沈秀敏 黃 鑫 王 莉 劉 偉 王雨艷

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院產(chǎn)科，遼寧 錦州 121000)

子宮內(nèi)膜樣腺癌是中老年婦女常見疾病，病變常由復(fù)雜性增生發(fā)展而來，尤其是伴有非典型增生的腺上皮，惡變的風險更高〔1〕。腫瘤形成過程中間質(zhì)血管增生明顯，目前認為調(diào)節(jié)間質(zhì)血管生成的主要因子是血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)〔2〕。中期因子(MK)是一種肝素結(jié)合生長因子和分化蛋白，可能與腫瘤的生長和進展有關(guān)，MK可以作為腫瘤性篩查和隨訪的指標〔3〕，近年研究認為MK可能與腫瘤血管生成有關(guān)〔4〕。本實驗應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測子宮內(nèi)膜樣腺癌中MK和VEGF的表達，分析其在不同臨床病理特征中的表達及相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1臨床資料 2012年1月至2015年12月在錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院診斷為子宮內(nèi)膜樣腺癌并行手術(shù)治療的69例患者為觀察組，年齡41～86歲，平均59.3歲。納入均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO診斷標準及分型。排除標準：①林奇綜合征；②有生殖系統(tǒng)腫瘤病史；③有免疫性疾病或血液系統(tǒng)疾病。42例子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生患者為對照組，年齡38～69歲，平均59.8歲。42例因子宮脫垂行子宮全切的患者作為正常對照組，年齡53～85歲，平均62.3歲。均留取術(shù)后的病理組織。3組常規(guī)資料差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2MK和VEGF的表達檢測 選擇MK和VEGF蛋白的濃縮液，先行預(yù)實驗，選擇最理想的染色濃度用于實驗(MK為1∶200，VEGF為1∶300)。應(yīng)用免疫組化SP法完成檢測，行二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。操作嚴格按說明書進行，并由同一實驗人員完成，做好質(zhì)控。

1.3判讀標準 MK的表達部位是細胞質(zhì)和(或)細胞核，VEGF的表達部位是細胞質(zhì)，以染成淺黃-棕褐色為顯色。著色強度評分：0分無顯色；1分弱顯色；2分中顯色；3分強顯色。陽性百分率評分：選擇3個400倍視野的熱點區(qū)，計數(shù)陽性率，取平均值，0分，<5%；1分，5%～10%；2分，11%～30%；3分，31%～50%；4分，>50%。將著色強度評分+陽性百分率評分之和作為最終評定結(jié)果。以0～3分為陰性，以>3分為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件行χ2檢驗、線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1MK和VEGF表達陽性率比較 3組中MK和VEGF表達陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。見表1。

2.2觀察組中不同臨床特征患者MK和VEGF的表達 觀察組中MK和VEGF表達陽性率在不同腫瘤最大徑、細胞增殖指數(shù)患者中差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，MK表達陽性率在不同浸潤深度患者中差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，VEGF表達陽性率在不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和脈管累犯患者中差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

2.3觀察組中MK和VEGF表達相關(guān)性 MK和VEGF表達具有正相關(guān)性(r=0.53，P=0.029 5)。

表1 MK和VEGF表達陽性率比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征患者MK和VEGF陽性表達〔n(%)〕

3 討 論

子宮內(nèi)膜上皮是腺上皮，其異型增生引起腺上皮密集，細胞出現(xiàn)異型性，形成不典型增生繼發(fā)癌變〔5〕。子宮內(nèi)膜樣腺癌具有侵襲性，此過程伴隨著腫瘤高增殖狀態(tài)和間質(zhì)血管新生。VEGF主要調(diào)節(jié)血管新生，常通過VEGF受體2起作用〔6，7〕，誘導(dǎo)CD34和CD31陽性的血管內(nèi)皮細胞分裂繁殖，形成枝芽狀血管，在血液流動的沖擊作用下形成管腔后具有血管的功能，為局部組織提供營養(yǎng)支持〔8〕。MK是一種分泌型的堿性肝素結(jié)合蛋白，能促進細胞有絲分裂和增殖、血管生成、增強纖溶酶原激活劑活性、誘導(dǎo)細胞惡性轉(zhuǎn)化〔9，10〕，參與炎癥修復(fù)和腫瘤浸潤，從而影響腫瘤細胞的增殖、分化、凋亡和遷移〔11〕。也有研究認為MK可以激活雌激素受體(ER)途徑，并抑制細胞的凋亡〔12〕。而子宮內(nèi)膜樣腺癌是ER依賴的腫瘤，因此MK對子宮內(nèi)膜癌的促進作用與抑制凋亡有關(guān)〔5〕。也有學(xué)者認為MK可以激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)途徑，抑制Caspase3的激活，進而抑制腫瘤凋亡〔13〕。

本研究結(jié)果提示MK和VEGF高表達是腫瘤性病變形成的促進因素，二者高表達可以促進腫瘤生長，腫瘤細胞異型增生明顯，腫瘤體積增大，惡性程度增加〔14〕。MK參與腫瘤的侵襲過程，對周圍組織的破壞能力增強，局部蔓延加劇。MK高表達促進腫瘤細胞外基質(zhì)降解，使腫瘤播散的屏障——即基底膜和細胞外基質(zhì)降解，使腫瘤細胞更易形成局部播散〔15〕。另外VEGF高表達參與腫瘤的轉(zhuǎn)移和播散〔16〕。本文結(jié)果提示MK和VEGF具有正向協(xié)同作用，即MK高表達可以促進VEGF生成，進而促進腫瘤血管的生成，MK這種級聯(lián)作用是有效的，新生血管可以為腫瘤帶來營養(yǎng)和氧，對腫瘤細胞的增生和浸潤起到重要的支持作用〔17〕。