葉彥軍 郝福軍 張 玲

(寶雞市人民醫(yī)院普通外科，陜西 寶雞 721000)

乳腺癌是城市女性最常見的癌癥，是農(nóng)村女性第四大常見癌癥，城市地區(qū)乳腺癌的發(fā)病率是農(nóng)村地區(qū)的2倍〔1，2〕。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因是葉酸代謝中的關(guān)鍵限速酶之一，與DNA甲基化及DNA合成相關(guān)，1298位點(diǎn)是MTHFR基因上研究較為集中的位點(diǎn)，該位點(diǎn)突變與MTHFR活性密切相關(guān)。本研究擬采用Meta分析評價(jià)MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1文獻(xiàn)檢索 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、EMBASE、web of science、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、CNKI數(shù)據(jù)庫、重慶VIP數(shù)據(jù)庫和萬方數(shù)據(jù)庫，各數(shù)據(jù)庫檢索日期均從開始建庫到2016年8月，全面檢索MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的病例對照研究。英文檢索詞為:MTHFR，methylenetetrahydrofolate reductase和breast cancer，中文檢索詞為:MTHFR、亞甲基四氫葉酸還原酶、乳腺癌。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查確診為乳腺癌的患者；②MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的病例對照研究；③報(bào)道了MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)基因多態(tài)性的分布頻數(shù)；④報(bào)道了MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的OR值及95%CI。

1.2資料提取 由兩位研究者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)篩選，排除明顯不符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)的研究，對可能符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)的研究通過閱讀全文來確定，資料提取完畢后兩位研究者再交叉核對，對于難以確定是否納入的試驗(yàn)，通過小組討論解決分歧。

1.3統(tǒng)計(jì)分析 采用Stata12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，OR及95%CI為療效分析統(tǒng)計(jì)量。當(dāng)納入文獻(xiàn)間無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性時(shí)(I2≤50%,P>0.10)，采用固定效應(yīng)模型，反之，若納入研究間有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性時(shí)(I2>50%,P<0.10)，分析異質(zhì)性可能的來源，采用亞組分析和敏感性分析探討其可能的來源，若無明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性時(shí)采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析。分別計(jì)算以下幾種遺傳模型(AA vs AC、AA vs CC、AC vs CC、AA vs AC+CC、AA+AC vs CC)的基因型分布。采用Stata 12.0軟件進(jìn)行Begg檢驗(yàn)以評估納入研究的發(fā)表偏倚。

2 結(jié) 果

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果 初檢各數(shù)據(jù)庫共獲得文獻(xiàn)343篇，通過閱讀題目及摘要排除明顯不符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)264篇，剩余79篇文獻(xiàn)通過閱讀全文進(jìn)一步確定，經(jīng)過逐層篩選后，最終有17篇文獻(xiàn)〔3～19〕符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)。納入研究中2篇研究來自泰國〔12,17〕，1篇來自新加坡和中國的合作研究〔7〕，1篇來自克什米爾地區(qū)〔8〕，11篇來自中國大陸〔3,4,6,10,11,13～16,18,19〕，2篇來自中國臺灣〔5,9〕。見表1。

表1 納入研究一般特征(n)

HWE：哈迪-溫伯格平衡定律，HB：對照來源醫(yī)院，PB：對照來源社區(qū)

2.2Meta分析結(jié)果 共有17篇〔3～19〕研究報(bào)道了MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的OR和95%CI，其中，病例組共納入5 680例乳腺癌患者，對照組共納入6 403例志愿者。Meta分析結(jié)果結(jié)果如下：(1)雜合子模型AA vs AC:CMTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=1.07，95%CI0.99～1.15)，異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果表明納入研究間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(I2=0.0%,P=0.653)，故采用固定效應(yīng)模型，見圖1。

(2)雜合子模型AC vs CC:CMTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=0.89，95%CI0.76～1.05)，異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果表明納入研究間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(I2=0.0%,P=0.891)，故采用固定效應(yīng)模型，見圖2。

(3)純合子模型AA vs CC:CMTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=0.92，95%CI0.79～1.08)，異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果表明納入研究間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(I2=0.0%,P=0.906)，故采用固定效應(yīng)模型，見圖3。

(4)顯性基因模型AA vs AC+CC:CMTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=1.05，95%CI0.97～1.13)，異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果表明納入研究間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(I2=0.0%,P=0.630)，故采用固定效應(yīng)模型，見圖4。

(5)隱性基因模型AA+AC vs CC:CMTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=0.92，95%CI0.79～1.07)，異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果表明納入研究間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(I2=0.0%,P=0.905)，故采用固定效應(yīng)模型，見圖5。

為了定量評價(jià)納入研究發(fā)表偏倚的可能性，本研究采用Begg檢驗(yàn)定量評價(jià)發(fā)表偏倚，Begg檢驗(yàn)結(jié)果提示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.773)，提示納入研究間發(fā)表偏倚的可能性小，見圖6。

圖1 MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌相關(guān)性的Meta分析(AA vs AC)

圖2 MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌相關(guān)性的Meta分析(AC vs CC)

