高習(xí)文 胡燕玲

摘要：最近這些年來，隨著養(yǎng)殖業(yè)的不斷壯大，飼養(yǎng)者對于動(dòng)物疾病的防治意識也逐漸加強(qiáng)，獸用疫苗的發(fā)展趨勢也呈上升的狀態(tài)，其中在獸用疫苗生產(chǎn)的過程中對于動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)也更加受到業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注，目前在各類生物制品以及獸用疫苗的研究和生產(chǎn)過程中加以融入了動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)。目前以生物反應(yīng)器技術(shù)作為基礎(chǔ)的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)平臺正在逐步的被建立起來，而且在研究過程中呈現(xiàn)明顯的成熟發(fā)展的趨勢，能夠在很大程度上對于獸用疫苗的生產(chǎn)發(fā)揮有力的推動(dòng)效果?，F(xiàn)主要介紹獸用疫苗生產(chǎn)中應(yīng)用細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物細(xì)胞；懸浮培養(yǎng)；獸用疫苗；生物反應(yīng)器

中圖分類號：S858

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：2095-9737（2018）06-0137-01

細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)主要是基于人工條件之下，在生物的反應(yīng)器中大規(guī)模并且高效率的培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞，以廣泛的應(yīng)用于生物制品生產(chǎn)中。此外，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)目前已經(jīng)在蛋白質(zhì)相關(guān)藥物研發(fā)、疫苗生產(chǎn)、干細(xì)胞移植等各領(lǐng)域得到了比較廣泛的應(yīng)用。

1 細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的優(yōu)化

疫苗生產(chǎn)工藝的研發(fā)過程中，以提高產(chǎn)率和保證產(chǎn)物質(zhì)量的可靠性為最重要的生產(chǎn)目的。實(shí)際研究過程中以懸浮細(xì)胞的選擇、最適生長培養(yǎng)基的選擇、生物反應(yīng)器和生產(chǎn)工藝的選擇等幾個(gè)方面作為懸浮培養(yǎng)技術(shù)的組成因素。1. 1 選擇及懸浮馴化動(dòng)物細(xì)胞系

獸用疫苗的生產(chǎn)過程中，疫苗的安全性、有效性及成本控制是重要的優(yōu)先考慮因素，在細(xì)胞系的選擇及懸浮馴化兩個(gè)方面加以重點(diǎn)研究可以有效的優(yōu)化以上三點(diǎn)。同種細(xì)胞與準(zhǔn)備擴(kuò)增的病毒會發(fā)生相互的作用，采取大規(guī)模的形式對某種細(xì)胞系進(jìn)行疫苗生產(chǎn)之前，應(yīng)該與準(zhǔn)備增殖的病毒通過相互適應(yīng)的方式進(jìn)行選擇。細(xì)胞不同的生長特點(diǎn)會對擴(kuò)大培養(yǎng)和擴(kuò)大培養(yǎng)工藝具有決定性作用。處于不同狀態(tài)的同一種細(xì)胞在培養(yǎng)的時(shí)候，對于病毒表現(xiàn)出的敏感性自然存在很大的差異。保證穩(wěn)定性是在細(xì)胞馴化過程中最重要的任務(wù)，生產(chǎn)中主要就是通過逐漸降低培養(yǎng)基中的血清濃度實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定性的維持目標(biāo)。如果在培養(yǎng)過程中導(dǎo)致細(xì)胞受損后則很難再讓其恢復(fù)，所以在馴化過程中應(yīng)該一直保證細(xì)胞活力高于90%。

1.2 選擇最適生長培養(yǎng)基

細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)的研究過程中，對于適宜培養(yǎng)基的選擇是最重要的內(nèi)容。通常動(dòng)物細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)成分就是血清，但是因?yàn)檠寰哂斜容^復(fù)雜的成分組成，所以自然會給疫苗的生產(chǎn)和研發(fā)造成一定的困難。如今，在動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中，以往使用的常規(guī)培養(yǎng)基已經(jīng)逐步的被無血清培養(yǎng)基替代，這樣就在很大程度上將血清培養(yǎng)基被污染的幾率相應(yīng)的降低，并且相應(yīng)的降低了生產(chǎn)的成本。根據(jù)相關(guān)細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)報(bào)道可知，無血清微載體細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在多種疫苗的生產(chǎn)及組織T程細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)中已經(jīng)廣泛的采納應(yīng)用，市場發(fā)展前景非?？捎^。但是在實(shí)際的研究過程中，采用仍然存在著需要解決的問題，即無血清培養(yǎng)而誘發(fā)的細(xì)胞凋亡問題。日后的相關(guān)研究中應(yīng)該加以重視。

1.3 選擇適宜的生物反應(yīng)器

生物反應(yīng)器在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中是關(guān)鍵的設(shè)備。而生物反應(yīng)器在研究中所具備的最重要的特點(diǎn)即逐級放大，因?yàn)閷?shí)際疫苗生產(chǎn)的成本會直接的被細(xì)胞規(guī)模影響。目前，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)主要是通過增加反應(yīng)器數(shù)量或加大反應(yīng)器體積兩種方式，增加小的反應(yīng)器的數(shù)量在實(shí)際的研究中操作起來相對會更簡化，但是卻有很高的生產(chǎn)成本，所以研究中一般都是會通過增大反應(yīng)器的體積而實(shí)現(xiàn)的。實(shí)際的生產(chǎn)研究中在選擇反應(yīng)器時(shí)應(yīng)該經(jīng)過綜合的考量之后對生物反應(yīng)器加以選擇。

1.4 選擇生產(chǎn)工藝

細(xì)胞懸浮培養(yǎng)工藝按照培養(yǎng)方式主要分為分批式操作、流加式操作、半連續(xù)式操作、連續(xù)式操作和灌流式操作。

2 細(xì)胞懸浮培養(yǎng)在豬用疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用

我國豬飼養(yǎng)逐漸呈現(xiàn)集約化、規(guī)?；内厔莅l(fā)展，傳染性疾病在豬群中流行會給飼養(yǎng)者帶來比較大的影響。我國對于一些傳染病的主要控制措施是接種疫苗，這樣如果隨著懸浮細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展且趨于成熟，已經(jīng)有很多種疫苗在大規(guī)模的生產(chǎn)。

3 小結(jié)

生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)技術(shù)在國外已經(jīng)在獸用疫苗的生產(chǎn)領(lǐng)域得到了非常廣泛的應(yīng)用。但是目前在我國，細(xì)胞懸浮技術(shù)起步較晚，但是目前已經(jīng)得到了快速的發(fā)展。伴隨細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)的不斷進(jìn)步，所以生物反應(yīng)器進(jìn)行細(xì)胞高密度的培養(yǎng)以生產(chǎn)獸用和人用疫苗是發(fā)展的目標(biāo)。隨著深入的研究，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的生產(chǎn)工藝進(jìn)一步完善，生物反應(yīng)器也在很大程度上得以更加合理的設(shè)計(jì)，這樣懸浮細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用會相對容易些。如果在實(shí)際的應(yīng)用生產(chǎn)中可以通過不斷的對動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)展開大規(guī)模的生產(chǎn)，這即將在今后獸用疫苗規(guī)?；a(chǎn)的發(fā)展道路上具有一定的推動(dòng)作用。