羅雪，李然，阿比克哈莫，湯承，岳華

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川 成都 610041）

腹瀉是犢牛的常發(fā)疾病，其既可由細(xì)菌、病毒、寄生蟲等引起，也可由營養(yǎng)因素、環(huán)境因素引發(fā)，一般病原微生物感染是引發(fā)犢牛腹瀉的主要原因。腹瀉嚴(yán)重影響犢牛成活率，幸存犢牛的生長發(fā)育和生產(chǎn)性能也會受到影響。

1 臨床癥狀

某養(yǎng)殖戶的4頭犢牦牛發(fā)生以急性腹瀉為特征的疾病。病牛精神沉郁、被毛粗糙、呼吸短促，水樣腹瀉，糞便呈灰白色，其中3頭牛的糞便混有鮮血。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測

2.1 糞便處理及核酸提取 采集病牛糞便按1∶5（V/V）加入生理鹽水制成懸液，-80℃反復(fù)凍融3次，5000r/min離心10min，按照和酚-氯仿法提取DNA，按照Trizol法提取RNA，并參照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明合成cDNA。

2.2 PCR檢測 檢測牛輪狀病毒（BRV）、牛冠狀病毒（BCV）、牛病毒性腹瀉/黏膜病病毒（BVDV）、大腸桿菌K99、沙門菌的特異性PCR，以糞便DNA和cDNA為模板，參照相關(guān)文獻(xiàn)方法進(jìn)行PCR擴(kuò)增和凝膠電泳鑒定。

3 診斷

PCR從4份糞便樣本中擴(kuò)增出4個BRV的特異條帶和2個BCV的特異性條帶，與陽性對照條帶大小一致。未檢出BVDV、大腸桿菌K99和沙門菌。

根據(jù)臨床癥狀，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測，確診犢牦牛腹瀉是由BRV、BCV混合感染所致。

4 小結(jié)

細(xì)菌和病毒感染是導(dǎo)致犢牛腹瀉的常見原因，臨床上常見兩種及兩種以上的病原混合感染。本實(shí)驗(yàn)對患牛糞便中BRV、BCV、BVDV、大腸桿菌K99、沙門菌5種常見病原進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示牦牛腹瀉由BRV、BCV混合感染所致。

BRV是常見的導(dǎo)致犢牛腹瀉的病原，BCV也是引起犢牛腹瀉的主要病原，且可引起成年牛冬痢和呼吸道疾病。