方茜，曹玉美，銀泉鳳，陳遠(yuǎn)鵬，孫如水，李玉姿

（廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司良圻原種豬場(chǎng)，廣西 橫縣 530317）

隨著現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，集約化、規(guī)模化養(yǎng)殖模式已經(jīng)取代了傳統(tǒng)的家庭化養(yǎng)殖模式，對(duì)于自繁自養(yǎng)的規(guī)模化豬場(chǎng)而言，其管理的重點(diǎn)是種豬，而種豬管理的重要環(huán)節(jié)便是產(chǎn)房[1]。如今，隨著飼養(yǎng)密度不斷增加，傳染性疾病的傳播風(fēng)險(xiǎn)也逐漸增大，因此，控制致病微生物在產(chǎn)房中的傳播和擴(kuò)散成為保障豬群健康、提高生產(chǎn)成績的有效途徑。就產(chǎn)房而言，在每批仔豬斷奶后到新調(diào)入妊娠母豬的這段時(shí)間里，做好空欄消毒工作是至關(guān)重要的。目前，采用噴霧消毒殺滅豬舍環(huán)境中的微生物是豬場(chǎng)常用的消毒方法[2]，但市面上的消毒劑效果參差不齊，配合使用的方案也琳瑯滿目，選擇有效的消毒劑，并按照合理的消毒方案進(jìn)行消毒成為消毒成敗的關(guān)鍵因素。本試驗(yàn)采用細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)的方式，對(duì)所使用的消毒劑與消毒方案進(jìn)行消毒效果評(píng)估，并比較兩種消毒方案的殺菌效率，為消毒方案的合理制定提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 40%二氯異氰脲酸鈉，1∶1000稀釋備用；戊二醛癸甲溴銨，1∶500 稀釋備用；6.25%生石灰，5∶80稀釋備用；4%燒堿稀釋液；沖欄機(jī)，普通營養(yǎng)瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基。

1.2 時(shí)間與地點(diǎn) 試驗(yàn)于2017年8月28日～9月3日在廣西良圻原種豬場(chǎng)A豬場(chǎng)產(chǎn)房（產(chǎn)5、產(chǎn)6）進(jìn)行。兩棟產(chǎn)房面積相同，長為40m、寬為8.4m，面積為336m2。

1.3 方法與步驟

1.3.1 消毒方案 方案一（產(chǎn)5）：采用“4%燒堿沖洗欄舍→40%二氯異氰脲酸鈉→戊二醛癸甲溴銨→生石灰”消毒三次的方式；方案二（產(chǎn)6）：采用“4%燒堿沖洗欄舍→40%二氯異氰脲酸鈉→生石灰”消毒二次的方式。

1.3.2 操作步驟

（1）方案一：早上斷奶結(jié)束后立刻進(jìn)行第一次采樣，取得初始菌落數(shù)，關(guān)閉窗戶后先用4%燒堿稀釋液沖洗欄舍，沖洗完畢后持續(xù)封閉欄舍14h，再通風(fēng)干燥3 h，之后進(jìn)行第二次采樣，取得沖洗欄舍后的菌落數(shù)；通風(fēng)干燥完畢后，使用稀釋好的40%二氯異氰脲酸鈉進(jìn)行第一次空欄消毒，消毒后封閉14h，再通風(fēng)干燥3 h，然后進(jìn)行第三次采樣，取得第一次空欄消毒后的菌落數(shù)；接著用稀釋好的戊二醛癸甲溴銨進(jìn)行第二次空欄消毒，消毒后同樣封閉14h、干燥3 h，并進(jìn)行第四次采樣，取得第二次空欄消毒后的菌落數(shù)；最后用稀釋好的6.25%生石灰進(jìn)行第三次空欄消毒，直接干燥17 h后進(jìn)行第五次采樣，取得第三次空欄消毒后的菌落數(shù)。

（2）方案二：僅按原始的消毒流程進(jìn)行消毒。首先用燒堿稀釋液沖洗完畢，再使用40%二氯異氰脲酸鈉（1∶1000）消毒，封閉 14h、通風(fēng)干燥 3h，接著用6.25%生石灰（5∶80）消毒，封閉 14h、通風(fēng)干燥 3h，即結(jié)束消毒，采樣時(shí)間同方案一。

1.3.3 采樣方法 用無菌棉簽對(duì)硬質(zhì)地板表面進(jìn)行多點(diǎn)采樣。采集點(diǎn)為產(chǎn)5（方案一）和產(chǎn)6（方案二）的南4欄、北10欄、南17欄這3個(gè)位置。采樣的表面包括仔豬料槽、保溫箱外壁、母豬料槽、地面、產(chǎn)床欄桿、墻面、產(chǎn)床表面、電線桿支架。

1.3.4 樣品處理 將棉拭子用5mL無菌生理鹽水浸泡，渦旋振蕩，洗脫細(xì)菌。將1mL菌液與配制好的普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基澆板混勻，冷卻后分別放置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24～48h，記錄培養(yǎng)皿菌落數(shù)，取平均值統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。

1.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 計(jì)算出每個(gè)時(shí)間段的細(xì)菌總數(shù)，采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，比較不同消毒方案的消毒效果差異，并計(jì)算其殺菌率。

