王 麗*，王秀麗

（1.山東省聊城市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科聊城大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 聊城 252000；2.山東省聊城市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 聊城 252000）

宮頸癌（Cervical Cancer，CC）是世界女性中最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率與死亡率僅次于乳腺癌而位居第二，其中80%以上的宮頸癌患者在發(fā)展中國(guó)家[1]。人乳頭瘤病毒（Human papilloma virus， HPV） 持續(xù)性感染是造成臨床上宮頸癌發(fā)生和發(fā)展的原因， HPV DNA幾乎在所有的宮頸癌中均可被檢測(cè)到[2]。在女性生殖道中，根據(jù)HPV致癌性的不同，可分為高危型（HRHPV），可能高危型和低危型（LR-HPV）。HPV16和HPV18是目前報(bào)道的最常見(jiàn)的與宮頸癌相關(guān)的型別，約70%以上的侵襲性宮頸癌是由這兩種型別的病毒感染引起[3]。

HPV的基因組中，使HPV病毒具有永生化和轉(zhuǎn)化的潛能主要與E6和E7兩個(gè)致癌蛋白有關(guān)。HPV整合是隨機(jī)的，同時(shí)也具有一定的傾向性，在脆性或異位斷裂位點(diǎn)等熱點(diǎn)區(qū)域[4]相對(duì)更易發(fā)生。本研究使用高通量全基因組測(cè)序方法對(duì)病毒整合事件進(jìn)行檢測(cè)，探討了宮頸癌中HPV16整合與宮頸癌組織的臨床病理因素的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，收集2012年5月～2017年5月我院因?qū)m頸癌行根治術(shù)擁有完整臨床資料的患者36例。所有病例均經(jīng)病理學(xué)確證?；颊咝g(shù)前HPVNDA陽(yáng)性，既往無(wú)CIN病史及宮頸錐切病史，無(wú)盆腔放療病史。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

使用高通量基因測(cè)序和芯片捕獲方法在深圳華大基因公司進(jìn)行測(cè)序分析。測(cè)序所得的序列在除去載體序列后取插入載體部分序列與NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)用在線BLAST程序比對(duì)，將所得的人基因組序列在NCBI-Map Viewer中進(jìn)行查詢(xún)，了解病毒整合位置。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用x2檢驗(yàn)或者Fisher’s精確檢驗(yàn)等對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

HPV 16整合與宮頸癌的臨床分期相關(guān)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HPV16整合率在宮頸鱗癌，間質(zhì)浸潤(rùn)深度≥1/2和淋巴血管間隙受累的病例中升高；HPV16整合率在其他病理因素中均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但可提示以上臨床病理因素與病毒整合的相關(guān)。

表1 HPV 16整合與宮頸癌臨床病理之間的關(guān)系

3 討 論

HPV感染后，和宿主發(fā)生的一系列事件促進(jìn)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化， HPV發(fā)生整合，編碼E6和E7蛋白的轉(zhuǎn)錄子的表達(dá)和穩(wěn)定性提高，E6和E7蛋白能結(jié)合P53和pRb等細(xì)胞周期關(guān)鍵性調(diào)節(jié)蛋白并干擾其作用[5]。病毒整合導(dǎo)致了病毒癌基因E6和E7的持續(xù)性表達(dá)，也影響宿主DNA的功能。在本研究中，有29例標(biāo)本檢測(cè)到HPV16整合，其中12例樣本均檢測(cè)到2個(gè)以上整合位點(diǎn)，其中1例檢測(cè)到了23次整合，提示HPV16可能傾向多點(diǎn)整合到啟動(dòng)子區(qū)域。

HPV16在Ib2-IIa的宮頸癌中整合事件出現(xiàn)的概率高于Ib1。HPV16的整合率在宮頸鱗癌，間質(zhì)浸潤(rùn)深度≥1/2和淋巴血管間隙受累的病例中升高；HPV16整合率在其他病理因素統(tǒng)計(jì)中均無(wú)意義，但仍提示臨床病理因素與病毒整合有關(guān)，宮頸間質(zhì)浸潤(rùn)深度≥1/2和淋巴血管間隙受累可能是病毒多次整合的高危因素之一。有研究顯示，HPV16整合狀態(tài)與臨床分期、病理類(lèi)型、組織學(xué)分化相關(guān)不明顯，其整合狀態(tài)與預(yù)后無(wú)明顯關(guān)聯(lián)[6]。由于既往研究中均使用E2/E6基因比值計(jì)算病毒整合狀態(tài)，結(jié)果顯示與本研究略有不同，可能與研究使用的檢測(cè)方法不同有關(guān)。

綜上所述，在宮頸癌中，HPV16整合事件發(fā)生與頻率隨臨床分期加重而升高；在宮頸間質(zhì)浸潤(rùn)深度≥1/2和淋巴血管間隙受累的樣本中整合事件更容易發(fā)生。