鄭雨,魏琳,鄧薇,李雪,宮汝淳,苗婷婷

摘要：探討西蘭花提取液對(duì)二甲基甲酰胺（DMF）誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型的保護(hù)作用。方法：60只小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、高、中、低濃度組及陽(yáng)性藥物組。通過(guò)DMF致小鼠肝損傷，測(cè)定小鼠血清中GPT、GOT及GSH的含量。結(jié)果顯示：西蘭花提取液能顯著抑制DMF所致急性肝損傷小鼠血清中的GPT、GOT含量的升高，還可以促進(jìn)GSH含量的升高，且有明顯促進(jìn)肝功能恢復(fù)的作用。光鏡下可見(jiàn)西蘭花提取液明顯改善肝組織損傷程度。結(jié)論：西蘭花提取液對(duì)DMF引起的小鼠肝損傷具有保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：西蘭花提取液；二甲基甲酰胺；肝損傷

基金項(xiàng)目：吉林省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃（編號(hào)： 2017093039）

中圖分類號(hào)： R730 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2018.18.023

西蘭花又名綠菜花、意大利芥蘭等，是一年生或越年生草本植物[1]。西蘭花含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，如植物性優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)、維生素、胡蘿卜素、類黃酮、硒等，最突出的有效成分是芥子油苷和黃酮類化合物[2]。據(jù)報(bào)道，西蘭花對(duì)保護(hù)血液有益，能解毒肝臟、預(yù)防高血壓、清化血管、增強(qiáng)機(jī)體免疫力[3]。近年來(lái)西蘭花防癌抗癌的作用被重點(diǎn)研究，但是還有很多值得被研究的藥理作用。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)DMF致小鼠肝損傷，測(cè)定小鼠血中GPT、GOT及GSH的含量，探討了西蘭花提取液對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，為進(jìn)一步研究西蘭花的藥用價(jià)值提供理論依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及藥品

健康CD小鼠60只，雄性，體重（18±2）g。

二甲基甲酰胺，護(hù)肝片，微量還原型谷胱甘肽測(cè)試盒，谷丙轉(zhuǎn)氨酶測(cè)試盒，谷草轉(zhuǎn)氨酶。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

徠卡冰凍切片機(jī)；生物顯微鏡；半自動(dòng)生化分析儀；離心機(jī)等。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1西蘭花提取液制備

將西蘭花90g，加水910ml，置于文火煮30min，過(guò)濾，反復(fù)3次，合并3次濾液得到高濃度西蘭花提取液，分別稀釋，得到中、低濃度西蘭花提取液。

2.2動(dòng)物分組及給藥

將小鼠隨機(jī)分為6組，模型組和高、中、低濃度組用DMF進(jìn)行造模，濃度為2.5g/kg，早、晚各一次；空白組灌胃等體積蒸餾水，共7d。造模完成灌胃西蘭花提取液，高、中、低濃度組分別灌胃濃度為9%的西蘭花提取液，陽(yáng)性藥物組灌胃濃度為0.0175g/mL的護(hù)肝片。15d后取各組小鼠進(jìn)行斷頭取血，制備血清用于谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）和還原型谷胱甘肽（GSH）的檢測(cè)，然后對(duì)肝組織切片進(jìn)行觀察。

2.3冰凍切片的制作

小鼠斷頭取血后，剖腹分離出肝臟組織，置于10%戊二醛中，然后用包埋劑包埋，冰凍切片機(jī)切5um厚切片，利用結(jié)晶紫染色。

2.4生化指標(biāo)的測(cè)定

藥物入血15d，斷頭取小鼠血0.5ml離心1min，12000r/min，取上清液用半自動(dòng)生化分析儀測(cè)血清中GPT、GOT、GSH含量的變化。

2.5數(shù)據(jù)處理

采取SPSS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，進(jìn)行t檢驗(yàn)，結(jié)果以（x±s）表示。

