金姣 陳亞軍（通訊作者）

（南京市婦幼保健院檢驗(yàn)科 江蘇 南京 210004）

新生兒溶血病（HDN）是一種臨床常見(jiàn)的溶血性貧血病，常發(fā)生于胎兒和新生兒時(shí)期[1]。我國(guó)臨床發(fā)病率最高的是ABO血型不合引起的新生兒溶血病，其中檢測(cè)O型孕婦血清抗A（B）IgG效價(jià)是臨床上預(yù)測(cè)新生兒溶血病的常用方法[2]。然而這種方法需要在嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)的條件下操作，且檢測(cè)出的IgG效價(jià)和新生兒溶血病之間仍存在一定非相關(guān)性[3]。為了提供更準(zhǔn)確預(yù)測(cè)ABO血型引起的新生兒溶血病，本研究在已知孕婦血清中抗A（B）IgG效價(jià)和是否發(fā)生新生兒溶血病的基礎(chǔ)上，我們進(jìn)一步檢測(cè)孕婦及其新生兒血清中抗A（B）IgG各亞類(lèi)的含量，探究孕婦血清中抗A（B）IgG亞類(lèi)與HDN之間的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月—2017年12月在我院檢測(cè)的120例血型不合的O型孕婦及其新生兒血樣作為標(biāo)本來(lái)源。其中孕婦年齡在22～32歲之間，平均年齡（26.4±3.1）歲，孕齡28～35W，身體健康，無(wú)妊娠異常及并發(fā)癥；新生兒為足月生產(chǎn)，且排除其他異常新生兒，在出生48h內(nèi)進(jìn)行樣本送檢。

1.2 方法

（1）新生兒三項(xiàng)檢測(cè)：直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)（DAT），測(cè)定血清中游離抗體和紅細(xì)胞抗體釋放實(shí)驗(yàn)（熱放散法）。（2）制備血清中抗A（B） IgG：采用吸收和放散實(shí)驗(yàn)來(lái)制備血清中抗A（B） IgG。（3）采用ELISA法檢測(cè)血清樣本中抗A（B） IgG各亞類(lèi)含量：將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣品、孕婦以及新生兒血清中抗A（B） IgG樣本，按一定順序加入IgG亞類(lèi)含量檢測(cè)板，在37℃條件下溫育反應(yīng)1h；洗滌三次后再加入酶標(biāo)抗體，在37℃條件下溫育反應(yīng)1h；洗滌三次再加入顯色液，避光顯色0.5h；用酶標(biāo)儀檢測(cè)樣本在405nm處的吸光度值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線可以得到各樣本血清中抗A（B） IgG各亞類(lèi)含量。

1.3 HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)

ABO母嬰血型不合，臨床表現(xiàn)為新生兒三項(xiàng)檢測(cè)為陽(yáng)性，或紅細(xì)胞抗體釋放實(shí)驗(yàn)和直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)（DAT）其中一項(xiàng)為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2.結(jié)果

2.1 按照HDN診斷標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)本次研究中120例新生兒標(biāo)本中有53例HDN陽(yáng)性，67例HDN陰性。

2.2 采用ELISA法檢測(cè)120例新生兒血清樣本中抗A（B）IgG中各亞類(lèi)含量，見(jiàn)表1。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：新生兒中，HDN（+）組中IgG1水平要高于HDN（-）組，結(jié)果具有顯著性差異（P＜0.05）；而在IgG2、IgG3和IgG4水平上，兩組結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表1 新生兒HDN（+）組和HDN（-）組中IgG各亞類(lèi)含量（ng/mL）

2.3 采用ELISA法檢測(cè)120例孕婦血清樣本中抗A（B）IgG中各亞類(lèi)含量，見(jiàn)表2。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：孕婦中，HDN（+）組中IgG1水平高于HDN（-）組，結(jié)果具有顯著性差異（P＜0.05）；而在IgG2、IgG3和IgG4水平上，兩組結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表2 孕婦HDN（+）組和HDN（-）組中IgG各亞類(lèi)含量（ng/mL）

3.討論

新生兒溶血病起因?yàn)槟笅胙筒缓希R床上可致早期流產(chǎn)，表現(xiàn)為新生兒黃疸、貧血、胎兒水腫，嚴(yán)重可導(dǎo)致嬰兒死亡，給家庭和社會(huì)帶來(lái)巨大負(fù)擔(dān)[4]。因而，準(zhǔn)確預(yù)測(cè)新生兒溶血病的發(fā)生，可以為臨床采取有效、及時(shí)的預(yù)防和治療手段提供可能。

本次研究結(jié)果表明，孕婦和新生兒中，HDN（+）組中IgG1水平高于HDN（-）組，結(jié)果具有顯著性差異；而在IgG2、IgG3和IgG4水平上，兩組結(jié)果之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)果表明孕婦血清過(guò)高是引起HDN的主要因素。

綜上所述，孕婦血清中抗A（B）IgG1水平過(guò)高是引起ABO血型不合的主要原因，因而檢測(cè)孕婦血清中抗A（B）各IgG亞類(lèi)含量可以有效地預(yù)測(cè)新生兒溶血病的發(fā)生，該方法值得臨床進(jìn)一步推廣。