閔重函 周 瑛 錢 萍 陳平泉 嚴(yán)世貴 張洪美

1 浙江省嘉興市中醫(yī)醫(yī)院 浙江 嘉興 314001

2 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院 浙江 杭州 310009

3 中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院 北京 100102

蜂蜜作為一味古老的中藥材，很早就被運(yùn)用于臨床，對中醫(yī)外科和骨傷科而言，其促進(jìn)傷口愈合的治療作用已逐漸被發(fā)掘。本次研究旨在對比新型蜂蜜敷料和傳統(tǒng)蜂蜜敷料促傷口愈合的效果，以及不同制劑濃度的蜂蜜對創(chuàng)面愈合的影響。

1 資料與方法

1.1 藥物劑型：將蜂蜜（符合GB14963-2011）經(jīng)制藥工藝濃縮制作為常溫下的無菌實驗制劑，一種是內(nèi)含0.14～2.00mm大小粒的蜂蜜結(jié)晶的混懸液A；另一種是不含結(jié)晶顆粒的黏稠液B，外觀類似于市售蜂蜜。

1.2 敷料制作：傳統(tǒng)蜂蜜敷料：制作方法類似于凡士林紗布。將蜂蜜與石蠟油按100∶5的比例配制后，加熱溶解使其充分混合。將脫脂紗布按臨床需要制成不同規(guī)格，將毛邊撕掉后放于密閉的不銹鋼或鋁儲物盒內(nèi)，厚度不超過1.3cm。將蜂蜜與石蠟油的混合液倒入盛有備好紗布的儲物盒內(nèi)，完全浸沒紗布。將儲物盒放入干熱滅菌器進(jìn)行滅菌，160℃，2小時。滅菌結(jié)束后，待溫度降到40℃開箱，傳統(tǒng)蜂蜜敷料制備完成。新型蜂蜜敷料：本次研制的特殊結(jié)構(gòu)敷料，由高吸水性樹脂（由淀粉和聚丙烯酸鹽組成）及多種材料制成，類似于大號創(chuàng)面敷貼外觀，創(chuàng)面接觸層直接涂抹蜂蜜2～3mm。

1.3 實驗分組：按制劑情況分為使用新型結(jié)構(gòu)敷料的A組（液A）、B組（液B），傳統(tǒng)蜂蜜敷料制備的C組（使用液B，換藥前紗布敷料于注射用水中浸泡3～5s，稀釋蜂蜜濃度）、D組（使用液B），以及E組（空白對照組，凡士林紗布覆蓋創(chuàng)面）。

1.4 實驗方法：將150例雄性大鼠（由嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院提供，清潔級，10周齡，體重181.39±12.63g，無個體體重差異）隨機(jī)分入各組，每組30只。各組大鼠均單籠飼養(yǎng)，定時喂食，不限水。分別監(jiān)測實驗操作前1天空腹及餐后血糖。實驗當(dāng)天，空腹8小時后均以水合氯醛腹腔麻醉，背部廣泛剃毛，常規(guī)消毒，用專業(yè)打孔器于大鼠背部脊柱左側(cè)相同位置打孔（直徑2cm），深及筋膜層，止血后以無菌紗布包扎，1天后創(chuàng)面有肉芽組織變化，基礎(chǔ)瘡瘍模型制備成功。制備成功第2天起，所有大鼠均每天固定后換藥，去除創(chuàng)面分泌物及壞死組織，常規(guī)碘伏消毒，生理鹽水擦拭創(chuàng)面，無菌紗布拭干后分別使用相應(yīng)分組的藥物敷料蓋創(chuàng)面，然后包扎固定。

1.5 指標(biāo)測定：①測定換藥第1天、第4天、第8天、第12天、第16天、第20天實驗大鼠外周空腹及換藥后餐后血糖。采血時去除鼠尾尖端少許，收集血樣，由同一臺血糖監(jiān)測儀（ACCU-CHEK Performa，Roche）以試紙法測定血糖。②選取換藥第1天、第4天、第8天A、B、D三組創(chuàng)面表層蜂蜜，放入數(shù)顯蜂蜜波美度計（陸恒生物，CNF92），測量各組的波美度，即間接反映創(chuàng)面的蜂蜜濃度。③局部瘡瘍在放置比例尺后拍攝平面照片，將照片導(dǎo)入Auto CAD軟件，計算不規(guī)則創(chuàng)面面積。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法：所得數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0統(tǒng)計軟件，組內(nèi)比較采用重復(fù)測量資料的單因素方差分析檢驗，組間兩兩比較采用Bonferroni配對t檢驗。