細(xì)菌總菌落數(shù)（CFU/mL）=平板上菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)；殺菌率=（消毒前菌落數(shù)-消毒后菌落數(shù)）/消毒前菌落數(shù)×100%。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 殺菌率的比較 表1、表2分別為方案一（產(chǎn)5）經(jīng)過3次消毒處理，每次采樣后在普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上培養(yǎng)、計(jì)數(shù)得到的菌落數(shù)及相應(yīng)殺菌率；表3、表4分別為方案二（產(chǎn)6）經(jīng)過兩次消毒處理，每次采樣后在普通培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上培養(yǎng)、計(jì)數(shù)得到的菌落數(shù)及相應(yīng)殺菌率；圖1、圖2分別為產(chǎn)5、產(chǎn)6在消毒前和完成消毒后，各個(gè)采樣點(diǎn)的細(xì)菌數(shù)量。

表1 采用方案一消毒后在普通培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù) CFU/mL

表2 采用方案一消毒后在麥康凱培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù) CFU/mL

表3 采用方案二消毒后在普通培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)CFU/mL

表4 采用方案二消毒后在麥康凱培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù) CFU/mL

圖1 方案一各采樣點(diǎn)在消毒前、后的細(xì)菌數(shù)量

圖2 方案二各采樣點(diǎn)在消毒前、后的細(xì)菌數(shù)量

2.2 分析 由表1分析可知，斷奶之后產(chǎn)房內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量比較多，采用方案一經(jīng)過4%燒堿沖洗后，總菌落數(shù)和大腸桿菌數(shù)量明顯下降（P＜0.05），對(duì)大腸桿菌的殺菌率達(dá)到了99%以上，證明用燒堿沖洗欄舍很有效。用40%二氯異氰脲酸鈉進(jìn)行第一次消毒后，對(duì)欄舍中3個(gè)點(diǎn)的總菌殺菌率分別為90.72%、82.98%、90.11%，平均殺菌率為87.94%；使用戊二醛癸甲溴銨進(jìn)行第二次消毒后，對(duì)欄舍中3個(gè)點(diǎn)的總菌殺菌率分別為93.75%、92.86%、94.22%，平均殺菌率為93.61%；最后再用6.25%生石灰進(jìn)行第三次消毒，對(duì)欄舍中3個(gè)點(diǎn)的總菌殺菌率分別為98.35%、97.78%、95.75%，平均殺菌率為97.29%。

由表3分析可知，方案二在使用4%燒堿沖洗欄舍后，其細(xì)菌數(shù)量也明顯下降，前后細(xì)菌數(shù)量差異顯著（P＜0.05），對(duì)大腸桿菌的殺菌率也達(dá)到了99%以上；使用40%二氯異氰脲酸鈉進(jìn)行第一次消毒后，對(duì)欄舍中3個(gè)點(diǎn)的總菌殺菌率分別為84.08%、86.66%、90.86%，平均殺菌率為87.2%；用6.25%生石灰進(jìn)行第二次消毒后，對(duì)欄舍中3個(gè)點(diǎn)的總菌殺菌率分別為95.78%、90.36%、93.56%，平均殺菌率為93.23%。

由圖1和圖2分析可知，通過利用方案一和方案二消毒后，欄舍中各區(qū)域的細(xì)菌數(shù)量都有所減少，且方案一的細(xì)菌殘存量少于方案二，細(xì)菌數(shù)量差異顯著（P＜0.05）。就具體的消毒位置而言，仔豬料槽、地面、產(chǎn)床表面、電線桿支架等地方的細(xì)菌殘存量較大，這些地方均為易疏漏之處，故在之后的消毒工作中應(yīng)對(duì)這些死角加以重視。

3 討論

眾所周知，產(chǎn)房衛(wèi)生是豬場(chǎng)管理的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，是母豬繁殖效率管理的一部分，而消毒是豬場(chǎng)生物安全防控的重要措施，做好產(chǎn)房的消毒衛(wèi)生工作，不僅能夠?yàn)槟肛i和新生仔豬提供潔凈的生存環(huán)境，還能斷絕致病性微生物在豬場(chǎng)流通，降低疫病風(fēng)險(xiǎn)，從而提高生產(chǎn)效率[3]。

目前常見的消毒方式包括噴灑法，即：將配置好的消毒液直接用噴槍噴灑，適用于妊娠舍、育肥舍、走道等；高壓噴霧法：用專用高壓噴霧器向空中噴霧，適用于任何空間的消毒；還有熏蒸消毒，紫外線照射消毒等[4]。消毒劑的類型也是種類繁多，按照成分不同可以分為醛類、鹵素類、碘類、堿類、過氧化類、酚類、季銨鹽類、醇類。本試驗(yàn)所使用的戊二醛癸甲溴銨，是我國近年來新推出的一種新型復(fù)方消毒劑，它綜合了醛類和季銨鹽類消毒劑的優(yōu)點(diǎn)，具有雙重殺菌效果[5]。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)設(shè)計(jì)了兩種消毒方案，通過對(duì)比不同消毒方案的消毒效果，研究戊二醛癸甲溴銨的有效性，從而更好地?cái)M定科學(xué)合理的消毒方案。從結(jié)果可以看出，方案一和方案二在僅經(jīng)過4%燒堿沖洗和40%二氯異氰脲酸鈉消毒后，平均殺菌率分別為87.94%、87.2%，達(dá)不到90%，因此有進(jìn)行第二次空欄消毒的必要。方案一在經(jīng)過3次干燥消毒后，平均殺菌率達(dá)到了97.29%，而方案二在沒有使用戊二醛癸甲溴銨消毒劑的情況下，平均殺菌率為93.23%，比方案一低了4.06個(gè)百分點(diǎn)，可見方案一的消毒效果優(yōu)于方案二。因此，加用戊二醛癸甲溴銨類消毒劑能夠在一定程度上增強(qiáng)殺菌效果。