圖3 MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌相關(guān)性的Meta分析(AA vs CC)

圖4 MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌相關(guān)性的Meta分析(AA vs AC+CC)

圖5 MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌相關(guān)性的Meta分析(AA+AC vs CC)

圖6 Begg圖

3 討 論

探討MTHFR基因多態(tài)性與乳腺癌的相關(guān)性，有助于篩查乳腺癌的易感人群。MTHFR基因位于1號染色體短臂的末端(1p36.6)，參與DNA合成、修復(fù)及甲基化過程，是葉酸代謝途徑的關(guān)鍵酶〔5〕。在葉酸的代謝過程中，MTHFR可催化5，10-亞甲基四氫葉酸向5-甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)化，MTHFR基因位點(diǎn)突變可導(dǎo)致MTHFR活性降低，導(dǎo)致同型半胱氨酸水平升高，進(jìn)而影響DNA結(jié)構(gòu)和DNA甲基化水平〔7〕。MTHFR的催化作用決定了DNA甲基化與DNA合成之間的平衡，其基因多態(tài)性可能會影響葉酸的代謝，可能會增加了乳腺癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)〔6〕。MTHFR基因的位點(diǎn)的多態(tài)性會使該酶的生物活性及熱穩(wěn)定性下降，可能會參與乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展，多項(xiàng)研究也顯示MTHFR基因多態(tài)性與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)〔12,16,19〕。MTHFR基因多態(tài)性的分布在不同的種族及地區(qū)存在明顯差異，且不同地區(qū)乳腺癌的發(fā)病率存在著明顯的差異，本研究Meta分析結(jié)果提示MTHFR基因1298A>C位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌的易感性無相關(guān)性。

理論上講，MTHFR基因多態(tài)性通過影響葉酸代謝異常，從而誘導(dǎo)DNA甲基化正常模式的畸變，可能會導(dǎo)致DNA修復(fù)系統(tǒng)的效率減低，通過影響DNA合成和甲基化導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生。也有研究〔12〕提出一種假說，即MTHFR基因多態(tài)性與乳腺發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)受葉酸攝入量的影響，根據(jù)這個(gè)假說,當(dāng)葉酸攝入較為充足時(shí),攜帶MTHFR基因變異型者乳腺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)降低,因?yàn)槿~酸足夠可以保證正常的甲基化，從而減少DNA損傷的風(fēng)險(xiǎn)。相反,當(dāng)葉酸攝入不足時(shí),攜帶MTHFR變異基因型的人DNA甲基化和DNA合成/修復(fù)異常成為誘導(dǎo)乳腺癌發(fā)生的主要機(jī)制。一項(xiàng)Meta分析〔20〕也評價(jià)了攝入葉酸和乳腺癌發(fā)病率的相關(guān)性，該研究共納入14項(xiàng)前瞻性隊(duì)列研究共計(jì)677 858例個(gè)體，Meta分析結(jié)果提示葉酸攝入量高的個(gè)體和攝入量低者乳腺癌的發(fā)病率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=0.97，95%CI0.90～1.05;P=0.451)，劑量相關(guān)分析結(jié)果也提示每天增加葉酸攝入量并不能降低乳腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=0.99，95%CI0.98～1.01;P=0.361)，但是葉酸每天的攝入量大于400 μg時(shí)會增加乳腺癌的發(fā)病率，葉酸的攝入量與乳腺癌的發(fā)病率呈“J”形相關(guān)。這也提示乳腺癌的發(fā)生受環(huán)境因素、激素水平及基因多因素交互作用所致。再者，有研究〔6〕提示不同人群MTHFR基因 1298A>C位點(diǎn)的多態(tài)性頻率分布存在較大的差異，這也可能是導(dǎo)致不同地區(qū)乳腺癌易感性存在差異的原因之一，Shrubsole 等〔3〕在 研究中，發(fā)現(xiàn)對照與病例的 MTHFR基因在1298 位點(diǎn)中，1298位點(diǎn)CC的分布頻率分別為3.3%和3.8%；而Narayanan 等〔21〕在歐洲人群的研究中發(fā)現(xiàn)，MTHFR基因1298 位點(diǎn)CC缺高達(dá)14.6 %。

本研究尚存在以下局限性：納入研究均為中文和英文，沒有納入亞洲地區(qū)其他語種的文獻(xiàn)，雖然Begg檢驗(yàn)提示發(fā)表偏倚的可能性小，仍存在文獻(xiàn)漏檢的可能；有些研究對照人群來源于醫(yī)院，有些研究對照人群來源于社區(qū)，在年齡和性別方面不完全匹配，可能會影響研究的內(nèi)在真實(shí)性；乳腺癌是環(huán)境因素、易感基因及激素水平等多種因素共同作用的結(jié)果，由于原始數(shù)據(jù)的缺乏，無法分析MTHFR基因1 298位點(diǎn)多態(tài)性與其他因素的交互作用對亞洲人群乳腺癌易感性的影響，因此，上述結(jié)論仍需高質(zhì)量的研究進(jìn)一步去證實(shí)。