒光光譜法測定蔬菜和水果中涕滅威亞砜、涕滅威砜、3-羥基克百威、滅多威等6種N-甲基氨基甲酸酯類農(nóng)藥。樣品經(jīng)乙腈提取，以水和乙腈為流動相梯度洗脫。結(jié)果表明，6種農(nóng)藥的分離效果良好，在0.05～2.00 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)>0.995，變異系數(shù)RSD為2.3%～8.8%，加標(biāo)回收率為77.1%～82.3%，此法可用于蔬菜和水果中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測。

關(guān)鍵詞 高效液相色譜；柱后衍生；氨基甲酸酯農(nóng)藥；蔬菜；水果

中圖分類號 O657.7+2；S481+.8 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）14-0121-01

氨基甲酸酯類農(nóng)藥是20世紀(jì)50年代推廣應(yīng)用的有機合成殺蟲劑，具有選擇性強、高效、廣譜、對人畜低毒、易分解和殘留少的特點，常用于蔬菜和水果病蟲害的防治，但氨基甲酸酯類農(nóng)藥具有致突變、致畸、致癌作用，因而建立一種簡單快速的檢測氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢測方法尤為重要。目前，檢測氨基甲酸酯類農(nóng)藥的方法主要有氣相色譜法[1-2]、氣質(zhì)聯(lián)用法[3]、液質(zhì)聯(lián)用法[4]及高效液相色譜-柱后衍生法[5]。由于氨基甲酸酯類農(nóng)藥熱穩(wěn)定性差，氣相色譜法適用性不強；液質(zhì)聯(lián)用儀器價格及維護成本昂貴，對操作人員素質(zhì)要求較高，限制了該法在基層實驗室的使用；而液相色譜-柱后衍生法方法簡單，方法靈敏度較高，應(yīng)用較為普遍。本文研究了采用固相萃取柱凈化樣品，液相色譜-柱后衍生熒光法測定蔬果中6種N-甲基氨基甲酸酯類農(nóng)藥的分析方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Alliance高效液相色譜超高效液相色譜儀配2475熒光檢測器，美國WATERS公司生產(chǎn)；氮吹儀（Organomation N-EVAP-111）；Best-S30FV 純水機；電子天平TD20001，余姚市金諾天平儀器有限公司生產(chǎn)；Multiquck3（匈牙利博朗）；IKA-T25均質(zhì)器，艾卡（廣州）儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)；IKA RV-8旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，艾卡（廣州）儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)；一次性注射器、0.22 μm水相濾膜、固相萃取柱，均由上海安譜實驗科技股份有限公司生產(chǎn)。

甲醇、乙腈、二氯甲烷均為色譜純，由默克股份有限公司生產(chǎn)；硼砂、氫氧化鈉、巰基乙醇、氯化鈉、無水硫酸鈉、鄰苯二甲醛均為分析純，由國藥集團化學(xué)試劑公司生產(chǎn)。

OPA衍生劑：稱取19.1 g硼砂超聲溶解后，定容至1 000 mL，過0.22 μm濾膜，置于棕色試劑瓶中。稱取50 mg鄰苯二甲醛溶于5 mL甲醇中（此過程注意避光），加至硼砂緩沖液中，再向緩沖溶液中加入100 μL巰基乙醇?；靹?，臨用時配制。

標(biāo)準(zhǔn)品：涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、克百威6種標(biāo)準(zhǔn)品購于農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心，臨用時用50%甲醇稀釋至 1.00 μg/mL。

1.2 色譜條件

色譜柱：XBridgeRC8 4.6×150 mm，3.5 μm；保護柱：X-BridgeRC8 4.6×2 mm，3.5 μm；色譜柱溫度35 ℃，衍生溫度80 ℃，OPA流速0.30 mL/min，NaOH流速 0.30 mL/min，激發(fā)波長340 nm，發(fā)射波長455 μm，流動相為乙腈和水，梯度洗脫程序如表1所示。

1.3 樣品前處理

取蔬菜可食部分粉碎后，稱取25.00 g樣品置于燒杯中，加入 50 mL乙腈，勻漿1 min，過濾至已加入約7 g NaCl的具塞量筒中，振搖1 min，靜置30 min，待水相和乙腈相完全分離，吸取上層乙腈相5.00 mL，氮吹至近干，用1 mL甲醇-二氯甲烷（1∶99）溶解，過固相萃取柱，固相萃取柱上端加入適量無水硫酸鈉，并用4 mL甲醇-二氯甲烷（1∶99）活化后，上樣，用4 mL甲醇-二氯甲烷（1∶99）分2次洗脫，收集洗脫液，氮吹至近干，加入1 mL 50%甲醇溶解殘渣，混勻，過0.22 μm濾膜，上機測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 氮吹

氨基甲酸酯類農(nóng)藥遇熱易分解，樣品前處理過程中2次氮吹溫度不能太高，且注意不能完全吹干，否則會導(dǎo)致農(nóng)藥檢測結(jié)果偏低。

2.2 固相萃取柱的選擇

一般樣品選用氨基柱凈化，色素含量高的樣品對檢測結(jié)果有一定干擾，應(yīng)選用CARE/NH2固相萃取柱凈化，進一步去除色素。

2.3 線性范圍、相關(guān)系數(shù)及檢出限

應(yīng)用本文建立的色譜方法，配制6種N-甲基氨基甲酸酯類農(nóng)藥的系列標(biāo)準(zhǔn)混合溶液，上機測定，其中濃度為1.00 mg/L的標(biāo)樣色譜圖見圖1，以質(zhì)量濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到相應(yīng)的線性回歸方程，同時以三倍信噪比考察了6種農(nóng)藥的檢出限，具體結(jié)果見表2。

2.4 樣品測定、回收率及精密度試驗

應(yīng)用本文建立的方法測定了香菇菜、卷心菜、蘋果、西瓜中6種N-氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留情況，4個樣品均未檢出6種N-氨基甲酸酯類農(nóng)藥，選用卷心菜樣品進行加標(biāo)回收試驗，卷心菜樣品和樣品加標(biāo)色譜圖見圖2、3，6種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率在77.1%～82.3%之間，重復(fù)6次測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.3%～8.8%，可以滿足農(nóng)藥殘留測定的要求。

3 結(jié)論

本文采用高效液相色譜-柱后衍生熒光光譜法同時測定蔬菜、水果中6種N-甲氨基甲酸酯類農(nóng)藥，目標(biāo)物用C8柱分離，效果良好，樣品采用固相萃取柱凈化，除雜效率高，目標(biāo)物回收率理想，檢測靈敏度可以滿足常規(guī)檢測的需求，蔬果中其他N-氨基甲酸酯類農(nóng)藥檢測可參考本方法。

4 參考文獻

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