2 結(jié)果

所有創(chuàng)面經(jīng)換藥逐漸愈合，未有顯著不良反應(yīng)發(fā)生，截止第20天，予大鼠稱重結(jié)果為178.94±11.57g，與初始體重?zé)o統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.1 各組創(chuàng)面面積變化情況比較：各組創(chuàng)口面積均隨時間進(jìn)行性縮小，呈加速趨勢。組間比較，換藥第1天、第4天，創(chuàng)面面積變化無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），第8天開始，A、B組創(chuàng)面愈合速度比其他組快，兩組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；D組較A、B組慢，但較C、E組快；C、E組愈合速度最慢，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 各組血糖測量結(jié)果比較：組內(nèi)各觀察點血糖值不隨時間變化而出現(xiàn)差異性，組間比較也無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），反映出無論外用蜂蜜濃度如何，均不會導(dǎo)致大鼠空腹或餐后血糖異常。見表2。

表1 各組創(chuàng)面面積變化情況比較（-x±s，cm2）

表2 各組空腹和餐后血糖情況比較（-x±s，mmol/L）

2.3 A、B、D組創(chuàng)面蜂蜜波美度比較：見表3。

表3 A、B、D組創(chuàng)面蜂蜜波美度比較（-x±s，°Bé）

3 討論

蜂蜜的藥用價值一直被典籍零散記錄，并沿用至今。其入藥始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被認(rèn)為有滋陰潤燥、補(bǔ)虛潤肺、解毒的作用。《本草衍義》認(rèn)為蜂蜜不僅可以解毒止痛，外用還可治療口瘡、瘡瘍、燒傷、燙傷等多種外傷疾病。目前研究認(rèn)為[1]，蜂蜜可以破壞創(chuàng)面組織上細(xì)菌形成的有抵抗作用的生物膜，殺滅有害細(xì)菌，減少創(chuàng)面感染，加速軟組織愈合。

新型敷料結(jié)構(gòu)分為6層，最外層Ⅵ是彈性纖維，可適當(dāng)擴(kuò)張、臌脹，增加吸水容積。內(nèi)側(cè)第Ⅴ層起防水作用，主要阻止內(nèi)側(cè)水液穿透。Ⅳ層是吸水層，由淀粉和丙烯酸鹽聚合物構(gòu)成，穩(wěn)定性好，有鎖水功能。Ⅲ層含有密集超細(xì)纖維，可通過毛細(xì)原理將水分或滲出液導(dǎo)入IV層。Ⅱ?qū)幼顑?nèi)側(cè)是聚乙烯打孔膜，在打孔膜表面涂抹蜂蜜，可在創(chuàng)面表層形成由蜂蜜填充的腔隙。打孔膜上孔隙的倒漏斗樣設(shè)計能減少滲出液倒流。Ⅱ至Ⅳ層間為波浪樣交錯結(jié)構(gòu)，增加接觸面積，同時層內(nèi)含有肝素鋰或乙二胺四乙酸，防止血漿蛋白凝固堵塞孔道。Ⅰ層是最內(nèi)層，在敷料結(jié)構(gòu)上起到中介作用，創(chuàng)面組織液的滲出稀釋和吸水層的濃縮作用，使敷料內(nèi)部形成一個單向的內(nèi)引流，保證蜂蜜的濃度。從創(chuàng)面蜂蜜波美度的分析可見，經(jīng)制藥濃縮的原液涂抹在創(chuàng)面一天后都存在不同程度的稀釋，但A、B兩組由于新型敷料的作用，創(chuàng)面蜂蜜濃度和原液接近，且保持穩(wěn)定，不隨時間延長而出現(xiàn)差異性，傳統(tǒng)敷料的D組蜂蜜濃度則不能保證，稀釋程度較大，后期出現(xiàn)濃度升高的情況，考慮為創(chuàng)面向愈、滲出減少所致?？梢酝茢啵糇饔糜诿娣e較大或組織液持久滲出的創(chuàng)面，新型蜂蜜敷料更有使用價值。

研究顯示，在外傷創(chuàng)面的愈合過程中，A、B、D組的創(chuàng)面愈合速度較C、E組快，說明高濃度蜂蜜外敷確有促進(jìn)創(chuàng)面愈合的作用，而蜂蜜稀釋液則沒有促進(jìn)效果。A、B組愈合速度較D組快，說明新型蜂蜜敷料比傳統(tǒng)型更有優(yōu)勢，而A、B組內(nèi)比較無統(tǒng)計學(xué)意義，說明使用的蜂蜜在創(chuàng)面濃度到達(dá)一定程度后其促愈合作用不再隨藥物濃度升高而進(jìn)一步提高，即存在所謂的“天花板效應(yīng)”。研究還表明，使用外用藥物下各組大鼠血糖無差異性改變，提示對于基礎(chǔ)血糖異常病例使用高濃度蜂蜜外治瘡瘍?nèi)匀皇前踩尚械摹?/p>

綜上所述，新型蜂蜜敷料直接外用于創(chuàng)面，既可以促進(jìn)愈合、通暢引流、減少感染，也不會造成血糖異常波動，值得推廣。

4 參考文獻(xiàn)

[1]Kucisec-Tepes N.The role of antiseptics and strategy of biofilm removal in chronic wound[J].Acta Med Croatica，2016，70（1）：33-42．