3 結(jié)果與分析

3.1西蘭花提取液對(duì)小鼠血清中GPT、GOT、GSH含量的影響

GPT、GOT、GSH的絕對(duì)OD值（x±s）

從上表可以看出：西蘭花提取液高濃度組、陽(yáng)性藥物組的GPT、GOT、GSH的OD值與模型組和空白組比較有極顯著差異（P<0.01），中濃度組與模型組和空白對(duì)照組比較有顯著差異（P<0.05），而低濃度組沒(méi)有差異。

3.2 西蘭花提取液對(duì)小鼠肝組織形態(tài)學(xué)的影響

將染色后的切片在（10×10）倍顯微鏡下進(jìn)行觀察，結(jié)果見(jiàn)圖1。

觀察空白組和陽(yáng)性藥物組小鼠肝臟，可見(jiàn)肝臟呈紅褐色，表面光滑，肝細(xì)胞體積較大，排列緊密，顯微鏡下肝細(xì)胞較飽滿，無(wú)破裂的細(xì)胞或壞死的細(xì)胞；模型組小鼠肝臟表面硬度較大，輕度水腫，有略微黑色，顯微鏡下可見(jiàn)大面積的細(xì)胞壞死，還可見(jiàn)皺縮的肝細(xì)胞、破裂的細(xì)胞核以及細(xì)胞碎片；高、中、低濃度組小鼠肝臟可見(jiàn)肝臟表面呈紅褐色，表面尚光滑，肝臟均有略微黑色，部分腫脹，在顯微鏡下可見(jiàn)少數(shù)破裂的細(xì)胞和壞死的細(xì)胞。

4 討論與結(jié)論

肝臟是以代謝為主的器官，在身體里扮演著去毒素，儲(chǔ)存糖原，分泌性蛋白質(zhì)合成等角色，谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高是肝臟功能出現(xiàn)問(wèn)題的一個(gè)重要指標(biāo)，在常見(jiàn)的因素里，各類肝炎都可以引起谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高，這是由于肝臟受到破壞造成的。谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝功能檢查中的一項(xiàng)重要指標(biāo)，在肝細(xì)胞與心肌細(xì)胞內(nèi)均存在，心肌細(xì)胞中含量高于肝細(xì)胞，但肝臟損害時(shí)谷草轉(zhuǎn)氨酶血清濃度也可升高。還原型谷胱甘肽是人類細(xì)胞質(zhì)中自然合成的一種肽，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成，含有巰基（-SH），廣泛分布于機(jī)體各器官內(nèi)，對(duì)維持細(xì)胞生物功能有重要作用。在本實(shí)驗(yàn)中西蘭花提取液可以抑制小鼠血清中GOT、GPT含量的升高，還可以促進(jìn)GSH含量的升高，對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)均有不同程度的改善。

西蘭花提取液對(duì)二甲基甲酰胺致小鼠肝損傷有一定的保護(hù)作用，可以用西蘭花制成護(hù)肝藥物，為進(jìn)一步分析西蘭花提取液對(duì)小鼠肝損傷的影響提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]李向果.西蘭花葉中硫代葡萄糖苷和原花青素的生物學(xué)效價(jià)評(píng)定[D].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013：23-3.

[2]洪姣，王佳蕊，黃春琦，等.西蘭花預(yù)防和治療腫瘤研究的新進(jìn)展[J].腫瘤藥學(xué)，2014（06）：405-409.

[3]錢麗麗，劉江麗，李揚(yáng)，等.西蘭花中硫代葡萄糖苷的提取及抑菌實(shí)驗(yàn)初報(bào)[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008（02）：335-338.

作者簡(jiǎn)介：鄭雨，在讀本科生，研究方向：動(dòng)物生理及藥理。

通訊作者：苗婷婷，碩士研究生，實(shí)驗(yàn)師，研究方向：動(dòng)物生理及藥理。