王袁斐懿 ,王晨曦 ,蒲鋒 ,呂雯婷 ,徐志文
(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,四川 溫江 611130;2.四川省南部縣火峰鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,四川 南部 637300)
豬流行性腹瀉(PED)是豬的一種急性、高度傳染性腸道傳染病,其致病因子為豬流行性腹瀉病毒(PEDV)。豬PED的臨床癥狀包括嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、厭食、脫水和體重減輕等。
本病各品種、各生長階段的豬均可感染,尤以哺乳仔豬發(fā)病最為嚴(yán)重,其死亡率可達(dá)100%,即使耐過,也生長緩慢、料重比增高。
PED一年四季均可發(fā)生,每年12月至次年3月是高發(fā)期。豬通過直接接觸及間接接觸被感染,本病還可通過哺乳等途徑傳播。糞便和乳汁為PED的主要傳播物,主要經(jīng)“糞-口”或“奶-口”等消化道途徑感染。
PED傳播速度快、傳播范圍廣,感染率高。多種PEDV變異毒株的出現(xiàn)、與其他病毒的混合感染、與豬傳染性胃腸炎(TGE)等疾病相似的流行病學(xué)和臨床特征導(dǎo)致本病診斷困難,給PED的防治造成了困難。
2.1 疫苗免疫
2.1.1 傳統(tǒng)疫苗 1993年有學(xué)者通過人工感染仔豬并收集其腸內(nèi)容物和組織制備出PED滅活組織疫苗,隨后利用Vero細(xì)胞成功傳代弱化CV777毒株,制備出PEDV氫氧化鋁佐劑滅活疫苗。該疫苗通過后海穴針刺免疫后,仔豬主動(dòng)及被動(dòng)免疫保護(hù)率超過85%。
1998年有學(xué)者證實(shí)CV777減毒株適用于制備弱毒疫苗,其制備并使用第90代的毒株開發(fā)了PEDV弱毒疫苗,疫苗通過后海穴針刺免疫后保護(hù)率達(dá)85%以上,其開發(fā)的TGEV和PEDV二聯(lián)弱毒苗在控制PEDV和TGEV感染中發(fā)揮著重要作用。在TGEV和PEDV二聯(lián)弱毒苗的基礎(chǔ)上制備了TGEV,PEDV和PRoV三聯(lián)苗,疫苗試驗(yàn)結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)場豬病毒性腹瀉發(fā)病率由8%~12%降至了3%~5%。
2.1.2 基因工程疫苗 黏膜免疫在病毒性腹瀉病的免疫中起重要作用,由腸黏膜分泌的免疫球蛋白A(sIgA)可防御病原體入侵??诜呙缈纱碳ゐつっ庖弋a(chǎn)生效應(yīng),產(chǎn)生IgA,是預(yù)防腸道感染性疾病的有效方法。
2007年,Hou等構(gòu)建了能表達(dá)PEDV-N蛋白的乳桿菌,其可激活sIgA和針對(duì)PEDV N蛋白的IgG產(chǎn)生。Ge等發(fā)現(xiàn),經(jīng)口服免疫后,表達(dá)PEDVN蛋白及S蛋白核心中和抗原表位(COE)的重組乳酸桿菌疫苗可刺激腸道產(chǎn)生局部免疫應(yīng)答及全身免疫應(yīng)答。Liu等構(gòu)建了能表達(dá)PEDV N基因或S基因S1區(qū)域的重組乳桿菌,口服免疫結(jié)果表明,表達(dá)N蛋白的重組乳桿菌可增強(qiáng)表達(dá)S蛋白S1片段的重組乳酸桿菌介導(dǎo)的黏膜和全身免疫應(yīng)答。PEDV S蛋白可介導(dǎo)中和抗體的產(chǎn)生,常被選作疫苗研究靶標(biāo),2013年Meng等構(gòu)建了表達(dá)PEDV S基因的重組真核質(zhì)粒,作為新型DNA疫苗,其在接種后能有效地激活細(xì)胞介導(dǎo)的免疫,并立即在免疫動(dòng)物中產(chǎn)生較高水平的抗體。Liang等在構(gòu)建表達(dá)PEDV S基因S1區(qū)的重組真核質(zhì)粒的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步構(gòu)建了沙門氏菌弱毒菌株。
