周紅林，岳文彬，李偉芳，金 靜，段叢迪 (濮陽市油田總醫(yī)院腫瘤二科，河南 濮陽 457000)

胃癌的發(fā)生、發(fā)展是在多種致癌因子的協(xié)同作用下，多基因變異逐漸累積而成，明確各種致癌因子的作用機制和相互之間的關(guān)系對于探索胃癌的形成并阻斷其遠處轉(zhuǎn)移有重要意義[1]，P53、RasP21基因一直是臨床探究腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的研究重點，本研究旨在通過檢測分析P53、RasP21基因在胃癌組織中的表達水平，判定兩者在胃癌發(fā)展過程中的意義，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料選取我院2014年至2016年行手術(shù)切除的胃癌組織石蠟標本30例，其中男18例，女12例；年齡35～78(55.0±5.0)歲；低分化癌15例，中分化癌7例，高分化癌8例。另選取20例正常胃黏膜組織標本作為對照，其中男12例，女8例；年齡35～78(55.0±5.0)歲。

1.2方法使用EnVision免疫組化染色法檢測P53及RasP21蛋白在20例正常胃黏膜和30例胃癌組織中的表達水平，其中抗原組織修復液為檸檬酸鹽緩沖液(pH=6.0)，一抗選擇鼠抗人P53單克隆抗體及RasP21單克隆抗體，二抗為羊抗鼠FITC-IgG，工作液濃度1100。

1.3結(jié)果判斷根據(jù)每張切片的陽性細胞數(shù)比例和著色深淺計分進行判斷，不著色為0分，淺棕色為1分，棕色為2分，深棕色為3分，陽性細胞百分比<10%為0分，10%～<25%為1分，25%～<50%為2分，50%～<75%為3分，≥75%為4分，最終結(jié)果為2項結(jié)果之和，≤1分為陰性，2～3分為弱陽性，4～5分為陽性，>5分為強陽性[2]。

1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS 15.0進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以百分數(shù)表示，比較用χ2檢驗，相關(guān)性分析用Spearman相關(guān)分析，檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

正常胃黏膜組織中P53、RasP21蛋白表達均為陰性(0.0%和0.0%)，明顯低于胃癌組織中的陽性表達率(83.3%、70.0%，P<0.05)。胃癌組織中P53、RasP21蛋白陽性表達率與胃癌組織的分化程度有關(guān)(P<0.05)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高。胃癌組織中P53蛋白表達與RasP21蛋白表達呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.801，P<0.05)。見表1。

表1 不同胃組織中P53、RasP21蛋白陽性表達率比較 n(%)

3 討論

RasP21蛋白是具有廣泛抑制活性酶的細胞周期抑制蛋白，在細胞周期中具有雙重的抑制作用，在正常組織中，只存在少量激活狀態(tài)的RasP21蛋白，維持細胞的正常分化，當Ras發(fā)生突變時可使基因活化導致其產(chǎn)物P21蛋白表達過量[3-4]，在人類的多種腫瘤組織中均發(fā)現(xiàn)Ras基因的突變及P21蛋白的高表達，經(jīng)臨床大量研究[5-6]證實Ras基因的突變與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系，且Ras基因的表達強度與腫瘤的分化程度和腫瘤生長有關(guān)，胃癌的發(fā)生、發(fā)展與Ras發(fā)生突變后形成P21蛋白有密切關(guān)系。Kim等[7]的研究表明P21蛋白的表達與胃癌的遠處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，正常胃黏膜組織中RasP21蛋白表達為陰性，明顯低于胃癌組織(P<0.05)。胃癌組織中RasP21蛋白陽性表達率與胃癌組織的分化程度有關(guān)(P<0.05)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高。這證實了RasP21蛋白的表達可作為判斷胃癌分化程度的一個重要指標。

P53基因是一種抑癌基因，可通過抑制細胞的增殖參與細胞周期的調(diào)節(jié)，當P53蛋白發(fā)生基因突變時使其失去了對DNA的親和力，細胞抑制能力下降，失去了抗腫瘤活性，因此，P53突變與腫瘤的形成密切相關(guān)[8]。臨床研究[9-10]證實突變型P53蛋白的表達與胃癌的分化、轉(zhuǎn)移和浸潤等生物學行為有關(guān)，腫瘤的惡化程度越高，P53蛋白的表達水平就越高。本研究結(jié)果顯示，正常胃黏膜組織中RasP21蛋白表達為陰性，明顯低于胃癌組織(P<0.05)。胃癌組織中RasP21蛋白陽性表達率與胃癌組織的分化程度有關(guān)(P<0.05)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高。這也再次證明了上述觀點。

本研究結(jié)果還顯示，胃癌組織中P53蛋白表達與RasP21蛋白表達呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.801，P<0.05)。這與張宏等[6]的研究結(jié)果一致，經(jīng)分析原因可能是P53基因與RasP21基因具有相互調(diào)節(jié)的作用。本研究證實P53及RasP21蛋白在胃癌組織中高表達，與腫瘤的分化程度有關(guān)，隨著分化程度的進展，陽性表達率逐漸升高，且兩者在胃癌組織中有共同表達現(xiàn)象，提示兩者與胃癌的分級和分期相關(guān)，推測RasP21蛋白可通過作用于P53來促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，當然，兩者的內(nèi)在聯(lián)系需要進一步證實。