2.1.3 免疫途徑 通過不同免疫途徑免疫將產(chǎn)生不同的免疫效果。有學(xué)者通過對(duì)比口服和肌注相同劑量的同種PEDV弱毒疫苗后豬血清中的抗體水平,發(fā)現(xiàn)口服疫苗比肌注疫苗產(chǎn)生的抗體水平更高,還有研究證實(shí)后海穴免疫可起免疫放大作用。另有學(xué)者分別采用注射、口服、滴鼻及口服加滴鼻方式對(duì)產(chǎn)前40 d母豬進(jìn)行免疫,結(jié)果發(fā)現(xiàn)對(duì)血液中IgG的含量影響不大,但滴鼻免疫明顯提高了乳汁中IgG及IgA含量,產(chǎn)生了較好的免疫效果。
由于PEDV主要通過黏膜感染動(dòng)物,所以血液中的抗體IgG不能提供足夠的保護(hù),而仔豬主要通過初乳及乳汁獲得PEDV的被動(dòng)免疫保護(hù),所以對(duì)妊娠母豬進(jìn)行PED疫苗免疫有助于減少仔豬PED的發(fā)生,降低豬場PED的嚴(yán)重程度,且黏膜免疫是仔豬獲得免疫保護(hù)的最佳途徑。
2.2 卵黃抗體防治 卵黃免疫球蛋白(IgY)是指禽類受到特定抗原免疫刺激后,血液中IgG進(jìn)入卵黃,并成為卵黃中唯一的免疫球蛋白。
由于豬與禽類的親緣關(guān)系較遠(yuǎn),IgY能識(shí)別豬體內(nèi)不能識(shí)別的抗原決定簇,能對(duì)豬源病原體產(chǎn)生較強(qiáng)免疫應(yīng)答。
2003年有學(xué)者制備了抗PEDV高免卵黃抗體應(yīng)用于腹瀉仔豬,結(jié)果減輕了腹瀉癥狀。2012年有學(xué)者制備出抗TGEV和PEDV二價(jià)高免卵黃抗體,其臨床治愈率達(dá)88%。
2.3 中藥治療 許多中藥具有抑菌及殺毒功效,可阻斷病毒的復(fù)制,或通過提高機(jī)體免疫力間接抑制病毒復(fù)制。
針對(duì)PED主要以益氣健脾、淡滲利濕為主,可選擇的中藥主要有黨參、柴胡、黃芪、三七、白頭翁、板藍(lán)根、女貞子、穿心蓮等。
2.4 加強(qiáng)管理 生豬養(yǎng)殖管理好壞影響著PED的防治效果。豬場應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,保持舍內(nèi)通風(fēng),清潔、干燥,并實(shí)行全進(jìn)全出,防止交叉感染。進(jìn)出豬場的物品、車輛及人員均應(yīng)嚴(yán)格消毒,嚴(yán)防病原入侵。一旦發(fā)生病情應(yīng)及早隔離病豬并嚴(yán)格消毒。
2.5 其他措施
2.5.1 返飼 返飼是指用病豬腸管及內(nèi)容物喂食產(chǎn)前母豬,以通過母源抗體對(duì)仔豬起保護(hù)作用。
采用此法前須確定PEDV為喂養(yǎng)物中的唯一病原體,否則存在散毒風(fēng)險(xiǎn),非反復(fù)發(fā)生PED的豬場一般不提倡使用此法。
2.5.2 噴霧干燥血漿的使用 噴霧干燥血漿(SDP)是從健康動(dòng)物的血液中獲得的高蛋白產(chǎn)品,其保留了大部分的生物活性。
SDP可增強(qiáng)腸道屏障功能,并通過調(diào)節(jié)派爾集合淋巴結(jié)及腸相關(guān)淋巴組織的免疫效應(yīng),減輕腹瀉的發(fā)生。